从酵母细胞线粒体的纯化
Summary
我们描述了一个快速和有效的方法纯化的酵母线粒体<em>酿酒酵母</em>。这种方法使高产纯线粒体隔离，其他细胞器的污染基本上是免费的，并保留其净化后的结构和功能完整性。
Abstract
线粒体是ATP生产的主要场所，在真核细胞非光合细胞的有氧代谢<sup> 1</sup>。这些复杂的细胞器在细胞凋亡中发挥重要作用<sup> 2</sup>，细胞的生存<sup> 3</sup>，哺乳动物的发展<sup> 4</sup>，神经细胞的发育和功能<sup> 4</sup>，细胞内的信号<sup> 5</sup>和长寿调控<sup> 6</sup>。我们的线粒体控制这些复杂的生物过程的理解，依靠强大的方法，以评估它们的形态，其蛋白质和脂质成分，它们的DNA的完整性，他们的许多重要职能。芽殖酵母<em>酿酒酵母</em>，一种基因和生物化学来操作带注释的基因组和蛋白质组定义良好的，单细胞真核生物是一个有价值的模型研究线粒体的重要生物功能的分子和细胞的内在机制，。对于这些类型的研究，这是至关重要的高纯度线粒体。在这里，我们提出了一个迅速和有效的方法纯化的酵母线粒体的详细描述。这种方法使其他细胞器的污染基本上是免费的，保留其净化后的结构和功能完整性的高度纯净的线粒体的隔离。通过这种方法纯化线粒体是适合无细胞重组基本线粒体过程，可用于线粒体结构和功能，线粒体的蛋白质和lipidome，和线粒体DNA的分析。
Protocol
Discussion
这种方法使高产的隔离从酵母细胞中的纯线粒体。通过这种方法纯化的线粒体其他细胞器的污染基本上是免费的，其净化后保留其结构和功能的完整性。所述的方法产生的线粒体适用于无细胞重组基本线粒体过程。这些高度纯净的线粒体也可以用于线粒体结构和功能，线粒体蛋白质组和lipidome，和线粒体DNA的分析。
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
这项工作得到了CIHR和加拿大NSERC资助。 VIT是一个新的CIHR调查和Concordia大学基因组学研究主席，细胞生物学和老化。
Referenzen
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