تنقية الميتوكوندريا من خلايا الخميرة
Summary
نحن تصف طريقة سريعة وفعالة لتنقية الميتوكوندريا من الخميرة<em> السكيراء الجعوية</em>. هذه الطريقة تمكن من عزل عالية الغلة من الميتوكوندريا نقية خالية من التلوث أساسا العضيات الأخرى والمحافظة على سلامتها الهيكلية والوظيفية الخاصة بهم بعد تنقيتها.
Abstract
الميتوكوندريا هي الموقع الرئيسي لإنتاج ATP أثناء عملية التمثيل الغذائي في الخلايا الهوائية غير حقيقية النواة الضوئي<sup> 1</sup>. هذه العضيات معقدة تلعب أيضا دورا أساسيا في موت الخلايا أفكارك<sup> 2</sup> بقاء الخلية ،<sup> 3</sup> والتنمية الثدييات<sup> 4</sup> ، وتطوير الخلايا العصبية وظيفة<sup> 4</sup> ، مما يشير إلى داخل الخلايا<sup> 5</sup> ، وطول العمر التنظيم<sup> 6</sup>. فهمنا لهذه العمليات البيولوجية المعقدة التي تسيطر عليها الميتوكوندريا تعتمد على أساليب قوية لتقييم التشكل من البروتين ، وتكوين الدهون وسلامة عينات من الحمض النووي ، وظائفها الحيوية العديدة. الخميرة في مهدها<em> السكيراء الجعوية</em> وراثيا وكيميائيا حقيقي النواة وحيدة الخلية تلاعب مع الجينوم بروتيوم المشروح ومحددة جيدا ، هو نموذجا قيما لدراسة الآليات الجزيئية والخلوية الكامنة الوظائف البيولوجية الأساسية للالميتوكوندريا. لهذه الأنواع من الدراسات ، من الأهمية بمكان أن يكون الميتوكوندريا نقية للغاية. هنا نقدم وصفا مفصلا لطريقة سريعة وفعالة لتنقية الخميرة الميتوكوندريا. هذه الطريقة تمكن من عزل الميتوكوندريا عالية نقية خالية من التلوث أساسا العضيات الأخرى والمحافظة على سلامتها الهيكلية والوظيفية الخاصة بهم بعد تنقيتها. الميتوكوندريا تنقيته بواسطة هذه الطريقة هي مناسبة لإعادة تشكيل خلية خالية من العمليات الأساسية الميتوكوندريا ، ويمكن استخدامها لتحليل بنية الميتوكوندريا ووظائفها ، وlipidome بروتيوم الميتوكوندريا ، والحمض النووي.
Protocol
Discussion
هذه الطريقة تمكن من عزل عالية الغلة من الميتوكوندريا نقية من خلايا الخميرة. الميتوكوندريا يطهر هذا الأسلوب أساسا خالية من التلوث وغيرها من العضيات المحافظة على سلامتها الهيكلية والوظيفية الخاصة بهم بعد تنقيتها. عائدات الطريقة الموصوفة الميتوكوندريا التي هي مناسبة…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد هذا العمل من المنح المقدمة من CIHR NSERC وكندا. فيتامين هو محقق جديد CIHR وكرسي أبحاث جامعة كونكورديا في علم الجينوم ، بيولوجيا الخلية والشيخوخة.
Referenzen
- Voet, D., Voet, J. G. Biochemistry. , (2004).
- Suen, D. -. F., Norris, K. L., Youle, R. J. Mitochondrial dynamics and apoptosis. Genes Dev. 22, 1577-1590 (2008).
- Cheng, W. C., Berman, S. B., Ivanovska, I., Jonas, E. A., Lee, S. J., Chen, Y., Kaczmarek, L. K., Pineda, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Hardwick, J. M. Mitochondrial factors with dual roles in death and survival. Oncogene. 25, 4697-4705 (2006).
- Detmer, S. A., Chan, D. C. Functions and dysfunctions of mitochondrial dynamics. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 8, 870-879 (2007).
- McBride, H. M., Neuspiel, M., Wasiak, S. Mitochondria: more than just a powerhouse. Curr. Biol. 16, R551-R560 (2006).
- Balaban, R. S., Nemoto, S., Finkel, T. Mitochondria, oxidants, and aging. Cell. 120, 483-495 (2005).
