Een orthotope Model van Murine Blaaskanker
Summary
Blaastumoren zijn gevestigd in vrouwelijke muizen in een minimaal invasieve wijze via catheterisatie, lokale cauterisatie, en de daaropvolgende aanhechting van carcinoom cellen om de branden sites.
Abstract
In deze eenvoudige procedure, zijn blaastumoren gevestigd in vrouwelijke C57 muizen door het gebruik van de catheterisatie, lokale cauterisatie, en de daaropvolgende celadhesie. Na hun blazen zijn transurethrally gecatheteriseerd en afgevoerd, zijn dieren weer gecatheteriseerd het inbrengen van een platina draad in blazen toestaan zonder beschadiging van de plasbuis of blaas. De catheters zijn gemaakt van Teflon om te dienen als een isolator voor de draad, die elektrische stroom voert in de blaas om een brandwond creëren. Een elektrocauterisatie eenheid wordt gebruikt voor het afleveren 2,5 W aan het blootgestelde uiteinde van de draad, wegbranden extracellulaire lagen en het verstrekken van bevestiging sites voor carcinoom cellen die in suspensie geleverd aan de blaas door middel van een latere catheterisatie. Cellen blijven in de blaas gedurende 90 minuten, waarna de katheters zijn verwijderd en de blaas op natuurlijke wijze af te voeren. De ontwikkeling van de tumor wordt bewaakt via een echografie. Specifieke aandacht wordt besteed aan de catheterisatie techniek in de bijbehorende video.
Protocol
Discussion
Deze minimaal invasieve methode voor de vaststelling orthotope blaas tumoren in vrouwelijke muizen kan ook worden toegepast voor celtypes andere dan de MB49, hoewel verschillende resultaten moeten worden verwacht. Als er minder agressieve tumorcellen worden gebruikt, zal het verhogen van de wattage licht (met behulp van 0,5 W stappen naar de nieuwe optimale stand) leveren een oppervlakte van meer vatbaar zijn voor tumorcellen gehechtheid, en langere blaas incubatietijden voor de bijgebracht cellen zullen een grotere hoe…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dit werk werd gefinancierd door de National Science Foundation LOOPBAAN award (cbet-0846395) en de Vakgroep Vergelijkende Geneeskunde, Tulane University.
Materials
| Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| C57Bl/6J mice | Jackson Laboratories | 000664 | 3-5-wk-old | |
| Polycarbonate cages and ventilated rack | Lab Products | Super Mouse 750 | 327mm x 190mm x 143mm |
|
| Hardwood Bedding | Harlan Teklad | Laboratory –grade SaniChips | ||
| Rodent diet | Harlan Teklad | Rodent Diet 2019 | ||
| IV Catheter | MWI | 009231 | 24 G x ¾ in. | |
| Electrocautery unit | Bovie Medical Corporation | Aaron 900 | ||
| Ultrasound unit | Sonosite | 180 Plus (Vet) | ||
| MB49 cell line | Anthony Atala, Wake Forest University Baptist Medical Center | N.A. | ||
| DMEM | Invitrogen | 21063-029 | ||
| Fetal Bovine Serum | Gemini Bio-Products | 100106 500A57B | ||
| Penicillin-Streptomycin | Invitrogen | 15140-163 |
Referenzen
- Institute of Laboratory Animal Resources. . Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (1996).
- Gunther, J. H., Jurczok, A., Wulf, T., Brandau, S., Deinert, I., Jocham, D. Optimizing syngeneic orthotopic murine bladder cancer (MB49). Cancer Res. 59, 2834-2837 (1999).
- Zhang, X., Atala, A., Godbey, W. T. Expression-targeted gene therapy for the treatment of transitional cell carcinoma. Cancer Gene Ther. 15, 543-552 (2008).
