Summary

드라이 비-침략 적 멀티 채널을 사용 하 여 마우스에 비주얼 갖는 잠재적인 녹음 두 피 뇌 파 센서

Published: January 12, 2018
doi:

Summary

우리는 비-침략 적, 변형, 그리고 재사용 가능한 드라이 타입 16 채널 EEG 센서를 설계. 이 종이 생산 신호 비주얼 갖는 잠재력 (VEP)의 처리를 제안 된 뇌 파 전극 건조 비-침략 적 다중 채널 EEG 센서를 사용 하 여 마우스 두 피 측정 신호 전체 프로세스를 설명 합니다.

Abstract

실험실 쥐와 두 피 뇌 파 연구 환경, 우리는 플런저 스프링 배럴 구조 면과 금속에서 발생 하는 기계적 힘 때문에 비-침략 적, 변형, 그리고 다시 사용할 수 있는 드라이 타입 16 채널 EEG 센서 설계 재료입니다. VEP 응답에는 vivo에서 마우스에서 획득을 위한 전체 프로세스 4 단계로 구성 됩니다: (1) 센서 어셈블리, (2) 동물 준비, VEP (3) 측정, 및 (4) 신호 처리. 이 종이 VEP 응답 submicro 전압 신호 해상도와 여러 생쥐에서의 대표적인 측정와 하위 수백 밀리초 시간 해상도 제공합니다. 제안된 된 방법에 비해 더 편리 하 고 안전은 이전에 보고 된 다른 동물 뇌 파 인수 방법, 신호 대 잡음 비율을 강화 하는 방법을 자유롭게 동물 이동로이 기술을 적용 하는 방법 등의 문제 남아 있다. 제안된 된 방법 쉽게 사용 가능한 리소스를 활용 하 고 만족 스러운 신호 품질 반복적인 VEP 응답을 보여 줍니다. 따라서,이 메서드 경도 실험 연구 및 비-침략 적 패러다임을 이용 하는 믿을 수 있는 변환 연구 활용 될 수 있습니다.

Introduction

치 매 퇴행 성 뇌 질환 환자 수가 치 매, 알츠하이머병, Parkinsonian 증후군, 그리고 스트로크는 노후화 인구와 증가 수명 증가 같은이 질병의 장기 사회 부담이 또한1,2,3증가. 또한, 정신 분열 증, 자폐증, 등 대부분 neurodevelopmental 질병, 인지 및 행동 장애 환자의 인생2,,34에 영향을 함께 제공 됩니다. 이러한 이유로, 연구원은 진단, 예방, 병 적인 이해, 장기 관측 및 뇌 질환의 치료를 개선 하기 위해 고군분투 하고있다. 그러나, 문제가 남아 두뇌의 복잡성과 한다 질병 병 리에서 형태소 분석. 변환 연구 기초 연구는 짧은 시간 내, 저렴 한 비용, 그리고 신경 과학 분야5 에서에서 높은 성공률 임상 응용 프로그램 전송 수 있기 때문에 솔루션을 식별 하는 데 유망한 도구가 될 수 있습니다. 6,7. 변환 연구의 또 다른 목표는 인 간에 대 한 동일한 방법에 대 한 비교를 허용 하는 동물에 비-침략 적 실험 방법 인간 주제에 적용을 살펴보는 것입니다. 이러한 조건이 비-침략 적 동물 준비 방법 개발에 대 한 여러 가지 중요 한 요구를 끌고있다. 한 가지 방법은 electroencephalography (뇌 파)는 대뇌 피 질의 뇌 연결 및 활동 높은 시간 분해능으로 2 차원적으로 계시 하 고는 비-침략 적 프로토콜에서 혜택입니다. 이벤트와 관련 된 잠재적인 기록 (ERP) 뇌 파를 활용 하는 전형적인 실험 패러다임 중 하나입니다.

수많은 이전 연구 고용된 비-침략 적 뇌 파 방법 침략 적 방법와 같은 임 플 란 트 나사와 극 형식 전극, 반면 인간 주제를 대상으로 동물 연구8,,910 에서 사용 된 , 11 , 12. 신호 품질과 이러한 메서드의 특성은 센서 배치의 침입에 크게 의존. 대 한 성공적인 변환 연구, 인간의 연구13에 사용한 것과 동물 연구에 대 한 동일한 조건을 사용 하 여 강조 하는 가너. 그러나 동물을 사용 하 여 기본 연구,, 비-침략 적 뇌 파 방법론 되어 있습니다 하지. 실험실 쥐에 초점을 맞추고 비-침략 적 두 피 뇌 파 센서 시스템을 사용 하 여 새로운 접근 방식을 인 간에 대 한 비-침략 적 패러다임에 적용 될 수 있는 변환 연구에 대 한 안정적이 고 효율적인 도구 것입니다.

