המטרה של המצגת היא להדגים שיטה לשחזור מאוד ליצור מטריצה תא הקשורים שתלים גזע פגמים הסחוס, אשר יכול להיות דמיינו עם MR הדמיה. בתאי גזע מסומנים עם ה-FDA Ferumoxides, מעורבב עם agarose, מושתלים לתוך פגמים סחוס צילמו עם סורק 7T MR.
Abstract
תחום הנדסת הרקמות משלבת את עקרונות הביולוגיה, ההנדסה והרפואה תא לקראת התחדשות של תאים ספציפיים רקמות תפקודית. מטריקס תאים הקשורים גזע שתלים (מאסי) במטרה לחדש פגמים הסחוס עקב פציעות משותף דלקת פרקים או טראומטי. למבוגרים בתאי גזע mesenchymal (MSCs) יש את היכולת להתמיין לתאי השושלת chondrogenic ו הראו תוצאות מבטיחות עבור התא מבוססי טכנולוגיות הסחוס במפרק לתקן. עצמיים MSCs יכול להיות מבודד במגוון של רקמות, ניתן להרחיב בתרביות תאים מבלי לאבד פוטנציאל הבידול שלהם, הדגימו בידול chondrogenic במבחנה1 vivo, 2.
כדי לספק שמירה מקומיים הכדאיות של MSCs המושתלים פגמים סחוס, פיגום יש צורך, התומך גם בידול התפשטות עתידיים. הארכיטקטורה של היווצרות רקמה פיגום מדריכים מאפשר תאי מטריקס, המיוצר על ידי בתאי גזע, להרחיב. תחקירים קודמים הראו כי 2% agarose פיגום עשוי לתמוך בפיתוח של הסחוס hyaline יציב ואינו לגרום התגובה החיסונית 3.
שימור ארוך טווח של בתאי גזע מושתלים מאסי הוא קריטי עבור התחדשות הסחוס. תיוג של MSCs תחמוצת ברזל עם חלקיקים מאפשר לטווח ארוך מעקב vivo עם פולשנית טכניקות הדמיה MR 4.
מצגת זו תדגים טכניקות MSCs תיוג עם חלקיקי תחמוצת ברזל, הדור של תאים agarose בונה ההשתלה של מבנים אלה לתוך פגמים הסחוס. בונה שכותרתה ניתן לעקוב הלא פולשני עם MR-Imaging.
Protocol
1. תיוג של hMSCs עם Endorem התאים גדלים על מפגש 80% לפחות 18 שעות לפני תיוג. במהלך תקופה זו, התקשורת תיוג מוכן ידי הוספת Endorem המדגם במינון של 100 UG Fe / מ"ל סרום ללא התקשורת. …
Discussion
פרוטוקול תיאר מספק דרך לשחזור לתייג MSCs חלקיקי תחמוצת ברזל עם השתל ואת אלה MSCs שכותרתו לתוך פגמים הסחוס. טכניקה זו מאפשרת לא פולשנית תיאור של השתלת תא גזע פגמים סחוס עם MR הדמיה, המאפשרת גילוי מוקדם של כשל מאסי. נקע או בזרימת של תאים שכותרתו ניתן לאבחן מבוסס על היעלמותה ש?…
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי מענק מטעם המכון הלאומי של דלקת מפרקים ומחלות עור השלד והשרירים, NIH RO1AR054458.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
D-MEM High Glucose
Reagent
Sigma
D5648
PBS (Ca++, Mg++ free)
GIBCO
14190-144
Trypsin-EDTA 0.05%
Invitrogen
25399-120
FBS
Hyclone
SH30071.03
Penicillin/Streptomycin
GIBCO
15140-122
Ferumoxides (Endorem)
Guerbet
Agarose Typ VII
Sigma
A9045
Dilute Agarose in PBS to final concentration of 4%
Nedopil, A. J., Mandrussow, L. G., Daldrup-Link, H. E. Implantation of Ferumoxides Labeled Human Mesenchymal Stem Cells in Cartilage Defects. J. Vis. Exp. (38), e1793, doi:10.3791/1793 (2010).