Summary

Windowing куриные яйца целях развития исследований

Published: October 01, 2007
doi:

Summary

Легкость доступа к эмбрион позволило эксперименты по карте ячейки судьбы, используя несколько подходов, в том числе куриных перепела химеры и координационные маркировке краской. В этой статье мы показываем, одно яйцо подготовки метод, который был оптимизирован в течение долгого времени выживания.

Abstract

Изучение развития был значительно способствовало использование куриного эмбриона в качестве экспериментальной модели. Легкость доступа к эмбрион позволило эксперименты по карте ячейки судьбы, используя несколько подходов, в том числе куриных перепела химеры и координационные маркировке краской. Кроме того, оно позволяет для молекулярных возмущения нескольких типов, в том числе размещение белка покрытием бисером и введение плазмидной ДНК с использованием в ово электропорации. Эти эксперименты были получены важные данные о развитии центральной и периферической нервной систем. Для многих из этих исследований, необходимо, чтобы открыть яичной скорлупы и повторного его, не возмущающие роста эмбриона. Эмбриона могут быть рассмотрены на последующих стадиях развития путем повторного открытия яичной скорлупы. Хотя Есть несколько отличных методов для открытия куриных яиц, в этой статье мы покажем один метод, который был оптимизирован в течение долгого времени выживания. В этом методе, яйцо лежит на боку и маленькое окошко режется в оболочке. После экспериментальной процедуры, оболочка используется для покрытия яйца в течение всего срока его развития. Прозрачная пластиковая лента вышележащих яичная скорлупа защищает эмбрион и помогает сохранить увлажнение в течение оставшейся части инкубационного периода. Этот метод был использован, начиная с двух дней инкубации и позволило выживание через зрелые эмбриональных возрастов.

Protocol

1. Удалить яйца из инкубатора Поддерживать при 37 ° С при относительной влажности установлен выше 60%. Удалить яйца; свою очередь, яйца 90 ° так, чтобы большая база лежит горизонтально. 2. Тампон яйца для стерилизации Пропитайте стек нестерильных марлевых с…

Discussion

Этот метод позволяет в течение долгого времени выживания следующих экспериментальных манипуляций. Например, краска маркировки исследования позволили выживание E10 или поздно в исследование судьбы отображения (1). Кроме того, он был использован для исследований в ово электропорации, которые обесп?…

Materials

Material Name Typ Company Catalogue Number Comment
Rotating incubator   Profi   Maintain at 37° Degrees with relative humidity set above 60%
70 % EtOH        
gauze        
3M plastic tape        
10cc syringe       1/egg
18G needles       1½ inch needle, 1/syringe
Dissection scissors       4″ sharp straight blades
Fertilized Eggs        
.

Referenzen

  1. Cramer, K. S., Fraser, S. E., Rubel, E. W. . Dev Biol. 224, 138-151 (2000).
  2. Cramer, K. S., Bermingham-McDonogh, O., Krull, C. E., Rubel, E. W. . Dev Biol. 269, 26-35 (2004).
  3. Cramer, K. S., Cerretti, D. P., Siddiqui, S. A. . Dev Biol. 295, 76-89 (2006).
  4. Huffman, K. J., Cramer, K. S. . Dev Neurobiol. 67, 1655-1668 (2007).
  5. Krull, C. E. . Dev Dyn. 229, 433-439 (2004).
  6. Gerlach-Bank, L. M., Cleveland, A. R., Barald, K. F. . Dev Dyn. 229, 219-230 (2004).

Play Video

Diesen Artikel zitieren
J. Korn, M., S. Cramer, K. Windowing Chicken Eggs for Developmental Studies. J. Vis. Exp. (8), e306, doi:10.3791/306 (2007).

View Video