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Une analyse optique pour le recyclage de vésicule synaptique dans les neurones en culture surexprimant protéines présynaptiques
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An Optical Assay for Synaptic Vesicle Recycling in Cultured Neurons Overexpressing Presynaptic Proteins
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Une analyse optique pour le recyclage de vésicule synaptique dans les neurones en culture surexprimant protéines présynaptiques

DOI:
10.3791/58043-v

•

09:33 min

•

June 26, 2018

•

, , ,
1Institute for Anatomy and Embryology,University Medical Centre Göttingen

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:31Transfection
  • 03:52Stimulation and Syt1 Uptake
  • 05:39Immunocytochemistry
  • 07:17Results: GFP-Rogdi at Functional Synapses
  • 08:42Conclusion

Summary

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Nous décrivons une analyse optique des vésicules synaptiques (SV) recyclage dans les neurones en culture. Alliant ce protocole de transfection double pour exprimer un marqueur présynaptique et la protéine d’intérêt permet de localiser les sites présynaptiques, leur Vésicule synaptique capacité de recyclage et déterminer le rôle de la protéine d’intérêt.

Tags

Keywords: Optical AssaySynaptic Vesicle RecyclingCultured NeuronsPresynaptic ProteinsAntibody SpecificityPrimary Hippocampal CellsTransfectionCalcium ChlorideEndotoxin-free DNATransfection BufferReduced-serum MediumCell-culture MediumIncubationWashingActive Synapses

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