Мониторинг системных и печени параметров гемодинамики у мышей
Summary
Этот фильм показывает, как приобрести системные и печеночные гемодинамики у мышей. Весь мониторинг включает приобретение жизненно важных параметров, системного артериального давления, центрального венозного давления, общего расхода артерии печени, и портал давления вены, а также скорость потока портал у мышей.
Abstract
Использование моделей мыши в экспериментальных исследованиях имеет огромное значение для изучения печени физиологии и патофизиологии нарушений. Однако в связи с небольшим размером мыши, технические детали процедуры интраоперационного мониторинга, подходящей для мыши редко описано. Ранее мы уже сообщали процедуру мониторинга для получения гемодинамики у крыс. Теперь, мы адаптировали процедуру приобретения системных и печеночные показатели гемодинамики у мышей, вид в десять раз меньше, чем у крыс. Этот фильм демонстрирует приборов животных, а также процесс сбора данных, необходимых для оценки системных и печеночные гемодинамики у мышей. Жизненные параметры, в том числе температуры тела, частоты дыхания и частоты сердечных сокращений были записаны в течение всей процедуры. Системной гемодинамики состоят из давления сонной артерии (CAP) и центрального венозного давления (ЦВД). Печеночные показатели перфузии включают портал VEin давление (ПВП), скорость потока портала, а также скорость потока общей печеночной артерии (таблица 1). И средств сбора данных для записи нормальные значения был завершен в течение 1,5 часов. Системные и печеночные показатели гемодинамики оставались в пределах нормы во время этой процедуры.
Эта процедура является сложной задачей, но выполнимая. Мы уже подали эту процедуру для оценки печеночной гемодинамики у нормальных мышей, а также при 70% и частичной гепатэктомии в доле печени зажима экспериментов. Средний PVP после резекции (п = 20), был 11,41 ± 2,94 КМЗ 2 O, который был значительно выше (Р <0,05), чем раньше резекции (6,87 ± 2,39 КМЗ 2 O). Результаты доли печени зажимного эксперимент показал, что эта процедура мониторинга является чувствительным и пригодны для обнаружения небольших изменений в портального давления и скорости потока портала. В заключение, эта процедура является надежным в руках опытного микро-хирурга, но должно быть ограничено ехрeriments где мышей абсолютно необходимы.
Introduction
Общая цель этого видео было продемонстрировать процедуру мониторинга в режиме реального времени для получения системных и печеночные показатели гемодинамики. Причиной разработки этой процедуры является ее большое значение для экспериментальных вмешательств у мышей, которые требуют получения системных и печеночные показатели гемодинамики. Эта процедура может быть применена к наивных животных и во время или после заданного гепато-билиарной экспериментальной хирургического вмешательства, таких как частичной гепатэктомии воротной вены, лигирование и трансплантации печени.
Приобретение печеночных гемодинамики данных у грызунов требуется предложенную инвазивные процедуры. Печени перфузии не может быть получена неинвазивным. Тем не менее, есть альтернативы для приобретения системного артериального давления. Техника мониторинга, такие как техники хвост манжеты 8 были использованы для приобретения кровяное давление в обоих крыс и мышей. Методика хвост манжеты могут быть применены в consciOUS животных. При измерении кровяного давления, животное должно быть размещены и закреплены в определенном неудобном положении. В руководстве по эксплуатации хвост манжеты устройства, производитель заявляет, что мыши могут стать нервным и подчеркнул, которое может снизить циркуляцию в хвосте. В соответствии с этим обстоятельством, периферической крови, приобретенный в хвосте давление может быть намного ниже, чем в центральной артериального давления.
Процедура полный мониторинг проводили с интегрированным монитором многоканальным используя серию датчиков для сбора данных. Давление крови была получена путем введения катетера в соответствующем сосуде после тщательного микрохирургической вскрытия и воздействия под микроскопом. Скорость потока была измерена путем размещения трансзвуковой зонд потока вокруг каждого судна.
Мы уже сообщали об аналогичном интраоперационной процедуру мониторинга для крыс приводит к всеобъемлющей серии физиологических гемодинамики данных, сопоставимых с одданные по сообщениям из других групп 7. Поэтому мы считали эту процедуру, чтобы представлять хорошую основу для адаптации к мыши, вида 10 раз меньше, чем у крыс. Основное различие с процедурой, крысы является использование катетеров Миллар для получения данных артериального давления, вместо системы катетера на основе текучей среды. Поток данных были также приобретены с околозвуковых зондов потока, всего много мелких, чем за соответствующий крысы сосудов.
В связи с небольшим размером животного, приборы мышей технически сложным, но возможным. После того, как приборы завершена, сбора данных и первичный анализ данных жизнь проста, так как предопределенный файл настройки могут использоваться. Файл параметр должен быть определен один раз в начале серии экспериментов, и могут быть сохранены и использоваться для всех последующих экспериментах.
