Summary

مقاربة تشخيصية حلها المكون لدراسة عن مسببات الحساسية لحبوب اللقاح في الصينيين الجنوبيين الذين يعانون من التهاب الأنف و / أو الربو التحسسي

Published: June 04, 2017
doi:

Summary

يصف هذا العمل بروتوكول يستخدم نهج حل المكون لدراسة الحساسية لمسببات الحساسية لقاح العشب في مجموعة من المرضى من جنوب الصين مع حساسية الأنف و / أو الربو.

Abstract

يؤدي التحسس إلى حبوب اللقاح الحشائش إلى مخاطر عالمية لأمراض مجرى الهواء التحسسي. على الرغم من أن الوقاية تعتمد على التحقيق المحلي من المواد المسببة للحساسية حبوب اللقاح، والبيانات حول هذا الموضوع محدودة في جنوب الصين. تم الحصول على أي بيانات متوفرة عن طريق الاستبيانات تقرير الذاتي، واختبارات الجلد وخز، واختبارات إيج الكلي أو محددة باستخدام مقتطفات الخام. ولأسباب كثيرة، لا يمكن الاعتماد على هذه الأساليب. تم فحص تفاعل المصل إلى عشب برمودا، وعشب تيموثي، ومسببات الحساسية من هومولوس في مجموعة من المرضى من قوانغتشو الكبرى (أكبر مدينة في جنوب الصين وضواحيها) مع التهاب الأنف التحسسي و / أو الربو باستخدام محلل المناعية المؤتمتة بالكامل كعنصر (كرد).

وللمرة الأولى، ظهر انتشار كبير إلى حد كبير لإيجابية البرمودا العشب سيج في الجنوبيين الصينيين مع التهاب الأنف التحسسي و / أو الربو. في هؤلاء المرضى، انتشار خفية من التوعيةإلى العشب تيموثي و همولوس سكاندنز لوحظ أيضا، والتي قد تنشأ من التفاعل عبر، كما أن الأخيرين ليست مشتركة في المنطقة. وقد تم دعم ذلك أيضا من خلال الكشف عن مكونات الحساسية.

وقد يوفر محللو المقايسة المناعية التلقائية بالكامل اتساقا مرضيا بين المناطق والمختبرات والمؤسسات ومع مرور الوقت. وقد تتيح آلية الصك كشفا موحدا لم يكن من الممكن كشفه بسهولة قبل ظهور كرد.

هذه هي الدراسة التي تستخدم نهج كرد للتحقيق في التوعية للحساسية حبوب اللقاح العشب في جنوب الصين. ويضيف إلى الأدلة الحالية في الأدب. هناك حاجة إلى دراسات مستقبلية للتحقق من صحة هذه النتائج. ومع ذلك، على الرغم من كرد هو أداة مفيدة، والنتائج التي تم التوصل إليها مع محلل المناعي الآلي بالكامل لا ينبغي أن تحل محل غيرها من التحقيقات المخبرية، والتقييمات السريرية، والخبرة الطبيب.

Introduction

تمثل حبوب اللقاح العشب ما يقرب من 50٪ من الحساسية المرتبطة بالغلوبيولين المناعي (إيغ)، وبسبب طبيعتها المحمولة جوا، تفرض مخاطر عالمية لأمراض مجرى الهواء التحسسي، وخاصة الربو والتهاب الأنف التحسسي 1 ، 2 ، 3 ، 4 . الوقاية من الحساسية العشب حبوب اللقاح في منطقة تعتمد على معلومات حول التوزيع المحلي للحساسية حبوب اللقاح. لسوء الحظ، الطيف من حساسية المواد المسببة للحساسية يختلف من مكان إلى آخر، وهي الملاحظة المعروفة عموما باسم خصوصية إقليمية.

وفي الصين، وهي منطقة شاسعة من شرق آسيا، تتزايد خصوصية المناطق الإقليمية لتوعية حبوب اللقاح في الأعشاب بسبب محدودية البيانات المتاحة حاليا من الجزء الجنوبي من هذا البلد خلال العقود الماضية 5 . وقد أدى هذا الندرة في البيانات إلى صعوبة في إظهار الحسي حبوب اللقاح العامفي هذا البلد الكبير 6 . بالإضافة إلى ذلك، تم الحصول على بيانات محدودة جدا عن الجنوبيين الصينيين إلى حد كبير من الاستبيانات تقرير الذاتي، واختبارات الجلد وخز (بدلا من اختبارات المصل المختبر)، والقياسات الإجمالية إيغ (بدلا من حساسية إيغ (سيج))، وكشف سيج لمسببات الحساسية ( بدلا من الجزيئات المكونة للحساسية).

