Summary

肝微小循環における血流と酸素消費量の可視化と分析:急性肝炎モデルへの応用

Published: August 04, 2012
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Summary

光学系は、FITC標識赤血球と肝微小循環を可視化するために、レーザーアシストりんと血管中の酸素分圧を測定​​するために開発されました。このメソッドは、微小血管の構造、直径、血流速度、および酸素分圧を分析することにより、生理学的および病理学的メカニズムを調べるために使用することができます。

Abstract

肝酸素消費量が比較的高いですが、肝臓の血液供給の約70%が胃腸管および脾臓由来の門脈血を酸素化されているため、肝臓の酸素需要と供給の間にかなりの食い違いがあります。酸素は、正弦波を介して中央静脈に門脈終末枝から流れる血液によって肝臓に配信され、これは肝小葉内の酸素勾配になります。酸素勾配は、肝微小循環におけるアップストリームおよびダウンストリームの酵素の発現を伴う重要な物理パラメータであるが、肝微小循環の酸素消費量を測定するための技術の欠如は、肝臓での酸素代謝に関わるメカニズムの解明を遅らせました。そこで我々は肝微小循環を可視化するためにFITC標識赤血球を使用し、そこに血管中の酸素分圧を測定​​するためにレーザーアシストりんを使用していました。 NoncontaCTと連続的な光学的測定は、血流速度、血管径、肝臓での酸素消費量に関連した酸素勾配を定量化することができます。急性肝炎モデルでは、我々は中心周辺のゾーン内の肝細胞壊死が酸素分圧をシフトアップと酵素の発現に影響を​​与える可能性があることを示し、我々はポータルと中央静脈の両方で増加した酸素分圧が正弦波で減少した酸素勾配を観察したマウスにアセトアミノフェンを投与することにより行われ門脈ゾーンインチ結論として、測定の肝血行動態および酸素消費のために私たちの光学的方法では、肝疾患に関連するメカニズムを明らかにすることができます。

Protocol

1。フルオレセインイソチオシアネート異性体I(FITC)で標識赤血球我々が使用するすべての実験的なプロトコルは、慶應義塾大学医学部の動物ケア委員会によって承認された。 ドナーマウスを麻酔し、行った後、腹腔切開術は、ヘパリンの少量を含む1mlのシリンジで下大静脈から全血を取り消すことができます。マウスはすぐにペントバルビタールナトリウム注…

Discussion

組織に酸素を提供することは微小循環の重要な役割であり、論文の多くは、微小血管の解剖学とレオロジー6に関連する疾患について説明します。肝血流量は動脈と静脈血の組み合わせです。肝臓への血流の約30%が門脈によって提供された肝動脈と他の70%で提供されるだけでなく酸素化血液は、脾臓、消化管7からの不十分な酸素血静脈流出である。そのような脂肪肝、衝撃…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者は、技術援助と支援の実験のためにさんりさ大塚に感謝します。この研究は部分的に教育、科学、スポーツ文化省によってサポートされていました、若手研究(B)、2010、22700476、及びKTのためにスズケン記念財団2010年、この研究費補助金は、研究開発によってサポートされていましたリビング物質の次世代統合シミュレーション、文部科学省次世代スーパーコンピュータ·プロジェクトの開発と利用の一部であり、JST ERATO末松ガス生物学プロジェクトによって一部インチ

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number
Pd(II) meso-Tetra(4-carboxyphenyl)porphine Frontier Scientific, Inc. PdT790
Fluorescein isothiocyanate isomer I Sigma-Aldrich Co. F7250
Acetaminophen Sigma-Aldrich Co. A7085

Name of the equipment Company Catalogue number
      Equipment
photomultiplier tube hamamatsu photonics k.k H10722-20

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Cite This Article
Tsukada, K., Suematsu, M. Visualization and Analysis of Blood Flow and Oxygen Consumption in Hepatic Microcirculation: Application to an Acute Hepatitis Model. J. Vis. Exp. (66), e3996, doi:10.3791/3996 (2012).

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