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Quantifying Replication Stress in Ovarian Cancer Cells Using Single-Stranded DNA Immunofluorescence
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Cuantificación del estrés de replicación en células de cáncer de ovario mediante inmunofluorescencia de ADN monocatenario

DOI:
10.3791/64920-v

•

06:25 min

•

February 10, 2023

•

, ,
1Division of Oncology, Department of Medicine, Siteman Cancer Center,Washington University School of Medicine

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:00Plating, Pulsing, Fixation, Permeabilization, and Blocking of Cells
  • 03:59Immunostaining with the IdU Antibody
  • 05:15Results: IdU-Induced Replication Stress
  • 05:41Conclusion

Summary

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Aquí, describimos un método basado en inmunofluorescencia para cuantificar los niveles de ADN monocatenario en las células. Este método eficiente y reproducible se puede utilizar para examinar el estrés de replicación, una característica común en varios cánceres de ovario. Además, este ensayo es compatible con una tubería de análisis automatizada, lo que aumenta aún más su eficiencia.

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Keywords: Replication StressSingle-stranded DNAImmunofluorescenceOvarian CancerBRCA1BRCA2Cell LinesBiomarkerDNA RepairHigh-throughputQuantificationProtocol

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