الإبلاغ الذاتي من أعراض الحساسية يمكن أن تكون غير موثوق بها عندما تكون مهتمة المواد المسببة للحساسية محددة. اختبارات الوخز الجلد، على الرغم من أن الوصول إليها على نطاق واسع، تنطوي على استخدام غير القياسية، مستخلصات الحساسية الخام، التي قد تحتوي على نفسها مكونات توعية أخرى التي تربك تفسير النتيجة. تعتمد موثوقية اختبار وخز الجلد أيضا بشكل حاد على التلاعب بمهارة من قبل أخصائيي الحساسية أو الممرضات المتخصصين، واستخدام الهستامين مؤخرا، والامتثال المريض (في بعض الأحيان من الصعب جدا للأطفال الصغار). إجمالي المفتش العام مفيد لفحص الحساسية ولكن لا تحديد معقول ثه المساس بالمواد المسببة للحساسية لدى المريض. وعلاوة على ذلك، تحتوي جميع المواد المسببة للحساسية تقريبا على عدد من الجزيئات المكونة للحساسية. قد يشير الحساسية إلى المكونات الرئيسية ( أي دير p 1 و دير p 2 من عث الغبار المنزلي) إلى حساسية "حقيقية" (الحساسية لمسبب حساسية معين، بدلا من إيجابية كاذبة بسبب التفاعلات المتبادلة مع المواد المسببة للحساسية الأخرى)، ولكن التحسس (على سبيل المثال، التفاعل التفاعلي دير p 10، تروبوميوسين) قد لا 7 .

وقبل إدخال التشخيصات التي تم حلها عن طريق المكونات، أعاقت هذه النكسات المخيبة للآمال دراسات الحساسية في الصين. كرد على وجه التحديد بالكشف عن مكونات مسببات الحساسية باستخدام المؤتلف أو تنقيته جزيئات الحساسية، مما يجعل القياس بسهولة قابلة للقياس وقابل للتخصيص 8 . في العقود الماضية، ودراسات الحساسية في كثير من الأحيان استخدام مستخلصات الخام من المواد المسببة للحساسية التي تحتوي حتما على عدد من المكونات غير ذات الصلة. العديد من هذه كووالمكونات هي خاملة، ولكن في بعض الأحيان، يمكن أن يؤدي بعضها إلى ارتباك ردود فعل إيجابية. استخدام جزيئات مسببة للحساسية المؤتلف أو المنقى في كرد يمكن الالتفاف على هذا وبالتالي توفير أفضل دقة الاختبار. عند معالجتها في ميكروأرس، نهج كرد بسرعة شاشات أو يحدد التوعية لمئات من جزيئات الحساسية في المواضيع الفردية. ولا توجد حاليا دراسة جيدة تصميما على كرد على التوعية بالحبوب اللقاحية في جنوب الصين. ومن الناحية المثالية، ينبغي أن تشمل هذه الدراسة سكانا محليين يتمتعون بتغطية جغرافية كبيرة، وأنهم يمثلون حبوب اللقاح التي يتم الإبلاغ عنها عادة في الصين، وأن يعالجوا الجوانب التقنية المذكورة أعلاه. للوصول إلى المستوى العملي من الأهمية السريرية وتسهيل تجنيد عينات المصل، والتحقيق المبكر على التوعية إلى حبوب اللقاح العشب كما المواد المسببة للحساسية استنشاق قد تركز أيضا على المرضى الذين يعانون من اضطرابات الجهاز التنفسي التحسسي، وليس على عامة السكان.

يصف هذا العمل طريقةتستخدم لاختبار تفاعل المصل سيج إلى عشب برمودا، تيموثي العشب، و سكانولس همولوس في المرضى من قوانغتشو الكبرى (أكبر مدينة في جنوب الصين وضواحيها) مع التهاب الأنف التحسسي و / أو الربو باستخدام نهج كرد 5 . هذه النتائج على توعية هذه الحشائش شبه الاستوائية والمعتدلة في جنوب الصين إضافة أدلة هامة إلى أن حاليا في الأدب.

