We present a surgical procedure to catheterize the intestinal lymph trunk in neonatal pigs to collect large quantities of lipid metabolism components from efferent lymph.
Catheterization of the intestinal lymph trunk in neonatal pigs is a technique allowing for the long-term collection of large quantities of intestinal (central) efferent lymph. Importantly, the collection of central lymph from the intestine enables researchers to study both the mechanisms and lipid constitutes associated with lipid metabolism, intestinal inflammation and cancer metastasis, as well as cells involved in immune function and immunosurveillance. A ventral mid-line surgical approach permits excellent surgical exposure to the cranial abdomen and relatively easy access to the intestinal lymph trunk vessel that lies near the pancreas and the right ventral segment of the portal vein underneath the visceral aspect of the right liver lobe. The vessel is meticulously dissected and released from the surrounding fascia and then dilated with sutures allowing for insertion and subsequent securing of the catheter into the vessel. The catheter is exteriorized and approximately 1 L/24 hr of lymph is collected over a 7 day period. While this technique enables the collection of large quantities of central lymph over an extended period of time, the success depends on careful surgical dissection, tissue handling and close attention to proper surgical technique. This is particularly important with surgeries in young animals as the lymph vessels can easily tear, potentially leading to surgical and experimental failure. The video demonstrates an excellent surgical technique for the collection of intestinal lymph.
Le système lymphatique est un domaine peu étudié la physiologie. Modèles précliniques de cathétérisme lymphatique se produisent dans différentes espèces animales 1-8 et sont utilisés par les industries pharmaceutiques et les institutions de recherche pour étudier les mécanismes impliqués dans les lipides 8-12 et le métabolisme des médicaments 13-15, les métastases du cancer 16 avec traitement expérimental 17, et la fonction immunitaire 18 -26. Cette étude examine l'utilisation de l'intestin lymphatique tronc cathétérisme dans un modèle de porc domestique pour mesurer les composants du métabolisme des lipoprotéines. le métabolisme des lipoprotéines est impliquée dans la production et la sécrétion des chylomicrons, ainsi que des changements dans les lipides et les protéines associées au total. Ces considérations sont importantes car il y a de grandes différences dans le métabolisme des lipides entre les modèles et les humains de rongeurs couramment utilisés et en tant que tels, en utilisant des modèles de porcs pour recueillir la lymphe intestinale pourrait fournir des informations plus comparables pour l'étude des lipides metabolism chez les personnes 27-31.
Plusieurs techniques chirurgicales sont utilisées pour recueillir la lymphe intestinale chez les grandes espèces animales: une approche de l' épaule crânienne (c. -à- thoracique cathétérisme conduit) 5, une approche latérale de flanc supérieur 32-34, et une ligne médiane ventrale ou approche paramédiane 22,35. Cette vidéo décrit en détail la procédure chirurgicale chez le porc en utilisant une approche chirurgicale de la ligne médiane ventrale pour le cathétérisme de la lymphe tronc intestinal. Careful permis de technique chirurgicale cette méthode de cathétérisme lymphatique pour recueillir de grandes quantités de la lymphe et de ses constituants sur des périodes de temps prolongées.
Cette technique ouvre une myriade d'applications à de nombreuses disciplines qui examinent diverses fonctions physiologiques. Les applications peuvent comprendre, mais sans s'y limiter, la lipoprotéine du corps entier et le métabolisme des lipides, immunosurveillance, la genèse des tumeurs et les métastases, la fonction intestinale, et la perfectionnement et la progression de la maladie inflammatoire intestinale.
La collecte de la lymphe intestinale est une excellente méthode pour étudier les mécanismes impliqués dans les lipides 8-12 et 13-15 médicament métabolisme, les métastases du cancer 16,17, le trafic cellulaire et la fonction immunitaire 18-26, dans divers modèles animaux expérimentaux. En effet, la capacité de récolter de grandes quantités d' une ou l' autre périphérique (afférences) et centrale (efférente et les gros vaisseaux du tronc) lymphe sur une …
The authors have nothing to disclose.
The work was supported in part by funding from Alberta Livestock and Meat Agency and Natural Science and Research Council Discovery grant to S. D. Proctor.
Miller laryngoscope blade | Welch Allyn | 68044 | 182 mm length |
Surgivet advisor: Vital signs monitor | Surgivet | V9203 | |
Rectal temperature probe | Surgivet | V3417 | |
Mono-polar electrosurgery generator | Valley Lab | ||
Metzenbaum scissors | Fine Science | 14518-18 | |
Tuffier retractor | Stevens | 162-11-676 | |
Mosquito forceps | Stevens | 162-7-10 | |
Kelly forceps-curved (14cm) | Stevens | 162-7-38 | |
Allis tissue forceps | Stevens | 162-7-38 | |
Forceps dressing-eye (10.2cm) | Stevens | 162-18-780 | |
Forceps dressing-Adison (12.1cm) | Stevens | 162-17-2510 | |
Needle Drivers | Stevens | 162-V98-42 | |
Iris scissors | Fine science | 14058-11 | |
Circulating water pump | Jorvet | J-783X | |
Maxitherm-Vinyl blanket | Jorvet | J-784C | |
Q tip applicators | Fisher Scientific | 22-037-960 | |
Catheterization tubing (4.06 OD X 2.31 ID) | Braintree Scientific Inc. | MRE-160 | Micro-Renethane implantation tubing |
2-0 silk suture | Ethicon | LA556 | |
2-0 polyglactin suture | Ethicon | J443H | 2-0 vicryl |
Large animal jacket | Lomir Biomedical Inc. | SSJ2YC | |
Polypropylene wash bottles | Fisher Scientific | 03-409-22C | 500 ml |
Penicillin-Streptomycin | Sigma Aldrich | D4333 | |
EDTA | Sigma Aldrich | 60-00-4 | |
Amphotericin B | Sigma Aldrich | A2411 | |
Azaperone | Elanco Animal Health | Stresnil | |
Dexmedetomidine hydrochloride | Zoetis | 6295 | Dexdomitor |
Isoflurane | Abbott Animal Health | 05260-5 | IsoFlo |
Ketamine hydrochloride | Zoetis | 2626 | Ketaset |
Bupenorphine hydrochloride | Champion Alstoe Animal Health | DIN:02347510 | |
6 mm Endotracheal tube | Jorvet | J-165d | |
10% Lidocaine spray | AstraZeneca | DIN:02003767 | |
4 % Chlorhexidine surgical scrub | Partnar Animal Health | PCH-011 | Diluted: 2.0% solution |
3M Surgical steri- drape | 3M Health Care | 1040 | |
SDS page gel | Invitrogen | EA0375BOX | 3-8 % tris acetate |
Polyvinylidene fluoride membrane | Millipore | IPVH00010 | 0.45 μm pore size |
ApoB antibody | EMD Millipore | AB742 | 1:4000 dilution |
Donkey anti-goat IgG-HRP | Santa Cruz Biotechnology | Sc-2304 | |
ECL Prime Western Blotting Reagent | GE Healthcare LifeSciences | RPN2232 | |
Triglyceride Kit | Wako Pure Chemicals | 998-40391/994-40491 | |
Total Cholesterol Kit | Wako Pure Chemicals | 439-17501 | |
Total Protein | Pierce | 23225 | Bicinchoninic Acid Assay |