Summary

乳腺上皮移植手术

Published: June 10, 2010
doi:

Summary

本文演示了由DeOme KB开发的程序<em>等。</em>(1959年)和备用程序开发布里尔乙<em>等。</em>(2008年)为结算第四腹股沟在乳腺片段,乳腺上皮细胞,或乳腺肿瘤细胞的移植准备柔毛小鼠乳腺脂肪垫。

Abstract

本文介绍和比较脂肪垫DeOme KB 开发的清关程序 。1和备用程序开发布里尔 B 。2,乳腺上皮移植手术。乳腺移植手术被广泛应用于乳腺生物学家,因为它需要的事实,乳腺上皮细胞的显着发展,直到进入青春期后,不会发生的优势。在3周龄,乳腺上皮树的生长是局限于乳头附近,脂肪垫主要是缺乏对乳腺上皮细胞,但7周龄的乳腺导管上皮树延伸整个脂肪垫。因此,如果这种含有上皮细胞的脂肪垫一小部分,地区之间的乳头和淋巴结,是在3周拆除,内源性上皮永远不会填充乳腺脂肪垫,脂肪垫是描述为“清除“。这时,从其他来源的乳腺上皮可在清除脂肪垫,它有可能延长到了脂肪垫乳腺导管树木移植。利用这个程序已经在许多的实验模型,包括在转基因乳腺上皮组织的肿瘤表型基因型的3对整个动物的混杂影响考试,在鉴别乳腺干细胞移植细胞有限稀释4,5的,确定增生性结节,如果进行乳腺肿瘤6,评估前激素对乳腺上皮细胞7,8的行为暴露的影响。

三个星期的旧主机小鼠麻醉,在手术阶段清理和克制。一个中期矢状切口,通过皮肤,但没有腹膜,从耻骨扩展到胸骨。斜削减从整个骨盆向每条腿中旬矢状切口,通过皮肤。皮肤被拉到远离腹膜暴露第四腹股沟乳腺。脂肪垫是通过消除脂肪垫组织前淋巴结清除。上皮碎片或上皮细胞移植到其余的清除脂肪垫和鼠标是封闭的。

Protocol

1。移植的上皮细胞的制备可以移植到新鲜或冷冻的捐助上皮组织清除的脂肪垫,但事先准备的冷冻捐助上皮在移植效率的最小下降(> 85%的效率)更方便。编制冻结​​捐助上皮协议如下: 准备捐助移植上皮之前,准备冻结上皮和有关分装到冷冻管1毫升媒体。这可以保存在4 ° C,直到需要长达6个月。冻结媒体包含与HEPES和碳酸氢钠,10%胎牛血清(FBS…

Discussion

在这份报告中,我们提出两个替代方法,结算准备乳腺上皮移植在小鼠乳腺脂肪垫。已在使用的标准程序,自1959年发展DeOme。1虽然更具侵入性的,标准的方法是培训新手的首选方法,因为乳腺的结构和方向很容易观看。然而,饶程序可能会首选由更有经验的外科医生, 因为几个优点2。最重要的是,不遗余力程序是创伤小,需要更短的时间内,可以使用吸入麻醉的短暂时…

References

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Cite This Article
Dunphy, K. A., Tao, L., Jerry, D. J. Mammary Epithelial Transplant Procedure. J. Vis. Exp. (40), e1849, doi:10.3791/1849 (2010).

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