前庭系を研究するラットの手術なるほど
Summary
このプロトコルでは、前庭系を研究するための有用な方法であるラットの手術なるほどについて説明します。
Abstract
前庭系や前庭代償プロセスを研究するため、メソッド数は外科か化学なるほどと前庭神経切断などを含む前庭神経の損傷を引き起こすことしました。手術なるほどは、比較的単純な信頼性、および迅速な方法です。ここでは、ラットなるほどのために手術手技について述べる。耳介後部切開が外耳道と鼓膜、鼓膜と小骨があぶみ骨なし削除される公開全身麻酔下で行われます。あぶみ骨と楕円形の窓との間に位置しているアブミ骨動脈は脆弱な構造を明確な外科的フィールドを取得する保持必要があります。かぎり行うホール前庭で行われます 2.1 mm のドリル バールあぶみ骨に優れた。100% エタノールはこの穴から注入し、数回を吸気します。綿密な解剖顕微鏡および注意深い出血制御の下で、信頼性の高い結果を得るために不可欠です。手術直後後は、前庭系障害、眼振、頭の角度、回転運動などの症状が見られます。Rotarod または回転椅子テストは、客観的・定量的評価前庭機能を使用できます。
Introduction
前庭器官は、バランスと目のコントロールは欠かせません。通常の前庭機能は、2 つの内側の耳の前庭器官から対称の求心性信号によって異なります。前庭機能低下または損失は、めまい、眼振、姿勢の不均衡を誘導します。急性損傷後前庭機能が自発的に回復数日前庭代償1,2として知られているプロセス。静的な赤字の前庭代償は、安静時自発同側および対側の前庭神経核間の不均衡に関連する回復のプロセスです。動的赤字の前庭代償を達成した主を介して感覚と行動置換 (視覚や体性感覚の入力を使用して)3。これらのプロセスが神経可塑性研究4、5の魅力的です。
前庭系と前庭代償、外科および化学なるほどなど前庭神経切断5,6 中神経可塑性を支えるメカニズムを検討するいくつかの方法が開発されています。 ,7,8。前庭神経切断完了の前庭系障害を誘発する特定の方法が難しく、侵襲的なプロシージャで、脳損傷8,9を引き起こす可能性があります。このメソッドは、高度な外科的スキルが必要です、なるほどより時間かかります。ゲンタマイシン、arsanilate、テトラカインなど化学なるほどが簡単で信頼性の高い結果10、11,12をもたらすことができます。しかし、蝸牛が壊れているも可能性が、前庭系障害時間11に発展するかもしれない。さらに、化学物質の正確な評価のために維持されるべき、脳に及ぼす影響は明確ではありません。手術なるほど 184215の動物研究で初めて導入されました、1936年16でラットに初めて報告されました。この手法が多く使われており動物研究5,17,18,19。手術なるほど、特定の信頼性の高い、比較的単純な方法であります。13,14また、前庭障害の症状は、手術後すぐに見られています。ここでは、ラットなるほどに対する私たちの手技について述べる。
Protocol
本研究は, 機関動物ケアおよび使用委員会のソウル国立大学病院 (14-0148-C1A1) 評価・実験動物ケアの認定会の認定を受けているに従って国際。 注: 7-8 週古い (200/250 g) の Sprague-dawley (SD) ラットに実験を行った。各動物は、実験開始前 1 週間の実験室の条件に順応だった。定数 12 に温度と湿度管理された部屋で収容された動物-h:12-h: 明暗サイクル無料アクセスと食料と水。</p…
Representative Results
手術の成功は、行動テストによって検証されました。すべての動物は、片側性前庭機能低下の典型的な動作を示した。自発的なバレル ローリングは、早期復旧フェーズ (ビデオ 1) で頭や体を軽いタッチで空気のパフで誘発されて、手術後すぐに明白でした。手術後 3 d は、時折破壊側に傾いて移動動物は左側に落ちる。自発眼振は、2 d (動画 2</strong…
Discussion
この手法は、突然、恒久的なかつ完全な前庭機能の損失を作成する便利な方法です。これは、前庭神経炎、聴神経腫瘍やメニエール病などの前庭疾患を勉強される可能性があります。多くの研究は、前庭神経核の神経細胞の可塑性や関連する中央プロセス5,17,18,19を研究するのにこの手法を使用し…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
本研究は韓国健康技術 R & D プロジェクトを通じて、韓国保健産業開発研究所 (KHIDI)、韓国の福祉・厚生省によって資金を供給からの助成金によって支えられた (許可番号: HI15C2651)。
Materials
| ASPIRATOR KB-012 | KOH BONG & CO., LTD. | KB-012 | Medical aspirator |
| Blade: #15 | Fine Science Tools | #10015-00 | Blades for #7 Scalpel Handles, #15 |
| Carbon Steel Burrs | Fine Science Tools | #19007-05 | shaft diameter: 2.3 mm, length: 44 mm, package of 10 burrs |
| Carl Zeiss Surgical GmbH | Carl Zeiss | #6627100863 | Surgical microscope |
| Dumont #3c | Fine Science Tools | #11231-20 | Standard tip 0.17 x 0.10 mm, 11 cm |
| Dumont #5SF | Fine Science Tools | #11252-00 | |
| Dumont #7B | Fine Science Tools | #11270-20 | Serrated 0.17 x 0.10 mm, 11 cm |
| Extra Fine Bonn: straight | Fine Science Tools | #14084-08 | Iris scissors, best suited for microdissection under high magnification |
| Fine Iris Scissors: straight | Fine Science Tools | #14094-11 | Made from martensitic stainless steel, combined with molybdenum and vanadium |
| Finger Loop Ear Punch | Fine Science Tools | #24212-01 | 1 mm. Provides stability and control for researchers using the numbering system |
| Hartman | Fine Science Tools | #13002-10 | Tip width: 1 cm, serrated, 10 cm |
| Short Scalpel Handle #7 Solid | Fine Science Tools | #10003-12 | #7 short, 12 cm |
| Small Vessel Cauterizer | Fine Science Tools | #18000-03 | Replacement tip, straight knife, keeps bleeding to a minimum and therefore provides a surgical field clear of clamps and hemostats |
| Strong 207S | SAESHIN | 207S | Powerful torque at low speed, available with speed or on/off foot controller |
| Suction Tubes | JEUNGDO B&P CO., LTD. | H-1927-8 | Frazier, 18 cm |
| VICRYL | ETHICON | W9570T | Synthetic absorbable sterile surgical suture |
| Weitlaner-Locktite | Fine Science Tools | #17012-13 | Maximum spread: 4.5 cm, 2 x 3 blunt teeth, 11 cm |
| Zoletil | Virbac, France | Tiletamine-zolazepam | |
| Rompun | Bayer | Xylazine | |
| Rimadyl | Pfizer | Carprofen | |
| Septra | Pfizer | Trimethoprim-sulfonamide |
Referenzen
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Chang, M. Y., Park, M. K., Park, S. H., Suh, M., Lee, J. H., Oh, S. H. Surgical Labyrinthectomy of the Rat to Study the Vestibular System. J. Vis. Exp. (135), e57681, doi:10.3791/57681 (2018).