Stel een chronische bacteriële infectie muismodel met persisterende<em> Salmonella</em> Typhimurium kolonisatie in de darm voor 27 weken.
Abstract
De bacteriële infectie muis model is een krachtig modelsysteem voor de bestudering van gebieden, zoals infecties, ontstekingen, immunologie, signaaltransductie, en tumorigenese. Veel onderzoekers hebben gebruik gemaakt van de colitis veroorzaakt door<em> Salmonella</em> Typhimurium voor de studies op de vroege fase van de ontsteking en infectie. Echter, slechts weinig rapporten zijn op de chronische infectie<em> In vivo</em>. Muizen met<em> Salmonella</em> Aanhoudende bestaan in het maag-darmkanaal kunnen we op de lange termijn gastheer-bacteriële interactie, signaaltransductie, en tumorigenese te verkennen. We hebben een chronische bacteriële infectie muismodel met<em> Salmonella</em> Typhimurium kolonisatie in de muis darm meer dan 6 maanden. Voor het gebruik van dit systeem, is het noodzakelijk dat de onderzoeker om te leren hoe de bacteriële cultuur voor te bereiden en maagsonde de dieren. We detail een methodiek voor te bereiden bacteriecultuur en maagsonde muizen. We hebben ook laten zien hoe je de sporen<em> Salmonella</em> Persistentie in het maagdarmkanaal. In het algemeen zal dit protocol hulp onderzoekers met behulp van de bacteriële infectie muismodel van fundamenteel belang biologische en microbiologische vragen te beantwoorden.
Protocol
Dit protocol omvat drie delen: bacteriecultuur, muis maagsonde, en Salmonella detectie. 1. Salmonella groei conditie. Bereid de Salmonella Luria-Bertani bouillon (LB) Plaat uit, incubeer bij 37 ° C gedurende de nacht. Kies een kloon van de LB plaat en in 7 ml LB in een 12 ml tube, en schud bij 37 ° C gedurende ongeveer 5 uur. Inoculeren 50 ml LB met 0,05 ml van een stationaire fase cultuur en incubeer bij 37 ° C zonder schudden ged…
Discussion
Voor het gebruik van dit systeem, is het noodzakelijk dat de onderzoeker om te leren hoe de dieren maagsonde. We detail een methodiek voor te bereiden bacteriecultuur en maagsonde de muizen. We hebben ook laten zien hoe je de Salmonella persistentie in de gastro-intestinale (GI) stelsel te controleren. De kritische stappen in dit protocol, waaronder:
Streptomycine-voorbehandeling: streptomycine-voorbehandeling kan ontdoen van een aantal commensale darmflora en maken de muizen gevoelig zijn voor de …
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dit werk werd ondersteund door de NIDDK KO1 DK075386 te verlenen en de American Cancer Society RSG-09-075-01-MBC tot Jun zon