Protocol

تم اعتماد بروتوكول الدراسة، بما في ذلك استخدام عينة المصل البشري، من قبل لجنة الأخلاقيات، مستشفى تابع الأولى من جامعة قوانغتشو الطبية. وقدم جميع المشاركين موافقة خطية مستنيرة، إما بشكل مستقل أو عن طريق والديهم (في حالة الأطفال). وقد تم تسجيل البروتوكول على الان?…

Representative Results

محلل المناعية الآلي بالكامل المستخدمة في هذه الدراسة لديها بنية المرحلة الصلبة مغطاة المكونات التساهمية مسببات الحساسية أو مكونات الحساسية التي تتفاعل مع جزيئات الفائدة (سيج) في عينات المصل من المريض. مع برنامج تلقائي، محلل يغسل كل غير محددة إيغس ?…

Discussion

وقد يوفر محللو المقايسة المناعية التلقائية بالكامل اتساقا مرضيا بين المناطق والمختبرات والمؤسسات ومع مرور الوقت. وقد وجد هذا الإجراء التلقائي لدعم كبير البحوث والبحوث السريرية مقعد، وتمكين الكشف الموحد للكثير من المواد المسببة للحساسية و / أو مكونات الحساسية، وتح?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

نشكر يويمينغ سو على مساعدته في إعداد هذا الرقم. وقد تم تمويل هذه الدراسة من قبل مؤسسة قوانغدونغ للعلوم والتكنولوجيا (مشروع رقم: 2014A020212352)، ومكتب التعليم قوانغتشو (1201630044؛ 1201630393) والمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (نسفك 81572063؛ نسفك 81601394).

Materials

ImmunoCAP 1000 Instrument Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 12-3800-01
Phadia Information Data Manager Software Package Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 12-3801-11
Software Package, ImmunoCAP 1000 Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 12-3801-12
g2
(Bermuda grass)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4131-01
g6
(Timothy grass)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4100-01
w22
(Japanese Hop)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4452-01
g216
(nCyn d 1)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4972-01
g205
(rPhl p 1)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5234-01
g208
(nPhl p 4)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5288-01
g215
(rPhl p 5b)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5338-01
g209
(rPhl p 6)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5289-01
g210
(rPhl p 7)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5290-01
g211
(rPhl p 11)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5291-01
g212
(rPhl p 12)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5292-01
o214
Cross-reacting carbohydrate determinants (CCDs)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5339-01
Specific IgE Conjugate 400 Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9310-08
Specific IgE Calibrator Strip Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9459-08
Specific IgE Curve Control Strip Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9312-08
Specific IgE Anti-IgE ImmunoCAP Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4417-01
ImmunoCAP Specific IgE Negative Control Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9445-01
ImmunoCAP Specific IgE Control L Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9528-01
ImmunoCAP Specific IgE Control M Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9529-01
ImmunoCAP Specific IgE Control H Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9530-01
Development Solution Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9439-08
Stop Solution Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 34-2271-58
Washing Solution Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9202-08
FluoroC Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9264-01
Maintenance Solution Kit Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9476-01

