Embolique Artère cérébrale moyenne occlusion (MCAO) pour AVC ischémique avec homologues caillots sanguins chez les rats
Summary
In this paper, we demonstrate a standard method for producing an embolic middle cerebral artery occlusion with homologous blood clots (fibrin-rich) in adult rat. This model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical study of thrombolytic therapy for ischemic stroke.
Abstract
Cliniquement, la thérapie thrombolytique avec l'utilisation de l'activateur du plasminogène tissulaire recombinant (tPA) reste le traitement le plus efficace pour l'AVC ischémique aigu. Cependant, l'utilisation de tPA est limitée par la fenêtre thérapeutique étroite et par un risque accru de transformation hémorragique. Il est urgent de développer des modèles de temps appropriés pour étudier de nouveaux agents thrombolytiques et des stratégies pour le traitement de l'AVC ischémique. À l'heure actuelle, deux grands types de modèles d'AVC ischémiques ont été développés chez les rats et les souris: intraluminale suture OACM et embolique OACM. Bien que les modèles MCAO via la technique de suture intraluminale ont été largement utilisés dans la recherche de la course mécanisme axé, ces modèles de suture n'imitent pas la situation clinique et ne sont pas adaptés pour les études thrombolytiques. Parmi ces modèles, le modèle OACM embolique imite étroitement AVC ischémique humaine et est adapté pour enquête préclinique d'un traitement thrombolytique. Ce modèle embolique été d'abord développé chez le rat par Overgaard et al. 1 en 1992 et caractérisé en outre par Zhang et al., en 1997 2. Bien embolique OACM a gagné plus d'attention, il ya des problèmes techniques rencontrés par de nombreux laboratoires. Pour répondre aux besoins croissants en matière de recherche thrombolytique, nous présentons un modèle hautement reproductible de embolique OACM chez le rat, qui peut se développer un volume de l'infarctus prévisible dans le territoire de l'ACM. En bref, un tube de PE-50 modifié est doucement avancé à partir de l'artère carotide externe (ECA) dans la lumière de l'artère carotide interne (ICA) jusqu'à ce que la pointe du cathéter atteigne l'origine de la MCA. Par le cathéter, un seul caillot de sang homologue est placé à l'origine de la MCA. Pour déterminer le succès d'occlusion de la MCA, le débit sanguin cérébral régional a été contrôlée, des déficits neurologiques et des volumes d'infarctus ont été mesurées. Les techniques présentées dans le présent document devraient aider les chercheurs à surmonter les problèmes techniques pour la création de ce modèle pour la recherche de la course. </ P>
Introduction
L'AVC est la troisième cause de décès aux États-Unis, mais les options de traitement de l'AVC aigu reste limitée. À l'heure actuelle, l'injection intraveineuse de l'activateur du plasminogène tissulaire recombinant (tPA) à dissoudre les caillots de sang est le traitement le plus efficace pour un AVC ischémique aigu. Cependant, l'utilisation de tPA est limitée par la fenêtre thérapeutique étroite et par un risque accru d'hémorragie intracérébrale. Par conséquent, un modèle de course adapté à la recherche thrombolytique est urgent.
L'artère cérébrale moyenne (MCA) est l'artère occluse le plus souvent dans la course chez les humains. Axé sur cette artère, de nombreux modèles animaux d'AVC ischémique ont été mis en place. À l'heure actuelle, deux grands types de rongeurs focal modèles d'ischémie par occlusion MCA ont été développés: suture modèle OACM et embolique OACM modèle. Bien que les modèles MCAO via la technique de suture intraluminale ont été largement utilisés dans la recherche de la course mécanisme axé, ces modèles de suture ne le font pasaccident vasculaire cérébral humain imiter, car jusqu'à 80% des AVC sont causés par des droits de thrombose ou d'embolie. Cependant, le modèle de embolie utilisant des caillots de sang imite étroitement course humaine et est considéré comme approprié pour l'étude thrombolytique. Ce modèle embolique a été d'abord développé chez le rat par Overgaard et al. 1 en 1992 et caractérisé en outre par Zhang et al., En 1997 2 et par Dinapoli et al., En 2006 3. Bien embolique OACM a attiré l'attention de plus en plus, il ya des problèmes techniques rencontrés par de nombreux laboratoires.
Dans cet article, nous démontrons une méthode standard pour la production embolique OACM avec des caillots de sang homologue chez le rat adulte, qui peuvent se développer un infarctus prévisible dans le territoire de l'ACM. Les techniques présentées dans cet article devraient aider les chercheurs à surmonter les problèmes techniques pour la création de ce modèle pour la recherche de la course.
Protocol
Representative Results
Discussion
Dans cette étude, nous avons démontré un procédé standard pour exécuter un modèle d'AVC embolique MCAO chez le rat, dans lequel l'origine de la MCA est occluse par un caillot de fibrine riche. Le principal avantage de ce modèle est: l'occlusion de la tige de MCA avec un caillot de sang fibrine riche est semblable à un coup de thromboembolique chez les humains, le modèle de course embolique est apte à effectuer une enquête préclinique de la thérapie fibrinolytique, et que ce modèle peut se dév…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by National Institutes of Health grants HL087990 (G.L.).
Materials
| rh-tPA | Chemical | Genentech | |
| 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Chemical | Sigma | T8877 |
| Anesthesia vaporizer | Equipment | Soma Technology | Drager Vapor 19.1 |
| Rechargeable high speed micro drill | Equipment | Fine Science Tools | 18000-17 |
| Curved scissors | Equipment | Fine Science Tools | 14117-14 |
| Dumont forceps(Medical #7) | Equipment | Fine Science Tools | 11270-20 |
| Dumont forceps(Medical #5) | Equipment | Fine Science Tools | 11251-35 |
| Vannas-style spring scissors | Equipment | Fine Science Tools | 15000-03 |
| Veterinary recovery chamber | Equipment | Peco Services | V1200 |
| Genie plus syringe pump | Equipment | Kent Scientific Corporation | |
| Rat brain matrix | Equipment | Kent Scientific Corporation | RBMA-310C |
| Digital caliper | Equipment | World Precision Instruments | 501601 |
| Dissecting microscope | Equipment | World Precision Instruments | PZMTIII-BS-LWD |
| Hamilton syringe | Equipment | Hamilton | model 710 |
| Homeothermic blanket control unit | Equipment | Harvard Apparatus | |
| Electric clipper | Equipment | Braintree Scientific | CLP-9931 |
| Veterinary electrosurgical unit | Equipment | MACAN Manufacturing Company | MV-9 |
| Blood flowmeter | Equipment | Adinstruments | |
| PowerLab 4/30 | Equipment | Adinstruments | |
| LabChart 7.2 | software | Adinstruments | |
| 1ml syringe | Consumable | Becton, Dickinson and Company | 309659 |
| 23G needle | Consumable | Becton, Dickinson and Company | 305143 |
| 30G needle | Consumable | Becton, Dickinson and Company | 305106 |
| PE-50 tubing | Consumable | Becton, Dickinson and Company | 427517 |
| PE-10 tubing | Consumable | Becton, Dickinson and Company | 427400 |
| 6-0 Silk suture | Consumable | Harvard apparatus | 723287 |
| 5-0 Silk suture | Consumable | Harvard Apparatus | 517607 |
References
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