Summary

فأري موديل التجريبية التنمية الورم الأصلي والبريتوني ورم خبيث<em> عبر</em> مثلي تلقيح مع خلايا المبيض سرطان

Published: December 09, 2016
doi:

Summary

لتوضيح عملية متعددة الخطوات لنشر البريتوني من سرطان المبيض، تقدم الدراسة الحالية نموذج تجريبي الفئران من نمو الورم الأصلي والانبثاث البريتوني عن طريق التلقيح مثلي مع هذه الخلايا السرطانية.

Abstract

ويرتبط سرطان المبيض الظهاري (EOC) مع بسوء التشخيص لأنه يظهر نشر البريتوني. لتحسين أحوال الطقس، فمن المهم للسيطرة على نشر البريتوني. ومع ذلك، فإنه لا يزال من غير الواضح كيف تنفصل الخلايا السرطانية من الآفات الأولية ونعلق على ميسوثيليوم. هناك حاجة إلى إنشاء نموذج حيواني المناسب لفهم آلية نشر البريتوني في الجسم الحي. في الدراسة الحالية، ونحن نقدم العملية من حقن المحلية من خلايا EOC إلى سطح المبيض الفئران لنمو الانبثاث، بما في ذلك الصفاق وأعضاء بعيدة. واستخدمت الفئران عارية الإناث (BALB / ج نو / نو) في 8 أسابيع من العمر. تحت حقل المجهري للعرض، خلايا EOC (1 × 10 5 خلية / ميكرولتر من المصفوفة المتوسطة خارج الخلية (ECM) القائم على هيدروجيل / المبيض من طرف واحد / الماوس) تم حقنه في الفئران المبايض من خلال نهج خلف الصفاق من الجهة الظهرية. هذه الطريقة المقترحة هو جنيهSS إجراء الغازية للماوس، ويقلل من الأضرار التي لحقت المبيض. هنا، نحن تصف الخطوات المنهجية في تطوير تشكيل الورم الأصلي والمنتشر من مركز عمليات الطوارئ.

Introduction

طلائي سرطان المبيض (EOC) يمثل أعلى نسبة من الوفيات الناجمة عن السرطان بين الأورام الخبيثة أمراض النساء 1. ويرتبط مركز عمليات الطوارئ مع تكهن الفقراء، ويرجع ذلك أساسا إلى أواخر الأعراض لها، وكثيرا ما يرتبط مع disseminations داخل الصفاق متعددة وبعيدة الانبثاث 2-4. نشر البريتوني هو عملية متعددة الخطوات. أولا، الخلايا السرطانية فصل من الآفات الأولية، وتهاجر إلى تجويف البطن. عندما نعلق على الخلايا السرطانية في ميسوثيليوم البريتوني، أنها بداية لغزو الأنسجة من خلال ميسوثيليوم 5،6. من أجل فهم أفضل للورم البيولوجيا (على سبيل المثال، تقدم السرطان والاستجابة العلاجية)، وتقدم نماذج الماوس على ثروة من المعلومات. ويستخدم على نطاق واسع وطعم أجنبي مع خلايا سرطانية بشرية لنماذج الماوس التي يتم فيها تلقيح خلايا سرطانية بشرية تحت الجلد، داخل الصفاق، عن طريق الوريد، وorthotopically. نموذج حيواني مع ز orthotopicallyورم رافتيد يمكن أن تولد أكثر كفاءة ودقة النتائج التي تعكس البيئة ورم في البشر بالمقارنة مع نموذج حيواني مع ورم المطعمة heterotopically. لذلك، بالنسبة لكثير من الأورام البشرية، تم إنشاء نماذج زرع مثلي 7-11.

هنا، نحن تصف التلقيح مثلي الخلايا EOC الإنسان من خلال نهج خلف الصفاق من الجهة الظهرية، الذي الغازية محدودة مقارنة التلقيح بطني. هذه التقنية يمكن أن توفر مجموعة متنوعة من المعلومات المفيدة عن مركز عمليات الطوارئ، وخاصة آلية نشر داخل الصفاق.

Protocol

يتبع بروتوكول العلاج المبادئ التوجيهية لإجراء التجارب على الحيوانات من جامعة ناغويا المعتمدة. 1. إعداد تعليق خلية واضح خط سرطان الخلايا المبيض البشري الخلية. <ol style=";text-align:right;directio…

Representative Results

وكان ستة الفئران عارية المبيضين تلقيح مع واضحة خط خلية سرطان الخلايا البشرية ES-2، كما هو موضح في هذا البروتوكول. كما هو مبين في الشكل 1A، 2 بعد أسابيع، وكان 5 من 6 الفئران ورم في المبيض تلقيح مع خلايا ES-2، ولكن لم يكن هناك ورم في المبيض المقاب?…

Discussion

النماذج الحيوانية ضرورية لتحليل آليات التنمية الورم، والتقدم، ورم خبيث، وفعالية الدواء ضد الخلايا السرطانية. كما استخدمت الفئران الحاملة لخلايا سرطان المبيض الإنسان كنموذج للحيوانات. هنا، نحن تصف إجراء أقل الغازية لإدارة الخلايا السرطانية في المبيض في موقع مثلي. ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

الكتاب أشكر أعضاء قسم أمراض النساء والتوليد وعلم الأحياء السرطان لمناقشاتهم المفيدة والمساعدة التقنية. وأيد هذه الدراسة من قبل الجمعية اليابانية لتعزيز العلوم (JSPS) غرانت في والمعونة من أجل البحث العلمي (15K15604، إلى H. كاجياما).