References

  1. Scadding, G. K. BSACI guidelines for the management of allergic and non-allergic rhinitis. Clin Exp Allergy. 38 (1), 19-42 (2007).
  2. Pollart, S. M., Reid, M. J., Fling, J. A., Chapman, M. D., Platts-Mills, T. A. Epidemiology of emergency room asthma in northern California: association with IgE antibody to rye grass pollen. J Allergy Clin Immunol. 82 (2), 224-230 (1988).
  3. Wang, Q. Lower airway inflammation and hyperresponsiveness in non-asthmatic patients with non-allergic rhinitis. J Thorac Dis. 7 (10), 1756-1764 (2015).
  4. Ma, Y. The link between mold sensitivity and asthma severity in a cohort of northern Chinese patients. J Thorac Dis. 7 (4), 585-590 (2015).
  5. Luo, W. Major grass pollen allergens and components detected in a southern Chinese cohort of patients with allergic rhinitis and/or asthma. Mol Immunol. 78, 105-112 (2016).
  6. Zhang, Y., Zhang, L. Prevalence of allergic rhinitis in china. Allergy Asthma Immunol Res. 6 (2), 105-113 (2014).
  7. Zeng, G., Zheng, P., Luo, W., Huang, H., Wei, N., Sun, B. Longitudinal profiles of serum specific IgE and IgG4 to Dermatophagoides pteronyssinus allergen and its major components during allergen immunotherapy in a cohort of southern Chinese children. Mol Immunol. 74, 1-9 (2016).
  8. Kleine-Tebbe, J., Matricardi, P. M., Hamilton, R. G. Allergy work-up including component-resolved diagnosis: how to make allergen-specific immunotherapy more specific. Immunol Allergy Clin North Am. 36 (1), 191-203 (2016).
  9. Sun, B., Zheng, P., Wei, N., Huang, H., Zeng, G. Co-sensitization to silkworm moth (Bombyx mori) and 9 inhalant allergens among allergic patients in Guangzhou, southern China. PLoS One. 9 (5), e94776 (2014).
  10. Zeng, G. Component-resolved diagnostic study of Dermatophagoides pteronyssinus major allergen molecules in a southern Chinese cohort. J Investig Allergol Clin Immunol. 25 (5), 343-351 (2015).
  11. Liu, J., Guo, A., Guo, H. Morphological variation and types of Cynodon dactylon. Acta Prataculture Sinica. 12 (6), 99-104 (2003).
  12. Zhang, H., Xi, J. Study on the germplasm resource and ecological characteristics of wild carpet grass (Axonopus compressus) in Guangdong. Grassland and Turf. 13 (1), 25-28 (2005).
  13. Kao, S. H., Su, S. N., Huang, S. W. Sub-proteome analysis of novel IgE-binding proteins from Bermuda grass pollen. Proteomics. 5 (14), 3805-3813 (2005).
  14. Ouyang, Y. H., Zhang, D. S., Fan, E. Z., Li, Y., Zhang, L. Correlation between symptoms of pollen allergic rhinitis and pollen grain spreading in summer and autumn. Zhonghua Er Bi Yan Hou Tou Jing Waike Zazhi. 47 (8), 623-627 (2012).
  15. Westritschnig, K. Analysis of the sensitization profile towards allergens in central Africa. Clin Exp Allergy. 33 (1), 22-27 (2003).
  16. Rossi, R. E., Monasterolo, G., Monasterolo, S. Measurement of IgE antibodies against purified grass-pollen allergens (Phl p 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 11, and 12) in sera of patients allergic to grass pollen. Allergy. 52 (12), 1180-1185 (2001).
  17. Zafred, D., Nandy, A., Pump, L., Kahlert, H., Keller, W. Crystal structure and immunologic characterization of the major grass pollen allergen Phl p 4. J Allergy Clin Immunol. 132 (3), 696-703 (2013).
  18. Chabre, H. Molecular variability of group 1 and 5grass pollen allergens between Pooideae species: implications for immunotherapy. Clin Exp Allergy. 40 (3), 505-519 (2010).
  19. Mari, A. Skin test with a timothy grass (Phleum pratense) pollen extract vs.IgE to a timothy extract vs. IgE to rPhl p 1 rPhl p 2, nPhl p 4, rPhl p 5, rPhl p 6, rPhl p 7, rPhl p 11, and rPhl p 12: epidemiological and diagnostic data. Clin Exp Allergy. 33 (1), 43-51 (2003).
  20. Grote, M., Stumvoll, S., Reichelt, R., Lidholm, J., Rudolf, V. Identification of an allergen related to Phl p 4, a major timothy grass pollen allergen, in pollens, vegetables, and fruits by immunogold electron microscopy. Biol Chem. 383 (9), 1441-1445 (2002).
  21. Andersson, K., Lidholm, J. Characteristics and immunobiology of grass pollen allergens. Int Arch Allergy Immunol. 130 (2), 87-107 (2003).
  22. Tripodi, S. Molecular profiles of IgE to Phleum pratense in children with grass pollen allergy: implications for specific immunotherapy. J Allergy Clin Immunol. 129 (3), 834-839 (2012).
  23. Stumvoll, S., et al. Purification, structural and immunological characterization of a timothy grass (Phleum pratense) pollen allergen Phl p 4, with cross-reactive potential. Biol Chem. 383 (9), 1383-1396 (2002).
  24. Wood, R. A., Segall, N., Ahlstedt, S., Williams, P. B. Accuracy of IgE antibody laboratory results. Ann Allergy Asthma Immunol. 99 (1), 34-41 (2007).
  25. Wang, J., Godbold, J. H., Sampson, H. A. Correlation of serum allergy (IgE) tests performed by different assay systems. J Allergy Clin Immunol. 121 (5), 1219-1224 (2008).
check_url/cn/55723?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Luo, W., Pan, G., Huang, H., Zheng, P., Wei, N., Zhang, Y., Zeng, G., Sun, B. A Component-resolved Diagnostic Approach for a Study on Grass Pollen Allergens in Chinese Southerners with Allergic Rhinitis and/or Asthma. J. Vis. Exp. (124), e55723, doi:10.3791/55723 (2017).

View Video