꼬마 선 충 모델에서 Aeromonas 감염의 병 인 및 독성 평가

Summary

C. 선 충감염 Aeromonas 공부 하 세 다른 실험을 소개 합니다. 이러한 편리한 방법을 사용 하 여, 그것 중 고 Aeromonas 종 내에서 독성을 평가 하기 쉽습니다.

Abstract

인간 병원 체 Aeromonas 임상적으로 위장염, 상처 감염, 패 혈 증, 및 요로 감염 원인 표시 되었습니다. 대부분의 인간의 질병 4 종의 박테리아와 관련 된 것으로 보고 되었습니다: Aeromonas dhakensis, Aeromonas hydrophila, Aeromonas veronii및 Aeromonas caviae. 모델 생물 꼬마 선 충 은 Aeromonas의 세균 병 인을 공부 하는 우수한 감염 모델을 제공 하는 bacterivore 이다. 여기, 생존, 액체 독성, 그리고 근육 괴 사 분석을 포함 하 여 선 충 C. 모델을 사용 하 여 Aeromonas 감염 연구 3 다양 한 실험을 소개 합니다. Aeromonas 의 독성을 결정 하는 세 가지 방법의 결과 일치 했다. A. dhakensis 는 4 주요 Aeromonas 종 임상 감염을 일으키는 가운데 가장 독성이 있을 표시 했다. 이러한 메서드 및 Aeromonas 종 내에서 독성을 평가 하 고 Aeromonas 감염의 병 인에 대 한 우리의 이해에 기여 하는 편리한 방법이 되도록 표시 됩니다.

Introduction

인간 병원 체, Aeromonas, 임상적으로 위장염, 상처 감염, 패 혈 증, 및 요로 감염^1,2에 표시 되었습니다. 가장 관련 된 인간의 질병 관련 4 개의 세균성 종 된 것으로 보고 되었습니다: Aeromonas dhakensis, Aeromonas hydrophila, Aeromonas veronii및 Aeromonas caviae ^{2,3 , 4 , 5}. Aeromonas 전염병 중 소프트-조직 감염에에서 발생할 수 있습니다 심각한 병 적 상태와 사망률 인 간에. 메모의 근육 괴 사 연 조직 감염⁶의 가장 심한 형태입니다. 생존의 관찰 및 감염 후 꼬마 선 충 의 근육 괴 사 Aeromonas의 독성을 추측 하는 편리한 방법입니다.

과학자는 이미 수많은 모형 유기 체 공부 세균 감염을 개발 했다. 이전 학문에서는, 쥐, zebrafishes, 및 nematodes 사용 되었다 동물 모델로 pathogenesis Aeromonas^6,,78의 독성을 공부 하 고. 모든 동물 모델의 ‘ 장점 및 응용 프로그램. 모델 유기 체, 꼬마 선 충, foodnaturally bacterivorous 선 충 류는 섭취 박테리아 이다. C. 선 충의 진화의 과정을 통해 세균 감염에 대 한 복잡 한 타고 난 면역 체계를 개발 했다. 세균 감염의 스트레스, 선 충 C. Aeromonas^6,,79 와 다른 병원 체의 세균 병 인을 공부 하는 우수한 감염 모델 입증 되었습니다. 같은 균 류¹⁰ 및 enterohaemorrhagic 대장균 O157:H7¹¹. 그러나, 여전히 모델 C. 선 충 을 사용 하 여 Aeromonas독성 연구 방법론에 초점을 맞춘 없습니다 게시가입니다.

여기, 우리가 공부 Aeromonas 감염 동물 모델로 서 C. 선 충 을 사용 하 여 3 개의 다른 실험 소개: 생존, 액체 독성, 그리고 근육 괴에 대 한 분석. 이 메서드는 중 고 Aeromonas 종 내에서 독성을 평가 하 고 Aeromonas의 pathogenesis의 이해를 개선 하는 편리한 방법을.

Protocol

1입니다. 문화 매체의 준비 참고: 솔루션 준비에 대 한 표 1을 참조 하십시오. M9 중간12준비, KH2포41.5 g, 나2HPO4, 5.66 g 및 이온된 물 500 mL에 NaCl의 2.5 g을 분해. 20 분을 위한 121 ° C에 고압 실내 온도에 냉각 될 때까지 기다립니다 고 1 M MgSO4 처음 사용 하기 전에 0.5 mL를 추가 합니다. 선 충 류 성장 매체 (NGM)<su…

Representative Results

위에서 설명한 프로토콜에 따라, 4 개의 Aeromonas 긴장에서 독성 구분 하기 쉽습니다. C. 선 충 의 생존 분석 결과 그림 1에 표시 됩니다. C. 선 충 감염 Aeromonas 종, 낮은 높은 순서로 표시 된의 생존 율 했다: A. caviae, A. veronii, A. hydrophila 그리고 A. dhakensis. 독성 및 Aeromonas 종 내 면에서 다양성은, C. 선 충…

Discussion

C. 선 충 은 bacterivorous 선 충 류는 자연스럽 게 음식 섭취 박테리아의 진화 과정 동안 박테리아에 복잡 한 타고 난 면제를 개발 했다. 유지 하 고 면역을 지 원하는 주요 장기의 2 개는 표 피와 내장^9,13. 표 피와 근육 C. 선 충 의 포유류와 인간⁶소프트-조직 구조를 유사합니다. 이러한 특성 때문에 C. 선 충 은 Aeromonas<…

Materials

Shaker incubator	YIH DER	LM-570R	Bacteria incubation
K2HPO4	J.T.Baker	MP021519455	Culture medium preparation
KH2PO4	J.T.Baker	3246-05	Culture medium preparation
Na2HPO4	J.T.Baker	MP021914405	Culture medium preparation
NaCl	SIGMA	31434	Culture medium preparation
MgSO4	SIGMA	M7506	Culture medium preparation
agar	Difco	214530	Culture medium preparation
CaCl2	SIGMA	C1016	Culture medium preparation
cholesterol	SIGMA	C8503	Culture medium preparation
ethanol	SIGMA	32205	Culture medium preparation
KOH	SIGMA	P5958	Culture medium preparation
6 cm petri plate	ALPHA PLUS	46	agar plate preparation
96-well plate	FALCON	353072	liquid assay
bacterial peptone	Affymetrix/USB	AAJ20048P2	Culture medium preparation
yeast extract	SIGMA	92144	Culture medium preparation
citric acid•H2O	SIGMA	C1909	Culture medium preparation
tri-potassium citrate•H2O	SIGMA	104956	Culture medium preparation
FudR	SIGMA	1271008	Culture medium preparation
disodium EDTA	SIGMA	E1644	Culture medium preparation
FeSO4•7 H2O	SIGMA	215422	Culture medium preparation
MnCl2•4 H2O	SIGMA	221279	Culture medium preparation
ZnSO4•7 H2O	SIGMA	204986	Culture medium preparation
CuSO4•5 H2O	SIGMA	C8027	Culture medium preparation
tryptone	SIGMA	16922	Culture medium preparation
Microscope system	Nikon	Eclipase Ti inverted	microscope imaging
Scientific CCD Camera	QImaging	Retiga-2000R Fast 1394	microscope imaging