Valutazione della coagulazione del Plasma il tessuto del fegato in un modello animale di grandi dimensioni In Vivo
Summary
Qui presentiamo un protocollo per valutare sperimentalmente la coagulazione del plasma nel tessuto del fegato in vivo. In un modello porcino, microcircolazione viene esaminato dal laser Doppler, profondità di coagulazione è misurato istologicamente, temperatura al sito di coagulazione di effetto di tenuta del tubo e macchina fotografica termografica e termometro a infrarossi è documentata dalla pressione di scoppio esperimenti.
Abstract
Coagulazione del plasma come una forma di elettrocauterio è usata nella chirurgia epatica per decenni per sigillare la grande superficie di taglio del fegato dopo hepatectomy principale per prevenire le emorragie in una fase successiva. Gli effetti esatti di coagulazione del plasma il tessuto del fegato solo male sono esaminati. Nel nostro modello porcino, gli effetti di coagulazione possono essere esaminati vicino all’applicazione clinica. Una microcircolazione combinato laser Doppler flussimetro e spettrofotometro documenti cambia durante la coagulazione a 8 mm di profondità del tessuto non invadente, che fornisce informazioni quantificabili di emostasi oltre l’impressione clinica soggettiva. La temperatura nel sito di coagulazione è valutata con una coagulazione di Priore e post del termometro a infrarossi e con una macchina fotografica termografica durante la coagulazione, una misura della temperatura del fascio di gas non è possibile dovuto la soglia superiore dei dispositivi. La profondità della coagulazione è misurata microscopicamente il ematossilina/eosina sezioni macchiata dopo la calibrazione con un micrometro oggetto e dà un informazioni esatte sulla potenza impostazione-coagulazione profondità-relazione. L’effetto di tenuta viene esaminato il dotti biliari, come non è possibile per un Coagulatore del plasma sigillare i vasi sanguigni più grandi. Esperimenti di pressione scoppio fuori relativi effetti sugli organi espiantati per eliminare la pressione sanguigna.
Introduction
La coagulazione del plasma dell’argon (APC) è uno strumento ampiamente usato nella chirurgia addominale per più di tre decenni1,2. È una tecnica standard per il raggiungimento del hemostasis secondario dopo hepatectomy principale sigillando il fegato tagliato superficie per impedire successive emorragie3. La coagulazione del plasma è una forma specializzata di radiofrequenza elettrocauterio, che trasporta l’energia elettrica attraverso un arco di gas ionizzato. Emostasi elettrotermico monopolare, questa tecnica senza contatto ha il vantaggio di evitare l’elettrodo ad attaccarsi al tessuto4. Il fascio di gas ionizzato viene automaticamente indirizzato alla zona della più bassa resistenza elettrica e si è allontanato quando aumenti di resistenza dovuto essiccamento ad altre aree non ancora essiccate. Questo produce una limitata profondità uniforme di coagulazione5,6. Fattori che influenzano l’effetto di coagulazione sono l’attivazione del tempo, l’impostazione di potenza del dispositivo della coagulazione e la distanza tra la sonda e il tessuto. L’elio è un altro gas di trasporto, che può essere utilizzato per plasma coagulazione7. Studi clinici di recente concentrati solo sugli esiti clinici piuttosto che8,3,risultati istologici e funzionali9, mentre studi sperimentali incentrato sulle indagini in vitro 10 o esperimenti su organi irrorato isolato11.
Il protocollo sottostante permette lo studio degli effetti di coagulazione del plasma in un modello animale grande vicino all’applicazione clinica utilizzando attrezzatura standard umano sui suini: microcircolazione viene valutata non invadente di un flussometro Doppler laser e spettrofotometro, che è uno strumento clinico standard per questa indicazione12,13. Cambiamenti di temperatura durante la coagulazione sono controllati con un termometro a infrarossi e una macchina fotografica termografica. La profondità di coagulazione è misurata su istologico ematossilina/eosina sezioni macchiata dopo la raccolta dei campioni di tessuto. Per il confronto con altri mezzi per il hemostasis secondario, vengono eseguiti esperimenti di pressione di scoppio. In contrasto con tecniche precedentemente descritte14, questi sono condotti sugli organi espiantati per escludere la pressione sanguigna effetti correlati. Oltre alle indagini descritte sugli effetti locali di coagulazione del plasma, le analisi del sangue standard può essere intrapreso anche nel modello porcino.
