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使用开源 smfBox 进行精确和准确的单分子 FRET 测量
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生物化学
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JoVE 杂志 生物化学
Making Precise and Accurate Single-Molecule FRET Measurements using the Open-Source smfBox
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使用开源 smfBox 进行精确和准确的单分子 FRET 测量

DOI:
10.3791/62378-v

•

07:12 min

•

July 05, 2021

•

, , ,
1Sheffield Institute for Nucleic Acids, Department of Chemistry,University of Sheffield

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:41Experimental Setup
  • 03:49Preparation Validation
  • 04:24Concentration Bingo
  • 05:41Results: Doubly Labeled Duplex DNA Sample Analysis
  • 06:39Conclusion

Summary

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本文提供了使用开源、廉价的 smfBox 对单个、自由扩散的生物分子进行完全校正的准确 FRET 测量的分步说明，从打开、通过对准和聚焦，再到数据收集和分析。

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Keywords: Single-molecule FRETSmfBoxOpen-sourceBiomolecular SystemsProtein FoldingProtein-DNA InteractionsDNA AllosteryALEXLaser ExcitationFluorescent DyeAlignmentPinhole Positioner

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