Imagem de cálcio: um método para visualizar a atividade neural em elegans vivos

Abstract

Fonte: Turek, M. et al. Microchambers agarose para imagem de cálcio de longo prazo de caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2015). 

Este vídeo introduz os conceitos por trás da imagem de cálcio e inclui um protocolo de exemplo para imagens de lapso de tempo de vermes contidos em poços de agarose moldados.

Protocol

Este protocolo é um trecho de Turek et al, Agarose Microchambers for Long-term Calcium Imaging of Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2015). 1. Imagem de cálcio Use cepas transgênicas expressando sensores de cálcio geneticamente codificados, como HBR16 (goeIs5[pnmr-1::SL1-GCaMP3.35-SL2::unc-54-3’UTR, unc-119(+)])…

Materials

LED system	CoolLED	pE-2
Compound microscope	Nikon	TiE
EMCCD camera	Andor	iXon 897	now sold as iXon Ultra 897
Z-stage for the microscope	Prior	Nano Scan Z
X-Y stage for the microscope	Prior	Proscan III
Red light filter	Chroma	ET660/50m
35 mm Petri dish	Falcon	Falcon Disposable Petri Dishes, Sterile, Corning