До сих пор мы применяли эту процедуру для оценки печеночные гемодинамические эффекты в острых опытах. Мы измерили CAP и ПВП до и сразу после 70% частичной гепатэктомии (PH) и в зажимные / де-зажима эксперименты. Мы зажат гепато-перстной связки правой доли составляет 20% от печени масса последующим кратким (5 минут) зажима медианы и левого бокового лепестка, представляющей совершенно 90% массы печени. Де-зажима начал с освобождения зажим с правой доле последующим освобождая средней и левой боковой лепесток. Максимальное время зажима был ниже 10 мин.
Protocol
Representative Results
Discussion
Мониторинг печеночных гемодинамики является важным инструментом исследования в гепатологии и гепатобилиарной хирургии. Приобретение печени гемодинамических данных помогает охарактеризовать действие гепатобилиарных процедур на сердечно-сосудистой системы. Приобретение печеночн?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Это исследование было поддержано немецким Федеральным МИНИСТЕРСТВО образования и научных исследований (BMBF), финансируемого "Виртуальный Печень сети". Я хотел бы поблагодарить Фрэнка Шуберта и Рене Gumpert от медиа-центра Йенского университета больницы за оказанную помощь в производстве видео и создания анимации и Изабель Jank для записи звука.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| PowerLab 16/30 | ADInstruments | PL3516 | |
| Quad Bridge Amp | ADInstruments | FE224 | Bridge amplifier |
| Animal Bio Amp | ADInstruments | FE136 | |
| Needle Electrodes for FE136 (3 pk) | ADInstruments | MLA1213 | |
| Perivascular Flowmeter Module | Transonic | TS420 | |
| Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB | Transonic | MA0.5PSB/MA1PSB | |
| SPR-1000 Mouse Pressure Catheter | Millar instruments | 841-0001 | |
| fluid filled catheter | Terumo | SR+DU2619PX | 26G, 0.64×19mm |
| micro scissors | F·S·L | No. 14058-09 | |
| micro serrefine | F·S·L | No.18055-05 | |
| Micro clamps applicator | F·S·L | No. 18057-14 | |
| Straight micro forceps | F·S·L | No. 00632-11 | |
| Curved micro forceps | F·S·L | No. 00649-11 | |
| needle-holder | F·S·L | No. 12061-01 | |
| 6-0 silk | ethicon | ||
| 6-0 prolene | ethicon | ||
| 7-0 prolene | ethicon | ||
| 10-0 prolene | ethicon | ||
| Tail cut-off device | Kent Scientific | www.kentscientific.com | |
| LabChart7 | ADInstruments | data analysis software |
References
- Albuszies, G., et al. Effect of increased cardiac output on hepatic and intestinal microcirculatory blood flow, oxygenation, and metabolism in hyperdynamic murine septic shock. Crit Care Med. 33 (10), 2332-2338 (2005).
- Bernhard, W., et al. Phosphatidylcholine molecular species in lung surfactant: composition in relation to respiratory rate and lung development. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 25 (6), 725-731 (2001).
- Cheever, A. W., Warren, K. S. Portal vein ligation in mice: portal hypertension, collateral circulation, and blood flow. 18, 405-407 (1963).
- Costa, G., Aguiar, B. G., Coelho, P. M., Cunha-Melo, J. R. On the increase of portal pressure during the acute and chronic phases of murine schistosomiasis mansoni and its reversibility after treatment with oxamniquine. Acta Trop. 89 (1), 13-16 (2003).
- Cui, S., Shibamoto, T., Zhang, W., Takano, H., Kurata, Y. Venous resistance increases during rat anaphylactic shock. Shock. 29 (6), 733-739 (2008).
- Geerts, A. M., et al. Comparison of three research models of portal hypertension in mice: macroscopic, histological and portal pressure evaluation. Int. J. Exp. Pathol. 89 (4), 251-263 (2008).
- Huang, H., Deng, M., Jin, H., Dirsch, O., Dahmen, U. Intraoperative vital and haemodynamic monitoring using an integrated multiple-channel monitor in rats. Lab Anim. 44 (3), 254-263 (2010).
- Krege, J. H., Hodgin, J. B., Hagaman, J. R., Smithies, O. A noninvasive computerized tail-cuff system for measuring blood pressure in mice. Hypertension. 25 (5), 1111-1115 (1995).
- Kuga, N., et al. Rapid and local autoregulation of cerebrovascular blood flow: a deep-brain imaging study in the mouse. J. Physiol.. 587 (Pt 4), 745-752 (2009).
- Muraki, T., Strain Kato, R. difference in the effects of morphine on the rectal temperature and respiratory rate in male mice. Psychopharmacology (Berl). 89 (1), 60-64 (1986).
- Nielsen, J. M., et al. Left ventricular volume measurement in mice by conductance catheter: evaluation and optimization of calibration. Am. J. Physiol Heart Circ. Physiol. 293 (1), H534-H540 (2007).
- Sakamoto, M., et al. Improvement of portal hypertension and hepatic blood flow in cirrhotic rats by oestrogen. Eur. J. Clin. Invest. 35 (3), 220-225 (2005).
- Reverter, E., et al. Impact of deep sedation on the accuracy of hepatic and portal venous pressure measurements in patients with cirrhosis. Liver Int. 34 (1), 16-25 (2014).
