הפעילות של תנועה (אה"ע) היא מדידה פשוטה ומתבצע בקלות בהתנהגות בעכברים. צימוד של תוכנת מעקב וידאו (VTS) ואה"ע מאפשר השיפור של ייחוד ורגישות, במיוחד בהשוואה לשימוש, שיטת חציית קו אה"ע הניתוח. בנוסף VTS מאפשר מעקב ארוך טווח של העכבר אה"ע.
Abstract
הפעילות של תנועה (אה"ע) היא מדידה פשוטה ומתבצע בקלות בהתנהגות בעכברים ומכרסמים אחרים. שיפורים בתוכנת מעקב וידאו (VTS) שאפשרו לה להיות בשילוב לאה"ע בדיקות, שיפור משמעותי סגוליות ורגישות בהשוואה לשיטת מעברי הקו עם ניקוד ידני. בנוסף, מאפשר VTS ניסויים תפוקה גבוהה. אמנם דומה למעקב וידאו אוטומטי המשמש לבדיקת השדה הפתוחה (OFT), אה"ע בדיקות היא ייחודית בכך שהיא מאפשרת לעכברים להישאר בכלוב בבית שלהם ולא לנצל את גירוי anxiogenic של תאורה בהירה במהלך השלב הפעיל של אור בחושך מחזור. באופן מסורתי, אה"ע שימש במשך פרקי זמן (דקות) קצרים, ואילו מחקרי תנועה ארוכות יותר (HRS-ימים) השתמשו לעתים קרובות מושתלים משדרים וbiotelemetry. עם האפשרות למעקב בזמן אמת, ארוכה, כמו בדיקות אה"ע לטווח קצר, יכול כעת להתבצע באמצעות צילום וידאו. בדיקות אה"ע לטווח ארוך דורשת מיוחדות, אך נבנה בקלות, כך שכלוב מזון ומים (שהוא בדרך כלל ממוקם בראש הכלוב) אינו מסתיר videography. חשוב מכך, צילום הווידאו וVTS מאפשרים כימות של פרמטרים, כגון נתיב של תנועת עכבר, שקשים או בלתי אפשריים למדוד עם קו חצייה ו / או biotelemetry. לסיכום, בדיקות אה"ע מצמידים VTS מעניקה תיאור מלא יותר של תנועת עכבר ואת היכולת לבחון את התנועה על פני תקופה ממושכת של זמן.
Protocol
1. סט אה"ע לטווח קצר עד ונוהל לטווח קצר אה"ע כלוב להגדיר בדוק אה"ע לטווח קצר בתוך הכלוב בבית של עכבר בודד שוכנו. כדי להקל על ניתוח תמונת VTS תלוי, להשתמש במצ…
Representative Results
דוגמה לתוצאות מצעדים חוזרים ונשנים, בדיקת אה"ע טווח קצר מוצגת באיור 1. נתון זה מראה כי לאחר lipopolysaccharide ממשל (LPS), עכברים שוכנו בcaging מאוורר בנפרד (IVC) לשחזר את הפעילות של תנועה לטווח קצר מהירים יותר מעכברים שוכנו בcaging סביבת הסביבה (AEC) 6. בעוד האובדן הראשוני…
Discussion
סימפטומים של מחלה בעכברים כוללים עייפות, אובדן העניין בסביבה חברתית וסביבתית, תחושת חולי ואנורקסיה 2-3. בעכברים ומכרסמים אחרים, ניתן להשתמש בו כדי להעריך אה"ע מחלה לאחר חיסון הפעלה 4-5. בנוסף, אה"ע לטווח ארוך מציע את היכולת לעקוב אחר תנועה על פני 24 שעות (?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
תמיכה: מחקר זה נתמך על ידי המכונים הלאומי לבריאות (DK064862, NS058525 וAA019357 לGGF).
Materials
Name of Reagent/Material
Company
Catalog Number
Comments
Video camera
Sony
HDR-XR500V
Other, similar video cameras may work as well. The file storage format (codec/container) must be compatible with the VTS used. It is recommended when initially establishing a VTS to choose the VTS first and work with the vendor in choosing an appropriate camera, especially with respects to file format and video resolution compatibility.
Opaque cage dividers
Custom fabricated based on specific cage dimensions. To facilitate image analysis, dividers should be of a similar color to the cage bedding. Structurally fixed dividers are preferrable because they speed setup between multi-mice experiments, such as those involving repeated measurements. Sturdy transportable cage dividers can be constructed of 1/2 inch opaque plastic and joined via a series of cross laps.
Light or Dark bedding (opposite of mouse coat color)
Available from several laboratory animal supply distributors, depending on location.
Clear Plexiglas cage tops
Custom fabricated based on cage dimensions.
Automated video tracking software (EthoVision XT 7)
Noldus Information Technology
A variety of VTS manufacturers exist, use of other software may suffice.
PC
Dell Inc.
See VTS software providers minimum PC .requirements
White noise generator
Dohm
DS
A variety of white noise generators are available, depending on need.
Brooder clamp lights with red light bulbs
Several sizes and styles available. Number required depends on room size/lighting needs. Do not exceed 125 lumens in the testing room.
Lab bench or butcher paper
Paper should match or be very similar in color to the cage bedding.
York, J. M., Blevins, N. A., McNeil, L. K., Freund, G. G. Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software. J. Vis. Exp. (76), e50252, doi:10.3791/50252 (2013).