Einem orthotopen Modell des Murine Blasenkrebs
Summary
Blasentumoren sind bei weiblichen Mäusen in eine minimal-invasive Weise durch Katheterisierung, lokale Verätzungen und späteren Haftung von Karzinomzellen, um den Brennvorgang Standorten etabliert.
Abstract
In diesem einfachen Verfahren werden Blasentumoren bei weiblichen Mäusen C57 durch den Einsatz von Katheterisierung, lokale Verätzungen und späteren Zelladhäsion gegründet. Nach ihrer Blasen transurethral sind katheterisiert und entleert werden die Tiere wieder katheterisiert, um das Einführen eines Platindrahtes in Blasen ohne Beschädigung der Harnröhre oder Blase zu ermöglichen. Die Katheter sind aus Teflon als Isolator für die Draht-, die elektrischen Strom in die Blase dirigiert eine Brandverletzung erstellen dienen. Ein Elektrokauter Einheit wird verwendet, um zu liefern 2,5 W bis das freie Ende des Drahtes, Abbrennen extrazellulären Schichten und bieten Anknüpfungspunkte für Karzinom-Zellen in Suspension in die Blase durch eine spätere Katheterisierung geliefert. Die Zellen bleiben in der Blase für 90 Minuten, nach denen der Katheter entfernt werden und die Blasen darf natürlich abtropfen lassen. Die Entwicklung des Tumors mittels Ultraschall überwacht. Besondere Aufmerksamkeit ist auf die Katheterisierung Technik im zugehörigen Video zu zahlen.
Protocol
Discussion
Diese minimal-invasive Methode zur Ermittlung orthotopen Blasentumoren bei weiblichen Mäusen kann auch für andere Zelltypen als MB49 angewendet werden, obwohl unterschiedliche Ergebnisse zu rechnen. Wenn weniger aggressive Tumorzellen verwendet werden, wird die Erhöhung der Leistung leicht (unter Verwendung von 0,5 W-Schritten auf die neue optimale etablieren) ergeben eine Fläche von mehr zugänglich Tumorzellen Anhang und mehr Blase Inkubationszeiten für die eingeflößt Zellen wird eine größere Menge an Ertrag …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Diese Arbeit wurde von der National Science Foundation CAREER-Award (CBET-0846395) und der Abteilung für Vergleichende Medizin, Tulane University gefördert.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| C57Bl/6J mice | Jackson Laboratories | 000664 | 3-5-wk-old | |
| Polycarbonate cages and ventilated rack | Lab Products | Super Mouse 750 | 327mm x 190mm x 143mm |
|
| Hardwood Bedding | Harlan Teklad | Laboratory –grade SaniChips | ||
| Rodent diet | Harlan Teklad | Rodent Diet 2019 | ||
| IV Catheter | MWI | 009231 | 24 G x ¾ in. | |
| Electrocautery unit | Bovie Medical Corporation | Aaron 900 | ||
| Ultrasound unit | Sonosite | 180 Plus (Vet) | ||
| MB49 cell line | Anthony Atala, Wake Forest University Baptist Medical Center | N.A. | ||
| DMEM | Invitrogen | 21063-029 | ||
| Fetal Bovine Serum | Gemini Bio-Products | 100106 500A57B | ||
| Penicillin-Streptomycin | Invitrogen | 15140-163 |
References
- Institute of Laboratory Animal Resources. . Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (1996).
- Gunther, J. H., Jurczok, A., Wulf, T., Brandau, S., Deinert, I., Jocham, D. Optimizing syngeneic orthotopic murine bladder cancer (MB49). Cancer Res. 59, 2834-2837 (1999).
- Zhang, X., Atala, A., Godbey, W. T. Expression-targeted gene therapy for the treatment of transitional cell carcinoma. Cancer Gene Ther. 15, 543-552 (2008).
