La leishmaniasis cutánea en la piel dorsal de los hámsteres: un modelo útil para la selección de fármacos antileishmania
Summary
Optimización del modelo de hámster experimental para la leishmaniasis cutánea por inyección intradérmica de<em> Leishmania</em> Promastigotos en la piel dorsal. Este enfoque es útil durante la inoculación, el seguimiento, la caracterización de las lesiones, la aplicación de los tratamientos y la obtención de muestras clínicas. Locomotion, la búsqueda de comida y agua, actividades lúdicas y sociales se conservan.
Abstract
Tradicionalmente, los hámsters son inoculados experimentalmente en el hocico o la pata de la. Sin embargo, en estos sitios no siempre se produce una úlcera, la medición del tamaño de la lesión es un procedimiento difícil y animales presentan dificultad para comer, respirar y moverse a causa de la lesión. Con el fin de optimizar el modelo de hámster de la leishmaniasis cutánea, hombre adulto joven y las mujeres hámsters dorados (Mesocricetus auratus) se inyecta por vía intradérmica en la piel dorsal con 1 a 1,5 x l0 7 promastigotes de las especies de Leishmania y la progresión de las lesiones posteriores fueron evaluados durante un máximo de 16 semanas después de la infección. El hámster dorado fue elegido porque se considera adecuada la bio-modelo para evaluar los medicamentos contra la Leishmania, ya que son susceptibles a la infección por diferentes especies. La infección cutánea de los resultados de hámsters en las lesiones crónicas, pero controlada, y una evolución clínica con signos similares a los observados en seres humanos. Por lo tanto, el establecimiento of el alcance de la infección mediante la medición del tamaño de la lesión de acuerdo con el área de induraciones y úlceras es factible. Este enfoque ha demostrado su versatilidad y fácil manejo durante la inoculación, el seguimiento y la caracterización de las lesiones típicas (úlceras), la aplicación de tratamientos a través de diferentes maneras y la obtención de muestras clínicas después de los tratamientos diferentes. Mediante el uso de este método, la calidad de vida de los animales en relación con la locomoción, la búsqueda de alimentos y el agua, el juego y las actividades sociales también se conserva.
Protocol
Discussion
La leishmaniasis cutánea es endémica en los trópicos y el Neotrópico. Se refiere a menudo como un grupo de enfermedades debido a la variada gama de manifestaciones clínicas, que van desde pequeños nódulos cutáneos a la destrucción bruta tejido mucoso. Mayoría de los fármacos disponibles son costosas, requieren tratamientos largos de tratamiento y se están convirtiendo cada vez más ineficaz, lo que exige el descubrimiento de nuevos fármacos.
El modelo de ratón se utiliza amplia…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este estudio fue apoyado por becas de la Comisión de Investigación de la Universidad de Antioquia (CODI), el Instituto Colombiano para el Desarrollo de la Ciencia y la Tecnología – COLCIENCIAS y el Centro para el Desarrollo de Productos contra las Enfermedades Tropicales – CIDEPRO.
Materials
| Name of the reagent | Typ | Company | Catalogue number |
| Ketamine | Reagent | Holliday –Scott S.A | |
| Xilacine | Reagent | Synthesis | |
| PBS | Reagent | GIBCO | 14190-136 |
| Digital caliper | Equipment | Fisher | 15-077-958 |
| Giemsa | Reagent | SIGMA | GS1L-1L |
| Formalin | Reagent | Nova lab | 11273 |
| Paraffin | Reagent | Pechiney Plastic Packaging | PM-996 |
| Haemotoxilin | Reagent | Nova lab | 10870103 |
| Eosin | Nova lab | 10870203 | |
| Kodak Ektachem dry chemistry | Equipment | Kodak Ektachem | DT-60 |
| meglumine antimoniate | Reagent | Aventis | |
| Microscopy | Equipment | Nikon | YS2-T |
Referenzen
- WHO. Control of the leishmaniasis. Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO. 949, (2010).
- Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice. Parasite Immunol. 7, 545-555 (1985).
- Reynolds, K. M. The Kodak Ektachem dry layer technology for clinical chemistry. Upsala. J. Med. Sci. 91, 143-146 (1986).
- Handman, E., Ceredig, R., Mitchell, G. F. Murine cutaneous leishmaniasis: disease patterns in intact and nude mice of various genotypes and examination of some differences between normal and infected macrophages. Australian J. Exp. Biol. Med. Sci. 57, 9-29 (1979).
- Hanson, W., Chapman, W., Waits, V., Lovelace, J. Development of Leishmania (Viannia) panamensis lesions and relationship of numbers of amastigotes to lesion area antimony-treated and untreated hamsters. J. Parasitol. 77, 780-783 (1991).
- Henao, H. H., Osorio, Y., Saravia, N. G., Gómez, A., Travi, B. Efficacy and toxicity of pentavalentantimonials (Glucantime and Pentostam) in an American cutaneous leishmaniasis animal model: luminometry application. Biomédica. 24, 393-402 (2004).
- Travi, B. L., Martinez, J. E., Zea, A. Antimonial treatment of hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis: assessment of parasitological cure with different therapeutic schedules. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 87, 567-569 (1993).
- Hommel, M., jaffe, C. L., Travi, B., Milon, G. Experimental models for leishmaniasis and for testing anti-leishmanial vaccines. Ann. Trop. Med. Parasitol. 89, 55-73 (1995).
- Travi, B. L., Osorio, Y., Saravia, N. G. The inflammatory response promotes cutaneous metastasis in hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis. J. Parasitol. 82, 454-457 (1996).
- Travi, B. L., Osorio, Y. Failure of Albendazole as an alternative treatment of cutaneous Leishmaniasis in the hamster model. Memorias Instituto Oswaldo. 93, 515 (1998).
- Travi, B. L., Osorio, Y., Melby, P. C., Chandrasekar, B., Arteaga, L., Saravia, N. G. Gender is a major determinant of the clinical evolution and immune response in hamsters infected with Leishmania spp. Infect Immun. 70, 2288-2296 (2002).
- Osorio, Y., Melby, P. C., Pirmez, C., Chandrasekar, B., Guarín, N., Travi, B. L. The site of cutaneous infection influences the immunological response and clinical outcome of hamsters infected with Leishmania panamensis. Parasite Immunol. 25, 139-148 (2003).
- Osorio, Y., Bonilla, D. L., Peniche, A. G., Melby, P. C., Travi, B. L. Pregnancy enhances the innate immune response in experimental cutaneous leishmaniasis through hormone-modulated nitric oxide production. J. Leukoc. Biol. 83, 1413-1422 (2008).
- Espitia, C. M., Zhao, W., Saldarriaga, O., Osorio, Y., Harrison, L. M., Cappello, M., Travi, B. L., Melby, P. C. Duplex real-time reverse transcriptase PCR to determine cytokine mRNA expression in a hamster model of New World cutaneous leishmaniasis. BMC Immunol. 22, 11-31 (2010).
