Summary

Human artère mammaire interne (IMA) à la transplantation et stenting: un modèle humain pour étudier le développement de la resténose intra-stent

Published: May 09, 2012
doi:

Summary

Cette vidéo montre un modèle pour étudier le développement de l'hyperplasie intimale après le déploiement du stent aide d'un vaisseau humain (IMA) dans un modèle de rat immunodéprimé.

Abstract

Préclinique in vivo dans des modèles de recherche pour étudier les processus pathobiologiques et physiopathologiques dans le développement de l'hyperplasie intimale après stenting navire sont cruciales pour 1,2 approches de translation.

Les modèles animaux utilisés couramment comprennent les souris, les rats, les lapins et les cochons 3-5. Cependant, la traduction de ces modèles dans des milieux cliniques reste difficile, étant donné que ces processus biologiques sont déjà étudié dans les vaisseaux des animaux, mais jamais réalisée auparavant dans des modèles de recherche de l'homme 6,7. Dans cette vidéo, nous démontrons un nouveau modèle humanisé de combler cette lacune en translation. La procédure indiquée est reproductible, facile et rapide à réaliser et est adapté pour étudier le développement de l'hyperplasie intimale et l'applicabilité des stents diverses.

Cette vidéo montre comment effectuer la technique stent dans les vaisseaux de l'homme suivie d'une greffe chez des rats immunodéprimés, etidentifie l'origine des cellules proliférantes comme des humains.

Protocol

1. L'artère mammaire interne (IMA) Préparation L'endothélium artériel est dénudée par le passage d'un cathéter 2-françaises Fogarty embolectomie artérielle (Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA). Le cathéter est tiré à travers toute la longueur du navire à deux reprises pour assurer la lésion de l'endothélium. Utilisez n'importe quel stent humaine de la longueur de 8mm et 2,5 mm à 3 mm de diamètre (par exemple Translumina, Yukon stent). ATTENTION: Le diamètre d…

Discussion

Bien que différents dans des modèles in vivo de recherche sont en vigueur pour enquêter sur le développement de l'hyperplasie intimale après pose de stent, ces modèles sont encore face à des obstacles à surmonter traductionnelles. En outre, les modèles animaux de grande taille sont les conditions de logement coûteux et spéciaux ainsi que du matériel chirurgical n'est pas disponible pour tous les laboratoires.

L'utilisation d'un IMA humain pour é…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Les auteurs tiennent à remercier Christiane Pahrmann pour sa contribution. Un merci spécial à Ethicon, Norderstedt, Hambourg (Allemagne) pour fournir du matériel de suture.

Financement

Sonja Schrepfer a reçu une subvention de recherche de la Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 et SCHR992/4-1).] Le travail a été soutenu par le développement de carrière ISHLT Shumway Grant 2010 et la recherche de financement Falk (Université de Stanford).

Materials

Name of the reagent Company Catalog number Comments
2 French Fogarty catheter Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA 120602F  
Yukon Stent Translumina GmbH, Hechingen, Germany   Use the stent of your choice according to your study protocol
RPMI media Biochrom Nr.F1275  
heparin Baxter 2B0953  
isoflurane Abbot B506  
Provo-Iodine Betadine Puredue Pharma EAN:5995327165830  
80% ethanol Geyer ETV 80/0500  
Micro clamp Harvard Apparatus PY2-61-0186  
Sutures 8-0 Johnson& Johnson, 2808G  
Sutures 6-0 Johnson& Johnson, 1698 H  
Carprofen Feizer Vet PZN:0110208  
Metamizol Ratiopharm    
Target retrieval solution, pH9 Dako S2368  
Image-iT FX signal enhancer Invitrogen I36933  
mouse monoclonal anti-GFP antibody BD living colors 632381  
primary antibody diluent Dako S3022  
goat-anti-mouse IgG, Alexa Fluor 488 Invitrogen A11017  
secondary antibody diluent Dako S0809  
rabbit polycolonal anti-smooth muscle α-actin Abcam, ab5694  
goat-anti-rabbit IgG, Alexa Fluor 555 Invitrogen A21430  
Prolong Gold antifade reagent Invitrogen P36930  

Referenzen

  1. Deuse, T., Ikeno, F., Robbins, R. C., Schrepfer, S. Imaging In-Stent Restenosis: An Inexpensive, Reliable, and Rapid Preclinical Model. J. Vis. Exp. (31), e1346 (2009).
  2. Oyamada, S. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis. J. Surg. Res. 166, e91-e95 (2011).
  3. Chamberlain, J. A novel mouse model of in situ stenting. Cardiovascular research. 85, 38-44 (2010).
  4. Deuse, T. Introducing the first polymer-free leflunomide eluting stent. Atherosclerosis. 200, 126-134 (2008).
  5. Finn, A. V. Differential healing after sirolimus, paclitaxel, and bare metal stent placement in combination with peroxisome proliferator-activator receptor gamma agonists: requirement for mTOR/Akt2 in PPARgamma activation. Circulation research. 105, 1003-1012 (2009).
  6. Tellez, A. Coronary bare metal stent implantation in homozygous LDL receptor deficient swine induces a neointimal formation pattern similar to humans. Atherosclerosis. 213, 518-524 (2010).
  7. Suzuki, Y., Yeung, A. C., Ikeno, F. The pre-clinical animal model in the translational research of interventional cardiology. JACC Cardiovasc. Interv. 2, 373-383 (2009).
  8. Holt, C. M. Intimal proliferation in an organ culture of human internal mammary artery. Cardiovascular research. 26, 1189-1194 (1992).
  9. Swanson, N., Javed, Q., Hogrefe, K., Gershlick, A. Human internal mammary artery organ culture model of coronary stenting: a novel investigation of smooth muscle cell response to drug-eluting stents. Clin. Sci. (Lond). 103, 347-353 (2002).

Play Video

Diesen Artikel zitieren
Hua, X., Deuse, T., Michelakis, E. D., Haromy, A., Tsao, P. S., Maegdefessel, L., Erben, R. G., Bergow, C., Behnisch, B. B., Reichenspurner, H., Robbins, R. C., Schrepfer, S. Human Internal Mammary Artery (IMA) Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis. J. Vis. Exp. (63), e3663, doi:10.3791/3663 (2012).

View Video