Overview
في هذا الفيديو نقوم بوصف تقنية إدارة حل الاهتمام في القناة الثديية من أرنب وتأكيد التسليم عن طريق التصوير بالموجات فوق الصوتية عالية الدقة من عوامل التباين.
Protocol
1. التحضير قبل الجراحة
- سجل وزن الجسم لكل أرنب. كما هو الحال مع جميع الدراسات قبل السريرية، ورصد الأوزان الحيوانية بانتظام لتقييم السمية المحتملة.
- قبل تخدير الأرنب، وملء أنبوب مخروطي 50 مل مع هلام الموجات فوق الصوتية المتاحة تجاريا وتدور في 500 × ز لمدة 30 ق. لا ينبغي أن يكون هناك فقاعات مرئية في الجل عند الانتهاء من الطرد المركزي.
- إدارة الجليكوبرولاتي تحت الجلد بجرعة 0.1 ملغم/كغ والاسيبرومازين داخل العضل بجرعة 0.75 مغ/كغ. انتظر 15-20 دقيقة حتى يسري المهدئ أثناء مراقبة العلامات الحيوية والسلوك.
ملاحظة: الجليكوبيريرولات هو عامل مضاد للكوليني الذي يمنع بطء القلب ويقلل من إفرازات الجهاز التنفسي والجهاز الهضمي. Acepromazine هو مهدئ يعمل بمثابة التطبيب المسبق للتخدير. - إعطاء 35 ملغ / كغ من الكيتامين و 5 ملغ / كغ من الإكسيلازين تحت الجلد كمخدر. ومع ذلك ، كلما أصبح المشغل أكثر خبرة ويمكنه إنجاز التسليم داخل الدوكتال بسرعة أكبر ، انخفض جرعات الدواء إلى 15 ملغ / كجم من الكيتامين و 3 ملغم / كجم من الإكسيلازين تحت الجلد ؛ وهذا سوف تقصير وقت التخدير والوقت اللازم للحيوان للتعافي من التخدير.
- فحص وتوثيق معدل ضربات القلب، SPO2، ودرجة الحرارة، ومعدل التنفس، ولون الغشاء المخاطي كل 15 دقيقة. تطبيق مواد تشحيم العين على كلتا العينين.
ملاحظة: فقط الموظفين الذين خضعوا للتدريب المناسب وتمت الموافقة عليهم من قبل IACUC مؤسستهم يجب إدارة أو مراقبة التخدير. يمكن أن يساعد استخدام جهاز مراقبة التخدير البيطري في الحصول على علامات حيوية ويوصى به. ومع ذلك ، فإن جهاز مراقبة التخدير البيطري لا يحل محل الحاجة إلى فحص الحيوان يدويا كل 15 دقيقة. انظر تعليمات الشركة المصنعة للاستخدام السليم للمراقب البيطري. - التحقق من بداية التخدير عن طريق قرصة إصبع القدم لطيف; يجب أن يكون الأرنب غير مستجيب قبل المتابعة.
- حلق بعناية البطن caudal من الأرنب في المنطقة حول الزوجين الثالث والرابع من الحلمات الأربية.
- مع إزالة معظم الشعر، ضعي كريم إزالة الشعر دون وصفة طبية على منطقة الحلاقة. إزالة كريم 10 دقيقة بعد التطبيق باستخدام مناشف ورقية رطبة مبللة بالماء الدافئ.
ملاحظة: جلد الأرنب هش جدا / حساسة. يجب استخدام كريم إزالة الشعر لمدة لا تزيد عن 10 دقائق. في الواقع ، من الأسلم تجربة "بقعة اختبار" في 5 دقائق والمغادرة لفترة أطول فقط إذا كانت نقطة الاختبار تشير إلى وجود حاجة إلى فترة زمنية أطول. - مسح المنطقة مع منصات الشاش غارقة في الكحول لتنظيف موقع الحقن.
- ضع الأرنب على ظهره في حوض على شكل حرف V مبطن ببطانية مياه دافئة أعيد تدويرها ولوحة ماصة.
