Fabrication des électrodes et l'implantation de Aplysia californica Des enregistrements multi-canaux neuronaux et musculaires au Intact, Animaux Librement Behaving
Summary
Une technique est décrite pour l'implantation de quatre<em> In vivo</em> Électrodes pour surveiller le contrôle neuromusculaire du comportement alimentaire chez les<em> Aplysia californica</em>.
Abstract
Enregistrement à partir de nerfs et des muscles clés du<em> Aplysie</em> Au cours du comportement alimentaire nous permet d'étudier les modalités de contrôle neural chez un animal intact. Simultanément enregistrement à partir de multiples nerfs et des muscles nous donne des informations précises sur le calendrier de l'activité neuronale. Méthodes d'enregistrement antérieures ont travaillé pendant deux électrodes, mais l'étude des nerfs ou des muscles supplémentaires nécessaires combinant et la moyenne des enregistrements de plusieurs animaux, ce qui rend difficile de déterminer les détails fins du calendrier et les étapes, en raison de la variabilité de la réponse à la réponse, et de animal à l'autre. L'implantation de quatre électrodes individu a un taux de réussite très faible en raison de la formation d'adhérences qui empêchent les animaux d'accomplir des mouvements alimentation normale. Nous avons développé une nouvelle méthode de fabrication d'électrodes qui réduit la majeure partie des électrodes à l'intérieur de l'animal permettant des mouvements de l'alimentation normale. En utilisant une combinaison de colles pour fixer les résultats des électrodes dans une isolation plus fiable de l'électrode qui dure plus longtemps, ce qui permet d'enregistrer des périodes aussi longues que d'une semaine. La technique de fabrication que nous décrivons pourrait être étendue pour incorporer plusieurs électrodes supplémentaires, et serait applicable aux animaux vertébrés.
Protocol
Discussion
Une innovation clé qui a fait ces enregistrements succès est la combinaison des électrodes dans un seul câble. Deux enregistrements d'électrodes ont été utilisées avant, mais en élargissant à quatre électrodes individuelles conduit à la formation d'adhérences chirurgicales qui ont souvent empêché l'animal de faire des mouvements alimentation normale. Combinant les électrodes dans un seul câble réduit la majeure partie des électrodes à l'intérieur de l'animal, qui à son tour réd…
Acknowledgements
Nous remercions le soutien du NIH (NS047073 au CSM). Nous sommes également reconnaissants à Catherine pour son Kehl premières expériences Kwik-Sil, qui nous a encouragés à l'utiliser pour notre application.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Enamel coated stainless steel wire | California Fine Wire | 0.001D, coating h | ||
| Household Silicone II Glue | GE | |||
| Kwik-Sil Adhesive | WPI | |||
| Duro Qwik-Gel superglue | Henkel corp. | |||
| A-M Systems model 1700 amplifier | A-M Systems | Filter settings:100-1000Hz nerves,10-1000Hz I2 muscle | ||
| Axoscope 10.1 | Molecular Devices | |||
| Gold Connector Pins | Bulgin | SA3148/1 | ||
| Gold Connector Sockets | Bulgin | SA3149/1 |
References
- Lu, H., Chestek, C. A., Shaw, K. M., Chiel, H. J. Selective extracellular stimulation of individual neurons in ganglia. J. Neural Eng. 5, 287-309 (2008).
- Morton, D. W., Chiel, H. J. In vivo buccal nerve activity that distinguishes ingestion from rejection can be used to predict behavioral transitions in Aplysia. J Comp. Physiol. A. 172, 17-32 (1993).
- Warman, E. N., Chiel, H. J. A new technique for chronic single extracellular recording in freely behaving animals using pipette electrodes. J. Neurosci. Methods. 57, 161-169 (1995).
- Ye, H., Morton, D. W., Chiel, H. J., J, H. nbsp;Neuromechanics of multifunctionality during rejection in Aplysia californica. J. Neurosci. 26, 10743-10755 (2006).