다 수의 마우스 뇌 파 연구의 PCB의 상용화 방법을 이끄는 (인쇄 회로 기판) 기반 멀티 채널 전극14,,1516. 그들은 침략 적 방법을 채택, 그들은 채널 (3-8), 대규모 두뇌 역학 관찰 하기 어렵게 만든 수가 제한 했다. 또한, 응용 프로그램 그들의 침입 및 높은 비용에 의해 제한 될 수 있습니다. 또 다른 연구, KIST (한국 과학 및 기술) 40 채널 구체의 기반 박막 전극 개발 하 고 마우스의 두개골17,,1819,20에 그것을 연결 . 이 작품 인수 마우스 뇌 파 채널의 가장 높은 번호. 그러나 그것은,, 기계적으로 약하고 쉽게 재사용; 따라서, 선도 약화 신호를 가능 하 게 한 면역 반응에 의해 발생 하는 장기 관측에 적합 했다. 한편, Troncoso 및 Mégevand 획득 감각 evoked 가능성 (9 월) 설치류의 두개골에 천공된 (PMMA, 아크릴 유리) Poly(methyl methacrylate) 그리드21,22 에 의해 보안 32 스테인리스 전극 , 23. 그들의 높은 신호 품질에도 불구 하 고 전극은 기계적으로 유연 하 고 부드러운; 따라서, 그들은 여러 실험에 적용 되 고 어려움을 했다. 또한,이 방법은 여전히 최소한 침략 적 이었다. 이러한 방법은 좋은 신호 품질을 제공 하지만 마우스의 두개골의 표면적이 제한, 따라서 전극의 수는 스테인리스 극 형 전극 사용 하 여 제한. 마우스에 대 한 이전 뇌 파 연구의 숫자 몇 가지 제한 했다. 이 연구에서 우리는 비-침략 적 드라이 타입 멀티 채널 센서를 사용 하 여 전 임상 변환 연구에 적용 가능한 뇌 파 측정 하는 새로운 방법을 보여줍니다.

이전 동물 뇌 파 방법론 동물 준비, 침해, 높은 비용, 낭비, 및 약한 기계적 강도의 본질적인 복잡성을 포함의 한계를 극복 하기 위해 우리는 전시 하는 새로운 전극 개발 하고자 유연성, 건식 상태, 다중 채널 기능, 비-침해, 및 재사용. 다음 프로토콜에서 마우스 두 피 건조, 비-침략 적, 다중 채널 EEG 센서를 사용 하 여에 비주얼 갖는 잠재력 (VEP) 녹음을 측정 하는 과정을 설명 합니다. 이 방법은 따라서 공학 분야에서 동물 실험으로 진입 장벽을 낮추는 쉽게 사용할 수 있는 리소스를 사용 합니다.

Protocol

동물 관리 및 처리는 광주 과학 기술원 및 기술 (GIST)의 기관 지침에 따 랐 다. 참고: 한 마우스에서 vivo에서 에서 VEP 신호 획득을 위한 절차의 4 단계 구성: (1) 센서 어셈블리, (2) 동물 준비, VEP (3) 측정, 및 (4) 신호 처리. 1. 센서 어셈블리 한 비-침략 적 전극에 대 한 16 개의 핀을 준비 합니다.참고: 각 핀 형 전극의 세 부분으로 구성 됩니다: ?…

Representative Results

우리는 그림 2와 같이 11 쥐에서 VEP 응답의 앙상블 평균을 계산 합니다. 이 결과 자극 시간 0 s에 주어진 대로 후 자극 기간 (600 ms), 사전 자극 기간 (-300 ms)에서이 실험을 통해 얻은 VEP 응답을 보여 줍니다. 그것은 눈에 띄는 신호만 변동 (미만 300 ms) 자극, 신호 후 자극 기간 동안 꾸준히 안정화 하는 동안 후. 또한, 14 채널 유사한 형태학 및 패턴<sup class="…

Discussion

우리 첫째 복잡 한 수술 과정을 최소화 하 여 실용성을 우선 순위는 센서의 디자인에 집중. 변형 뇌 파 센서는 16 핀을 이루어져 있다: 녹음, 한 지상, 및 마지막 한 14 참조 전극. 각 전극 플런저-봄-배럴 구조, 그래서 그들은 곡선과 부드러운 마우스의 두 피에서 균일 하 고 안정적인 신호 수집을 용이 하 게 전극의 접촉면에 deformability를 적용 하는 있다. 동물의 복지를 고려 하 고 우리는 스프링 힘에…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 작품은 GIST 연구소 (GRI), 2017 년에서 GIST 제공한 교부 금을 통해 GIST-대학원생 연구 협업 프로젝트 부분에 지원 했다. 또한 연구 그랜트 (NRF-2016R1A2B4015381)의 국립 연구 재단 (NRF) (MEST), 한국 정부 및 한국 뇌 연구원 과학의 부, 정보 통신, 및 미래 투자를 통해 KBRI 연구 프로그램을 자금 지원 계획 (17-BR-04).

