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원형 RNA를 분석하기 위해 미니유전자를 포함하는 Alu 요소 사용
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JoVE 杂志 生物化学
Use of Alu Element Containing Minigenes to Analyze Circular RNAs
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원형 RNA를 분석하기 위해 미니유전자를 포함하는 Alu 요소 사용

DOI:
10.3791/59760-v

•

13:10 min

•

March 10, 2020

•

, , ,
1Institute for Molecular and Cellular Biochemistry,University of Kentucky

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:09Design of the Constructs
  • 02:14Select the Sequence to be Cloned in an Expression Vector
  • 03:35Design Primers for Cloning
  • 04:59Cloning of Constructs
  • 07:05Transfection of the Reporter Genes into Eukaryotic Cells
  • 10:21Results: Analysis of Circular RNAs
  • 11:09Conclusion

Summary

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우리는 원형 RNA를 생성하는 리포터 유전자를 복제하고 분석합니다. 이러한 리포터 유전자는 선형 접합을 분석하고 Alu 요소를 포함하는 구성물보다 큽합니다. 원형 RNA를 조사하기 위하여는, 구조물은 세포로 형질 감염되고 결과 RNA는 선형 RNA의 제거 후에 RT-PCR를 사용하여 분석됩니다.

Tags

Circular RNAAlternative SplicingGenomic Expression SystemAlu ElementPCR OptimizationUCSC Genome BrowserRepetitive ElementsPrimer DesignExon-intron BordersReverse Complement

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