2. إعداد عامل التباين
- إعادة تشكيل كاشف التباين غير المستهدف وفقا لتعليمات الشركة المصنعة. ماصة صعودا وهبوطا بلطف لخلط.
ملاحظة: عامل التباين المستخدم في هذا البروتوكول مستقر في درجة حرارة الغرفة لمدة 4 -6 ساعة بعد إعادة التشكيل. صخرة بلطف القارورة بين كل استرجاع.
ملاحظة: يعتمد حجم الحل المطلوب على عدد القنوات التي سيتم حقنها. الأرنب لديه 4 فتحات القناة لكل حلمة، و 0.2 مل من الحل يكفي لملء شجرة واحدة مجاري من الأرنب الأبيض نيوزيلندا الكبار (Oryctolaguscuniculus). وبالتالي، يمكن تسليم حجم إجمالي قدره 0.8 مل إلى غدة ثديية واحدة.
3. الولادة داخل الدوكتال
- تحديد موقع الحلمات المناسبة ليتم حقنها؛ ويوصى 3rd و4 أزواج من الحلمات الأربية، كما يتم تصورها بسهولة عندما يتم وضع الحيوان على الظهر لها.
- تحميل 0.2 مل من المحلول الملحي المعقم 0.9٪ في حقنة أنبوبية 1 مل Luer-lock مع إبرة 22 G. التخلص بشكل صحيح من إبرة 22 G مرة واحدة المالحة في الحقنة واستبدالها بإبرة معقمة قياس 25. مسح بلطف المنطقة مع الكحول isopropyl 85٪ على وسادة الشاش.
- مع شطبة الإبرة والمحاقن بالتوازي مع جسم الحيوان ، أدخل شطبة الإبرة في جانب الحلمة وحقن ببطء 0.1-0.2 مل من المالحة . هذا سيسمح لتصور أفضل لفتحات القناة.
- تحميل 0.2 مل من محلول الحقن في حقنة أنبوبية 1 مل لوير قفل.
- عقد الحلمة بلطف مع الإبهام والسبابة ورفعه قليلا لوضعها للحقن داخل الغشاء المخاطي; قد يساعد اللوب البصري القابل للارتداء في تصور فتحات القناة.
- مع الحفاظ على موقف رفع من الحلمة، cannulate بعناية قناة الفائدة باستخدام إبرة 25 G حادة تلميح.
- بعد التكرير، قم بتحريف حقنة قفل Luer بلطف على محور إبرة التسريب ذات الطرف الحاد حتى يتم قفلها في مكانها.
- رفع الحلمة وحقن الحل ببطء لتقليل الضرر المحتمل الناجم عن السوائل تتحرك بسرعة داخل القناة. في أي وقت من الأوقات ينبغي أن يكون هناك مقاومة عند حقن الحل.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
MicroMarker non-targeted contrast reagent | VisualSonics | VS-11694 | |
Luer Lock 1 mL Syringes | BD | 309628 | |
Glycopyrrolate 0.2 mg/mL | Wedgewood Compounding Pharmacy | GLYCOP-INJ013VC | 6 month shelf life, supply may be limited. |
Ketamine HCL 100 mg/mL | Animal Health International | 21250699 | http:// www.animalhealthinternational.com/ |
Acepromazine 10 mg/mL | Animal Health International | 17640541 | |
Xylazine 20 mg/mL | Animal Health International | 20101547 | |
Hair Removing Cream | Veet | Sensitive skin solution. Available through local retailers. | |
Blunt tip infusion needles | Sai Infusion Technology | B14-50 | http://www.sai-infusion.com/ collections/blunt-needles |
Veterinary Pulse Oximeter | EdanUSA | VE-H100B | http://www.edanusa.com/Product/ VE-H100B-Veterinary-PulseOximeter.html |
Warm Water Pump | Gaymar | TP700 | |
Warm Water Blanket | Animal Health International | 21232696 | Maxi-Therm Lite Warming Pads |