Materials

Ketamine 50 Inj. (Vial) Yuhan Ketamine HCl 57.68 mg
Zoletil 50 Inj. Virbac Tiletamina 125 mg/ Zolazepam 125 mg
Rompun 2% Inj. BAYER Xylazine hydrochloride 23.32mg/mL
Hycell solution 2% Samil Hydroxypropylmethylcellulose 20 mg
Puralube Vet Ointment 3.5 mg Pharmaderm
Saline solution Inj.  JW Pharmaceutical  NaCl 9 g/1000 mL
Veet Hair Removal Cream – Legs & Body – Sensitive Skin Reckitt Benckiser depilatory
Skins – Surgical Skin Marker Surgmed S-3000 STERILE – Multi-Tip Fine Marker with ruler and label set
Stainless Steel Micro Spatulas HEATHROW SCIENTIFIC HS15907  One Round Flat End, 2L x 5/16W"
cotton swap
Stereotaxic, Desktop Digi Single RWD Life Science 68025
Mouse Adapter RWD Life Science 68010
Ear Bar for Mouse Non-Rupture RWD Life Science 68306
Mitsar-EEG 202-24  MITSAR amplifier
EEGStudio EEG acquisition software MITSAR
White flash stimulator  MITSAR MITSAR Flash stimulator
BCI2000 software Schalk lab
g.USBamp g.tec 0216
g.Power-g.USBamp g.tec 0247
 441 style straight body Touch Proof connector PlasticsOne 441000PSW080001 441 – 000 PSW 80" (BLACK)
Standard probe LEENO SK100CSW http://www.globalinterpark.com/detail/detail?prdNo=2114277241&dispNo=001851006012
Precision engraving machine tools TINYROBO TinyCNC-6060C
Heat shirink 3M FP301

