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JoVE 杂志 生物学
Detection of Ligand-activated G Protein-coupled Receptor Internalization by Confocal Microscopy

Detecção de activados por ligandos L acoplado a proteína do receptor de internalização por Microscopia Confocal

DOI:
10.3791/55514-v

•

10:24 min

•

April 09, 2017

•

, , , , ,
1National Engineering Research Center of Marine Facilities Aquaculture, Marine Science College,Zhejiang Ocean University, 2Institute of Biochemistry, College of Life Sciences,Zhejiang University

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:49Cell Seeding
  • 02:05Cell Transfection Method 1 with Liposome Formulations
  • 03:44Cell Culture on Coverslips
  • 04:37Cellular Localization Using Confocal Microscopy
  • 05:47Cellular Internalization
  • 06:42Confocal Microscopy
  • 07:43Results: Gonadotropin Releasing Hormone Receptor Internalization Detection
  • 09:21Conclusion

Summary

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Este protocolo descreve a detecção de microscopia confocal de receptor acoplado a proteína G (GPCR) internalização em células de mamífero. Ele inclui a cultura de células de base, transfecção, e procedimento de microscopia confocal e fornece um método eficiente e facilmente interpretável para detectar a localização subcelular e internalização de GPCR expresso-fusão.

Tags

GPCRLigand-activatedInternalizationConfocal MicroscopySubcellular LocalizationReceptor RecyclingHEK293 CellsTransfectionPlasmid DNAReduced Serum MediumReagentDMEMFBS

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