Protocol
Representative Results
Discussion
Modelli del roditore per chirurgia epatica sono stabiliti per un lungo periodo di tempo16. Tuttavia, modelli animali di grandi dimensioni offrono alcuni vantaggi: nessuna apparecchiatura microsurgical è necessaria come equipaggiamento standard operativo per gli esseri umani possa essere applicato, tecniche chirurgiche sono paragonabili per uso clinico e metodi di valutazione clinica standard possono essere trasferito agli esperimenti. Ad esempio, test clinici standard del sangue può avvenire sen…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Gli autori non hanno nessun ringraziamenti.
Materials
| Xylazine 20 mg/mL | Vetoquinol GmbH | Xylapan | |
| Ketamine 100 mg/mL | Ceva GmbH | Ceva Ketamine Injection | |
| Atropine 100 mg / 10 mL | Dr. Franz Köhler Chemie GmbH | Atropinsulfat Köhler 100mg Amp. | |
| Propofol | Fresenius Kabi GmbH | Propofol 1% MCT Fresenius | |
| Fentanyl | KG Rotexmedica GmbH | Fentanyl 0,5mg Rotexmedica | |
| Isoflurane | Abbot GmbH | Forene 100% (V/V) 250 mL | |
| Ringer's lactate solution | Baxter Deutschland GmbH | sodium 131mmol/l, potassium 5 mmol/l, calcium 2 mmol/l, cloride 111 mmol/l, lactate 29 mmol/l | |
| Surgical disinfactant | Schülke & Mayr GmbH | Kodan Tinktur forte gefärbt 1l 104804 | |
| Motorized microscope | Nikon Instruments Europe | Eclipse TE2000-E | |
| Microscope camera | Nikon Instruments Europe | Digitalsight DS-Qi1Mc | |
| Imaging software | Nikon Instruments Europe | NIS elements Vers. 4.40 | |
| Plasma coagulator | Söring GmbH | CPC-1000 | |
| Argon gas | Linde AG | Argon 4.8 | |
| Helium gas | Linde AG | Helium 4.8 | |
| O2C | LEA Medizintechnik GmbH | O2C Version 1212 | with LF-2 or LF-3 probe |
| Infrared thermometer | Voltcraft | VOLTCRAFT IR 260-8S | |
| Thermographic camera | InfraTec GmbH | VarioCAM HD head 820 | |
| Thermographic analysis sofrtware | InfraTec GmbH | IRBIS 3 | |
| Mayer's Hematoxylin solution | Merck 1.09249 | ||
| Eosin solution | VWR International GmbH | Merck 1.09844 | |
| Rollerpump Masterflex L/S easy Load | Cole-Parmer Instrument Company | model 7518-10 | |
| Perfusorpump | B. Braun Melsungen AG | Perfusor secura FT | |
| Digital pressure meter | Greisinger electronic | GMH 3161 | |
| Perfusorsyringe, 50 mL | B. Braun Melsungen AG | REF 8728810 F | |
| Perfusor line, Type IV Standard, PVC Luer lock | B. Braun Melsungen AG | REF 8722960 | |
| 3-Way stopcock, Dicofix C35C | B. Braun Melsungen AG | REF 16494 C | |
| Silk 2-0. 3 metric | Resorba | REF H5F | |
| Vicryl 4-0 Sutupak | Ethicon | V1224H | |
| NaCl 0.9 % | B. Braun Melsungen AG |
Referenzen
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