Referenzen

  1. Alzheimer’s Association. Alzheimer’s disease facts and figures. Alzheimers Dement. 12 (4), 459-509 (2016).
  2. Birbeck, G. L., Meyer, A. C., Ogunniyi, A. Nervous system disorders across the life course in resource-limited settings. Nature. 527 (7578), S167-S171 (2015).
  3. World Health Organization. . Neurological disorders: public health challenges. , (2006).
  4. Meyer, U., Feldon, J., Dammann, O. Schizophrenia and Autism: Both Shared and Disorder-Specific Pathogenesis Via Perinatal Inflammation?. Pediatr Res. 69 (5), 26r-33r (2011).
  5. Freedman, L. P., Cockburn, I. M., Simcoe, T. S. The Economics of Reproducibility in Preclinical Research. PLoS Biol. 13 (6), e1002165 (2015).
  6. Cummings, J. L., et al. Alzheimer’s disease drug development: translational neuroscience strategies. CNS Spectr. 18 (3), 128-138 (2013).
  7. Roelfsema, P. R., Treue, S. Basic neuroscience research with nonhuman primates: a small but indispensable component of biomedical research. Neuron. 82 (6), 1200-1204 (2014).
  8. Wu, C., Wais, M., Sheppy, E., del Campo, M., Zhang, L. A glue-based, screw-free method for implantation of intra-cranial electrodes in young mice. J Neurosci Methods. 171 (1), 126-131 (2008).
  9. Yu, F. H., et al. Reduced sodium current in GABAergic interneurons in a mouse model of severe myoclonic epilepsy in infancy. Nat Neurosci. 9 (9), 1142-1149 (2006).
  10. Parmentier, R., et al. Anatomical, physiological, and pharmacological characteristics of histidine decarboxylase knock-out mice: evidence for the role of brain histamine in behavioral and sleep-wake control. J Neurosci. 22 (17), 7695-7711 (2002).
  11. Handforth, A., Delorey, T. M., Homanics, G. E., Olsen, R. W. Pharmacologic evidence for abnormal thalamocortical functioning in GABA receptor beta3 subunit-deficient mice, a model of Angelman syndrome. Epilepsia. 46 (12), 1860-1870 (2005).
  12. Wu, C., Wais, M., Zahid, T., Wan, Q., Zhang, L. An improved screw-free method for electrode implantation and intracranial electroencephalographic recordings in mice. Behav Res Methods. 41 (3), 736-741 (2009).
  13. Garner, J. P. The Significance of Meaning: Why Do Over 90% of Behavioral Neuroscience Results Fail to Translate to Humans, and What Can We Do to Fix It?. Ilar Journal. 55 (3), 438-456 (2014).
  14. Naylor, E., Harmon, H., Gabbert, S., Johnson, D. Automated sleep deprivation: simulated gentle handling using a yoked control. Sleep. 12 (1), 5-12 (2010).
  15. Naylor, E., et al. Simultaneous real-time measurement of EEG/EMG and L-glutamate in mice: A biosensor study of neuronal activity during sleep. J Electroanal Chem (Lausanne). 656 (1-2), 106-113 (2011).
  16. Naylor, E., et al. Molecules in Neuroscience. , 12-16 (2010).
  17. Choi, J. H., et al. A flexible microelectrode for mouse EEG. , 1600-1603 (2009).
  18. Choi, J. H., Koch, K. P., Poppendieck, W., Lee, M., Shin, H. S. High resolution electroencephalography in freely moving mice. J Neurophysiol. 104 (3), 1825-1834 (2010).
  19. Lee, M., Shin, H. S., Choi, J. H. Simultaneous recording of brain activity and functional connectivity in the mouse brain. , 2934-2936 (2009).
  20. Lee, M., Kim, D., Shin, H. S., Sung, H. G., Choi, J. H. High-density EEG recordings of the freely moving mice using polyimide-based microelectrode. JoVE-J Vis Exp. (47), e2562 (2011).
  21. Mégevand, P., Quairiaux, C., Lascano, A. M., Kiss, J. Z., Michel, C. M. A mouse model for studying large-scale neuronal networks using EEG mapping techniques. Neuroimage. 42 (2), 591-602 (2008).
  22. Megevand, P., et al. Long-term plasticity in mouse sensorimotor circuits after rhythmic whisker stimulation. J Neurosci. 29 (16), 5326-5335 (2009).
  23. Troncoso, E., Muller, D., Czellar, S., Zoltan Kiss, J. Epicranial sensory evoked potential recordings for repeated assessment of cortical functions in mice. J Neurosci Methods. 97 (1), 51-58 (2000).
  24. Keith, B., Franklin, G. P., Paxinos, G. . The mouse brain in stereotaxic coordinates. , (2008).
  25. Kawakami, M., Yamamura, K. I. Cranial bone morphometric study among mouse strains. Bmc Evol Biol. 8, (2008).
  26. Strain, G. M., Tedford, B. L. Flash and pattern reversal visual evoked potentials in C57BL/6J and B6CBAF1/J mice. Brain Res Bull. 32 (1), 57-63 (1993).
  27. Schalk, G., McFarland, D. J., Hinterberger, T., Birbaumer, N., Wolpaw, J. R. BCI2000: A general-purpose, brain-computer interface (BCI) system. Ieee Transactions on Biomedical Engineering. 51 (6), 1034-1043 (2004).
  28. Kim, D., Yeon, C., Kim, K. Development and Experimental Validation of a Dry Non-Invasive Multi-Channel Mouse Scalp EEG Sensor through Visual Evoked Potential Recordings. Sensors. 17 (2), 326 (2017).
  29. Yeon, C., Kim, D., Kim, K., Chung, E. . SENSORS, 2014 IEEE. , 519-522 (2014).
  30. Kim, D., Yeon, C., Chung, E., Kim, K. . SENSORS, 2015 IEEE. , 1-4 (2015).
  31. Lin, C. T., et al. Novel dry polymer foam electrodes for long-term EEG measurement. IEEE Trans Biomed Eng. 58 (5), 1200-1207 (2011).
  32. Lopez-Gordo, M. A., Sanchez-Morillo, D., Pelayo Valle, F. Dry EEG electrodes. Sensors (Basel). 14 (7), 12847-12870 (2014).
  33. Fang, Q., Bedi, R., Ahmed, B., Cosic, I. Engineering in Medicine and Biology Society, 2004. IEMBS’04. , 2995-2998 (2004).
  34. Maffei, L., Fiorentini, A., Bisti, S. Neural correlate of perceptual adaptation to gratings. Science. 182 (4116), 1036-1038 (1973).
  35. Ernst, M., Lee, M. H., Dworkin, B., Zaretsky, H. H. Pain perception decrement produced through repeated stimulation. Pain. 26 (2), 221-231 (1986).
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Diesen Artikel zitieren
Yeon, C., Kim, D., Kim, K., Chung, E. Visual Evoked Potential Recordings in Mice Using a Dry Non-invasive Multi-channel Scalp EEG Sensor. J. Vis. Exp. (131), e56927, doi:10.3791/56927 (2018).

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