提供有意义的环境富集和测量唾液皮质醇在猪安置在板状地板
Summary
该协议演示如何为在猪生命不同阶段安置在板条地板上的猪提供实用、有意义的环境富集，以及如何以非侵入性方式收集唾液样本，以测量皮质醇浓度，作为急性应激的生物标志物。
Abstract
由于猪肉是全球消费最多的肉类，养猪业的动物福利日益成为公众关注的主要问题，这带来了来自消费者、立法者和其他利益相关者的巨大压力，要求它们进行管理改革。改善这些动物的福祉。几项研究表明，为猪提供环境丰富，可以表达它们的自然行为，如生根和探索，以及在前筑巢，并且与减轻压力和改善产量有关和福利。然而，在提供环境富集时，应考虑许多因素，例如地板类型、排水和污水系统、猪的生活阶段、材料以及笔内的悬挂方法、高度和位置。本文的目的是（1）提供方法学信息，说明如何为猪提供相对简单和实用的有意义的环境富集，这些猪在猪的寿命的不同阶段被安置在板条地板上，（2）演示如何收集唾液样本以测量皮质醇浓度，作为急性应激的生物标志物。协议包括有关使用黄麻、棉绳、机架中的稻草以及可咀嚼的硅胶棒设备的信息，作为法工和哺乳笔、断奶剂和精加工笔中的环境浓缩。此外，还详细介绍了使用棉绳进行非侵入性唾液样本采集的皮质醇浓度分析。所提供的协议适用于旨在改善和监测动物福利的专业人员，包括研究和工业养猪业。
Introduction
猪肉是全世界消费最多的肉类，每年饲养和屠宰的生猪超过13亿头。近年来，养猪业的动物福利日益成为公众关注的主要问题，来自客户、立法者和其他利益相关者的巨大压力，要求它们进行管理改革，以改善其福祉。这些动物。几项研究表明，为猪提供环境富集与减轻压力、改善生产和福利有关，因为它允许猪表达其自然行为，如生根和探索，以及筑巢前远行3，4，5，6，7。
猪被认为是聪明的动物，具有高度好奇的性质;因此，如果没有一个合适的环境，猪可能会表现出立体行为和直接操纵社会行为对笔伴侣，这可能导致尾巴咬，以及其他伤害和压力8，9。因此，提供有意义的环境丰富是由专业人士建议的，在一些国家，甚至根据法规和立法，如欧盟理事会指令2008/120/EC5强制实施。
提供有意义的环境富集可能具有挑战性;它应满足猪在生活每个阶段的自然行为需求，并考虑到实际和技术的限制。在之前，提供筑巢材料与较短的持续时间以及在整个哺乳期和哺乳期新生小猪的存活率较高有关。此外，在具有环境富集的自由笔中，母体行为得到改善，以及小猪3、10、11、12、13的认知表现和体重增加。发完后，将猪（钳子、生长或完成者）从不同的垃圾或钢笔中分组，可能会有压力，对其它笔友造成攻击性，这可能导致14、15的伤害。因此，当混合不熟悉的猪时，提供有意义的环境丰富可以潜在地减少因挫折和攻击性或重定向生根行为而导致的不良行为的发生。
根据欧洲联盟理事会第2008/120/EC号指令（2001/93/EC设立），要求猪必须永久获得足够数量的材料，以便能够进行适当的调查和操纵活动，如稻草、干草、木材、锯末，蘑菇堆肥，泥炭或这5，6的混合物。然而，在许多农场，使用这些材料可能难以管理，因为它可能导致排水和污水系统的堵塞，特别是在地板板条的农场。不过，根据欧盟理事会的指令，只要允许猪进行适当的调查和操纵活动，农民就可以提供替代浓缩材料。
缺乏环境富集可能导致沮丧和压力3，这可能激活下丘脑垂体肾上腺（HPA）轴。在猪，以及人类和其他动物，压力通常导致从脑垂体分泌腺皮质激素（ACTH）。ACTH 与肾上腺皮质上的受体结合，刺激糖皮质激素皮质醇的肾上腺释放，该皮质醇被认为是压力的主要生物标志物，可在血液、尿液、唾液和头发中测量。唾液皮质醇是急性应激的标记物，因为它反映了其在血液中的生物活性浓度4。它的优点是非侵入性样品收集，不处理动物，通过棉绳提供作为环境富集16，17。头发皮质醇被用作慢性压力的标记，因为皮质醇随着时间的推移在头发中积累，可以提取和测量18，19;然而，它需要动物处理，重复取样的数量受头发生长速率的限制，而且分析更麻烦，因为它需要漫长的提取过程。尽管如此，唾液和头发皮质醇可能为动物福利提供补充信息。
本文的目的是（ 1 ）提供方法学信息，说明如何为猪提供相对简单和实用、有意义的环境富集，这些猪在猪生命的不同阶段被安置在板条地板上（和哺乳，和（2）演示如何非侵入性地收集唾液样本以测量皮质醇浓度，作为急性应激的生物标志物。
Protocol
Representative Results
Discussion
本文详细介绍了如何为猪提供简单实用的环境富集，这些猪在它们生命的不同阶段被安置在板条地板上，以及如何非侵入性地收集唾液样本以测量皮质醇浓度，作为急性应激的生物标志物。稻草作为床上用品被认为是最适合猪的环境富集之一，但在板条地板上可能不切实际。然而，相对便宜的替代品，如黄麻、棉绳、架子中的稻草和可咀嚼设备，可以实际、安全地应用。
这?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们感谢 Lahav CRO 在其农场开展研究，并感谢农场团队在整个研究中提供了宝贵的技术帮助。这项研究由以色列农业和农村发展部首席科学家资助。
Materials
| Bite-Rite | Ikadan System USA Inc. | Consider ordering additional replaceable silicone sticks | |
| ELISA; Saliva Cortisol Kit | DRG International Inc. NJ, USA | Slv2930 | |
| HALM 60/80 CM | W. Domino A/S, DK | 49084/ 85 | |
| TEGO Swine Oral Fluids Kit | ITL BioMedical, USA | A100930 | Including everything needed for the saliva sampling protcol |
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