Batrachochytrium dendrobatidis Infektion bei Amphibien können mit einer reduzierten Konzentration (0,0025%) und kürzere Laufzeit (5 Minuten Bäder für sechs Tage) von Itraconazol als allgemein verwendet, beseitigt werden. Weniger Sterblichkeit und weniger negative Nebenwirkungen wurden unter Verwendung dieser modifizierten Behandlungsprotokoll beobachtet.
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Methodenartikel
Reduzierte Itraconazol Konzentration und Dauer sind erfolgreich in der Behandlung von
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Amphibien sind die mit den größten Rückgang aller Wirbeltierklasse und eine führende Ursache für diesen Rückgang ist eine Pilzerreger, Batrachochytrium dendrobatidis (Bd), die die Krankheit verursacht chytridiomycosis. Captive Sicherung Kolonien sind wichtig, weltweit für bedrohte Amphibienarten und möglicherweise die einzige Lebensader für die in kritischen vom Aussterben bedroht sein. Die Aufrechterhaltung Krankheit frei Kolonien ist eine Priorität der Gefangenschaft Manager, noch sichere und wirksame Behandlungen für alle Arten und über Lebensphasen nicht identifiziert worden. Die am häufigsten verwendeten chemotherapeutischen Behandlung ist Itraconazol, obwohl die Dosierung üblicherweise verwendeten schädlich für einige Individuen und Arten sein. Wir führten eine Behandlung klinische Studie zu beurteilen, ob eine untere und sicherer, aber effektive Dosis von Itraconazol gefunden werden konnte Bd-Infektionen zu heilen. Wir fanden, dass durch die Reduzierung der Behandlungskonzentration von 0,01 bis 0,0025%, und die Verringerung der Behandlungsdauer von 11-6 Tage von 5 min Bäder, könnten Frösche von Bd-Infektion mit weniger Nebenwirkungen und weniger therapieassoziierte Mortalität geheilt werden.
Einleitung
Amphibien erleben derzeit den größten Rückgang der biologischen Vielfalt aller Wirbeltier-Taxa ein. Chytridiomykose, eine Hautkrankheit, die durch den chytrid Pilzpathogen Batrachochytrium dendrobatidis (Bd) verursacht wird, ist eine der Hauptursachen für diesen dramatischen Rückgang Bd 2 ist der schlimmste Erreger auf Rekord für verursachen Verlust der biologischen Vielfalt:. Infiziert es über 600 Arten von Amphibien und hat verursachten Rückgänge in über 300 Arten, von denen mehr als 200 Arten sind vom Aussterben bedrohte oder ausgestorbene 2,3. Die Amphibien-Chytridpilz nicht wirtsspezifisch und es ist unklar, wel....
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Protokoll
Ethik-Zulassung: Diese Studie und ihre Methoden wurden von Tier Benutzung und Pflege Ausschuss Tulane University (. Protokoll nicht 0407) zugelassen.
1. Testen für Bd-Infektion
- Abtupfen für Bd
- Tupfer Tiere mit einem sterilen Wattestäbchen fünfmal am ventrum fünfmal auf jedem Schenkel, jeder Seite, und jedes Glied für insgesamt 45 Hüben. Swabbing ist eine nichtinvasive Methode der Probenahme für Bd auf Amphibienhaut.
- Den Tupfer während und zwischen den Hüben drehen vorsichtig, um die größte Menge an DNA wird auf dem Tupfer gesammelt.
- Shop Tupfer in 1,5-ml-R....
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Ergebnisse
Itraconazol-Behandlung wurde als erfolgreich, wenn alle Tiere waren vier Wochen nach Ende der Behandlung Bd-negativ. Vor der Behandlung begonnen, zwei Wochen nach der Impfung alle Bd-geimpften Tiere infiziert waren, mit einer mittleren Belastung von 1.121,7 Zoosporen (± 17,34), während vier Wochen nach Ende der Behandlung eine mittlere Belastung von Zoosporen 16,765.12 hatten die Bd-positiven Kontrolltiere ( ± 14.643,08).
Die Behandlung von Incilius nebulifer
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Diskussion
Über dieses Protokoll konnten wir sicher und effektiv reduzieren die Behandlungsdosis und Zeit von Itraconazol-Behandlung für Bd bei Amphibien. Die niedrigste Behandlungsdosis und Zeit (0,0025% für sechs Tage) war eine erfolgreiche Behandlung für subklinisch infiziert I. nebulifer. Die Wirksamkeit von sowohl einer niedrigeren Dosis und Behandlungsdauer zeigen die Notwendigkeit für klinische Therapiestudien für Bd-Infektion Behandlungen, da gibt es noch keine sichere und wirksame Behandlungen f.......
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Offenlegungen
Der Autor erklärt keine konkurrierenden finanziellen Interessen.
Danksagungen
Ich möchte CL-Richards Zawacki für Hilfe danken Konzeption der Versuchsplanung und die Unterstützung mit Materialien, A. Pessier Hilfe Festlegung eines Behandlungsschema und die Sektionsanalysen, MWH Chatfield, MJ Robak, K. und D. Tasker Lenger für die Hilfe in der Labor-und Support und McFadden M. und P. Harlow am Taronga Zoo für die Nutzung ihrer Speicher während der Dreharbeiten. Das Projekt wurde teilweise durch Louisiana Department of Wildlife and Fisheries durch die Louisiana Environmental Education Zuschuss der Kommission nach LA Brannelly ausgezeichnet und von Life Technologies finanziert.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| 0,1 % wässriges Itraconazol, Sporonox | Janssen Pharmaceutica Inc. | ||
| NaCl | Fisher Scientific | S640-500 | |
| KCl | Fisher Scientific | BP366-1 | |
| CaCl2 | Fisher Scientific | BP510-100 | |
| NaHCO3 | Fisher | Scientific BP328-500 | |
| Sterile Wattestäbchen | - und Drahtgeräte | MW113 | |
| 1,5 ml Mikroröhrchen | Sarstedt | 73.703.217 | |
| Qiagen DNEasy Blut- und Gewebekit | Qiagen | 69581 | |
| 7500 Real-time PCR | Applied Biosystems | 4351104 | |
| VIC IPC | Applied Biosystems | 4308323 | |
| BSA | Applied Biosystems | AM2618 | |
| Agar | Invitrogen | 30391023 | |
| Trypton | Invitrogen | Q10029 | |
| Penicillin-Streptomycin | Invitrogen | 15070-063 | |
| Petrischale | Sigma Aldrich | CLS430589 |
Referenzen
- Stuart, S. N., et al. Status and trends of amphibian declines and extinctions worldwide. Science. 306 (5702), 1783-1786 (2004).
- Skerratt, L. F., et al. Spread of chytridiomycosis has caused the rapid global decline and extinction of frogs. EcoHealt....
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Nachdrucke und Genehmigungen
