Summary

Préparation de la souris Immunogène hypophysaires pour l'induction de hypophysite auto-immune expérimentale

Published: December 17, 2010
doi:

Summary

Hypophysite auto-immunes peuvent être reproduits chez la souris par injection d'un extrait de protéines de l'hypophyse de souris.

Abstract

Hypophysite auto-immune est une inflammation chronique de la glande pituitaire provoqué ou accompagné d'une auto-immunité. Il a traditionnellement été considérée comme une maladie rare, mais des rapports a nettement augmenté ces dernières années. Hypophysite, en fait, il n'est pas rare que se développe un «effet secondaire» chez les patients cancéreux traités avec des anticorps qui bloquent les récepteurs inhibiteurs exprimés sur les lymphocytes T, tels que CTLA-4 2 et PD-1 récepteurs. Hypophysite auto-immunes peuvent être induite expérimentalement en injectant des souris avec des protéines pituitaires mélangé avec un adjuvant 3. Dans cet article, nous montrons comment la vidéo pour en extraire les protéines de souris glandes pituitaire et comment les préparer sous une forme appropriée pour induire hypophysite auto-immunes chez la souris SJL.

Protocol

Protocole expérimental La première étape de ce protocole expérimental est de collecter un grand nombre de glandes pituitaires de souris. La deuxième étape consiste à homogénéiser les glandes de préparer un extrait de protéine. La troisième étape consiste à émulsifier ces protéines avec un mélange d'hydrocarbures. Étape 1: Collecte et stockage des glandes pituitaires de souris La glande pituitaire de souris se trouve …

Discussion

Malgré le fait que le premier patient avec hypophysite auto-immune a été signalé en 1962 4, les auto-antigènes pathogènes hypophysaires restent à identifier 5. Les modèles animaux peut être très utile d'identifier ces auto-antigènes, facilitant la découverte de biomarqueurs qui sont traduisibles les soins aux patients. Cet article a démontré une procédure simple pour la préparation de protéines pituitaire dans une forme qui est suffisante pour induire hypophysite auto-immunes c…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ce travail a été soutenu par NIH DK080351 au PC.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
15-ml Falcon tubes        
homogenization buffer        
phosphate buffered saline        
protease inhibitor cocktail        
Polytron homogenizer        
BCA assay   Pierce 23225  
Complete Freund’s Adjuvant (CFA)   Sigma F-5881  
Mycobacterium tuberculosis   Becton Dickinson 231141  
2.5 mL Hamilton gastight syringe        
22-gauge micro-emulsifying needle        

References

  1. Caturegli, P., Newschaffer, C., Olivi, A., Pomper, M. G., Burger, P. C., Rose, N. R. . Autoimmune Hypophysitis Endocr Rev. 26, 599-614 (2005).
  2. Blansfield, J. A., Beck, K. E., Tran, K., Yang, J. C., Hughes, M. S., Kammula, U. S., Royal, R. E., Topalian, S. L., Haworth, L. R., Levy, C., Rosenberg, S. A., Sherry, R. M. Cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 blockage can induce autoimmune hypophysitis in patients with metastatic melanoma and renal cancer. J Immunother. 28, 593-598 (2005).
  3. Tzou, S. C., Lupi, I., Landek, M., Gutenberg, A., Tzou, Y. M., Kimura, H., Pinna, G., Rose, N. R., Caturegli, P. Autoimmune Hypophysitis of SJL mice: Clinical Insights from a New Animal Model. Endocrinology. 149, 3461-3469 (2008).
  4. Goudie, R. B., Pinkerton, P. H. Anterior hypophysitis and Hashimoto’s disease in a woman. J Pathol Bacteriol. 83, 584-585 (1962).
  5. Caturegli, P. Autoimmune hypophysitis: an underestimated disease in search of its autoantigen(s). J Clin Endocrinol Metab. 92, 2038-2040 (2007).

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Cite This Article
Tzou, S., Landek-Salgado, M. A., Kimura, H., Caturegli, P. Preparation of Mouse Pituitary Immunogen for the Induction of Experimental Autoimmune Hypophysitis. J. Vis. Exp. (46), e2181, doi:10.3791/2181 (2010).

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