Materials

Matrigel matrix  BD 354234 ECM-based hydrogel
Insulin syringe TERUMO SS-05M2913 1/2cc, 29Gx1/2"
Suturing needle with suture 11mm, 3/8, Nylon6-0
Reflex 7mm Wound Clip Applier CellPoint Scientific 204-1000
 Reflex 7mm wound clips CellPoint Scientific 203-1000

References

  1. Jemal, A., et al. Global cancer statistics. CA Cancer J Clin. 61 (2), 69-90 (2011).
  2. Kajiyama, H., et al. Long-term clinical outcome of patients with recurrent epithelial ovarian carcinoma: is it the same for each histological type. Int J Gynecol Cancer. 22 (3), 394-399 (2012).
  3. Kikkawa, F., et al. Advances in treatment of epithelial ovarian cancer. Nagoya J Med Sci. 68 (1-2), 19-26 (2006).
  4. Yoshikawa, N., et al. Clinicopathologic features of epithelial ovarian carcinoma in younger vs. older patients: analysis in Japanese women. J Gynecol Oncol. 25 (2), 118-123 (2014).
  5. Kajiyama, H., et al. Involvement of SDF-1alpha/CXCR4 axis in the enhanced peritoneal metastasis of epithelial ovarian carcinoma. Int J Cancer. 122 (1), 91-99 (2008).
  6. Terauchi, M., et al. Possible involvement of TWIST in enhanced peritoneal metastasis of epithelial ovarian carcinoma. Clin Exp Metastasis. 24 (5), 329-339 (2007).
  7. Bronstein, L., Zechner, C., Koeppl, H. Bayesian inference of reaction kinetics from single-cell recordings across a heterogeneous cell population. Methods. 85, 22-35 (2015).
  8. Guo, W., Zhang, S., Liu, S. Establishment of a novel orthotopic model of breast cancer metastasis to the lung. Oncol Rep. 33 (6), 2992-2998 (2015).
  9. Lewis-Tuffin, L. J., et al. Src family kinases differentially influence glioma growth and motility. Mol Oncol. , (2015).
  10. Saar, M., et al. Orthotopic tumorgrafts in nude mice: A new method to study human prostate cancer. Prostate. 75 (14), 1526-1537 (2015).
  11. Zou, Y., et al. miR-29c suppresses pancreatic cancer liver metastasis in an orthotopic implantation model in nude mice and affects survival in pancreatic cancer patients. Carcinogenesis. 36 (6), 676-684 (2015).
  12. Lau, D. H., Lewis, A. D., Ehsan, M. N., Sikic, B. I. Multifactorial mechanisms associated with broad cross-resistance of ovarian carcinoma cells selected by cyanomorpholino doxorubicin. Cancer Res. 51 (19), 5181-5187 (1991).
  13. Bao, L., Matsumura, Y., Baban, D., Sun, Y., Tarin, D. Effects of inoculation site and Matrigel on growth and metastasis of human breast cancer cells. Br J Cancer. 70 (2), 228-232 (1994).
  14. Huang, M. J., et al. Epidemiological investigation on major depressive disorder in the most heavily damaged areas from Wenchuan earthquake in 2008. Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi. 31 (2), 167-170 (2010).
  15. Ma, L., et al. Mortality of neonatal respiratory failure related to socioeconomic factors in Hebei province of China. Neonatology. 100 (1), 14-22 (2011).
  16. Lin, Z., et al. Serum levels of FGF-21 are increased in coronary heart disease patients and are independently associated with adverse lipid profile. PLoS One. 5 (12), e15534 (2010).
  17. Liu, B., et al. Lumbar interspinous non-fusion techniques: comparison between Coflex and Wallis. Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 30 (11), 2455-2458 (2010).
  18. Zhang, Y., et al. Wave intensity analysis of carotid artery: a noninvasive technique for assessing hemodynamic changes of hyperthyroid patients. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 30 (5), 672-677 (2010).
  19. Song, G. S., et al. Comparative transcriptional profiling and preliminary study on heterosis mechanism of super-hybrid rice. Mol Plant. 3 (6), 1012-1025 (2010).
  20. Wan, L., et al. The analysis of variation of Han female adolescent bone development in Henan and Zhejiang province. Fa Yi Xue Za Zhi. 26 (2), 97-99 (2010).
  21. Wang, H. B., et al. Excitation-emission fluorescence characterization study of the three phenolic compounds. Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi. 30 (5), 1271-1274 (2010).

Play Video

Cite This Article
Koya, Y., Kajiyama, H., Liu, W., Shibata, K., Senga, T., Kikkawa, F. Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells. J. Vis. Exp. (118), e54353, doi:10.3791/54353 (2016).

View Video