Voorbereiding van de muis hypofyse Immunogeen voor de inductie van experimentele auto-immune Hypophysitis
Summary
Auto-immune hypophysitis kan worden gereproduceerd bij muizen door het injecteren van een uittreksel van de muis hypofyse eiwitten.
Abstract
Auto-immuun hypophysitis is een chronische ontsteking van de hypofyse veroorzaakt of vergezeld door auto-immuniteit 1. Het is van oudsher beschouwd als een zeldzame ziekte, maar de verslaglegging is sterk toegenomen in de afgelopen jaren. Hypophysitis, in feite, ontwikkelt zich niet zelden als een "side-effect" bij patiënten met kanker die behandeld worden met antilichamen die remmende receptoren tot expressie gebracht op T-lymfocyten, zoals CTLA-4 2 en PD-1-receptoren te blokkeren. Auto-immune hypophysitis kan experimenteel worden veroorzaakt door het injecteren van muizen met hypofyse eiwitten gemengd met een adjuvans 3. In deze video artikel zullen we laten zien hoe eiwitten uit de muis hypofyse en hoe u hen voor te bereiden in een vorm die geschikt is voor het induceren van auto-immune hypophysitis in SJL muizen extract.
Protocol
Discussion
Ondanks het feit dat de eerste patiënt met een auto-hypophysitis werd gemeld in 1962 vier, de pathogene hypofyse autoantigenen nog moeten worden geïdentificeerd 5. Diermodellen kan heel nuttig zijn om deze autoantigenen identificeren, medeplichtigheid aan de ontdekking van biomarkers die vertaalbaar zijn naar de patiëntenzorg. Dit artikel heeft aangetoond een eenvoudige procedure voor het bereiden van hypofyse eiwitten in een vorm die geschikt is voor het induceren van auto-immune hypophysitis b…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dit werk werd ondersteund door NIH subsidie DK080351 naar de PC.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 15-ml Falcon tubes | ||||
| homogenization buffer | ||||
| phosphate buffered saline | ||||
| protease inhibitor cocktail | ||||
| Polytron homogenizer | ||||
| BCA assay | Pierce | 23225 | ||
| Complete Freund’s Adjuvant (CFA) | Sigma | F-5881 | ||
| Mycobacterium tuberculosis | Becton Dickinson | 231141 | ||
| 2.5 mL Hamilton gastight syringe | ||||
| 22-gauge micro-emulsifying needle |
References
- Caturegli, P., Newschaffer, C., Olivi, A., Pomper, M. G., Burger, P. C., Rose, N. R. . Autoimmune Hypophysitis Endocr Rev. 26, 599-614 (2005).
- Blansfield, J. A., Beck, K. E., Tran, K., Yang, J. C., Hughes, M. S., Kammula, U. S., Royal, R. E., Topalian, S. L., Haworth, L. R., Levy, C., Rosenberg, S. A., Sherry, R. M. Cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 blockage can induce autoimmune hypophysitis in patients with metastatic melanoma and renal cancer. J Immunother. 28, 593-598 (2005).
- Tzou, S. C., Lupi, I., Landek, M., Gutenberg, A., Tzou, Y. M., Kimura, H., Pinna, G., Rose, N. R., Caturegli, P. Autoimmune Hypophysitis of SJL mice: Clinical Insights from a New Animal Model. Endocrinology. 149, 3461-3469 (2008).
- Goudie, R. B., Pinkerton, P. H. Anterior hypophysitis and Hashimoto’s disease in a woman. J Pathol Bacteriol. 83, 584-585 (1962).
- Caturegli, P. Autoimmune hypophysitis: an underestimated disease in search of its autoantigen(s). J Clin Endocrinol Metab. 92, 2038-2040 (2007).
