생쥐의 공포 컨디셔닝을 추적
Summary
다음 실험에서 우리는 쥐의 추적 공포 조건화위한 프로토콜을 설명합니다. 연상 메모리의이 유형은 중립 자극과 무조건 자극을 분리 트레이스 기간을 포함한다.
Abstract
이 실험에서 우리는 학습 및 기억을 측정하는 기술을 제시한다. 여기에 제시된 추적 공포 조건화 프로토콜에서 중립 자극과 무조건 자극 사이의 다섯 쌍이있다. 각 조절 재판을 분리하는 20 초 추적 기간이 있습니다. 다음날 동결에 조건 자극 (CS) 및 추적 기간의 프레젠테이션 중에 측정한다. 세 번째 날에 상황에 맞는 메모리를 측정하는 8 분의 시험이있다. 대표적인 결과는 무조건 자극하지 않고 톤 프리젠 테이션을받은 쥐에 비해 혐오 무조건 자극 (충격)로 제시했다 생쥐입니다. 추적 공포 조건화가 성공적으로 다른 공포 조건화 방법이 발견되지 않은 생쥐에 미묘한 학습과 기억 적자 및 개선 사항을 감지하는 데 사용되었습니다. 공포 조건화의 유형은 내측 전두엽 피질과 해마 사이의 연결에 의존 할 것으로 생각됩니다. 하나는 현재 논란이 방법은 편도 독립적 인 것으로 생각되어 있는지 여부입니다. 따라서 다른 공포 조건화 시험은 이러한 지연 공포 조건화를 통해 같은 편도체에 의존 학습과 기억 효과를 검토 할 필요가있다.
Introduction
공포 조건화에서 중립 자극 (NS)을 혐오 무조건 자극 (미국)와 결합된다. NS는 일반적으로 톤이며, 미국과 반복 짝을 조건 자극 (CS)가됩니다. CS는 혐오 미국의 부재, 예컨대 냉동 같은 조건 반응 (CR)을 유도 할 수있다. 일반적으로 사용되는 공포 조건화 프로토콜은 지연 조절입니다. 이 프로토콜에서 NS와 미국의 발병은 연속 또는 자극 프레 젠 테이션에서 일부 중복이되고 있습니다. 동시 에어컨, 이전 버전과의 조화, 그리고 추적 에어컨 1 : 지연 공포 조건화가 시간적 연관 조절의 가장 일반적으로 사용되는 유형 중 하나이지만, 연관 조절 시간적 배열의 몇 가지 다른 종류가 있습니다. 추적 공포 조건화에서 "추적"기간의 결과로 몇 초 NS과 미국 사이의 자극이없는 간격이있다.
몇몇 연구는 적자를보고있다추적 공포 조건화에서의 신경 독성 병변이 구조에서 생산되는 때 해마 2-5 또는 약물 에이전트가 해마 수용체의 기능을 차단하는 데 사용됩니다에 입력. 추적 에어컨 및 상황에 맞는 조절에 적자에서 해마의 결과 병변하지만, 지연의 공포 조건화 8을 손상하지 않습니다. 추적 공포 조건화를 사용하면 여러 가지 이점을 얻을가 있습니다. 공포 조건화 프로토콜은 세 가지 일의 테스트 기간 동안 달성 공간적으로 의존하지 해마에 의존하는 기억을 허용 할 수 있습니다. 추적 공포 조건화는 모리스 물 미로, 새로운 물체 인식 시험, 또는 해마에 의존하는 메모리를 조사하는 다른 미로 테스트를 보완하는 검사로 사용할 수 있습니다.
Protocol
다음 실험에 사용 된 생쥐는 14 시간 빛과 10 시간의 어둠 (20시부터 6시까지 시간) 낮의주기와, 22 ° C의 주변 온도에서 생성 베일러 대학에서 지내게되었다. 쥐들이 음식과 물에 임의로 액세스를 부여했다. 마우스에 대한 모든 절차는 실험 동물의 관리 및 사용을위한 건강 지침의 국립 연구소에 부합했고, 동물의 프로토콜은 베일러 대학의 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다. </…
Representative Results
대표 결과 우리는 중립 자극을받은하지만 무조건 자극 (아무 충격 조건을)받지 않은 쥐에 비해 무조건 자극 (충격 상태)과 중립 자극 짝을받은 컨트롤 C57BL/6J 성인 마우스에서 데이터를 제시한다. 먼저 프로토콜이 올바르게 수행되었는지 여부를 결정하기 위해 이러한 행동 시험을 설정할 때이 조건을 실행하는 것이 중요하다. 도 1의 데이터는 추적 공포 조건화 ?…
Discussion
추적 공포 조건화의 기초가되는 신경 회로를 규명 한 여러 연구가 있었다. 추적 공포 조건화는 해마 12-14의 CA1을 포함하는 것으로 생각됩니다. 증거는 내측 전두엽 피질 (mPFC가) 추적 눈 깜짝 에어컨 (15)에 큰 역할을하고 mPFC가 추적 공포 조건화에 관여하는 것으로 발견되었다고도 있습니다. 한 연구는 따라서 추적 간격을 17 동안 메모리를 유지 할 수있는 구조를 제공, mPFC ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 베일러 대학 연구위원회의 승인에 의해 간질 재단의 연구 보조금 지원됩니다.
Materials
| FreezeFrame | Coulbourn | ||
| 30% Isopropanol | Purchase 90% isopropanol and dilute it down to 30% | ||
| 70% Ethanol | |||
| Amp-meter | Med-Associates | ENV-420 | Windows XP, Vista, and 7 Compatible (32-bit only) |
| Digital Sound Level Meter | 33-2055 | ||
| Vanilla Extract | McCormick Pure Vanilla Extract | ||
| Sticky Notes | Post-it | 3X3 inch |
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Cite This Article
Lugo, J. N., Smith, G. D., Holley, A. J. Trace Fear Conditioning in Mice. J. Vis. Exp. (85), e51180, doi:10.3791/51180 (2014).