Herstellung von dezellularisierten Nierengerüsten bei Ratten

Eun Heui Kim; Sang Soo Kim; Ju In Kim; Ji Min Cheon; Joo Hyoung Kim; Jin Chun Lee; Soo Geun Wang; Kyung Un Choi

doi:10.3791/61856

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Methodenartikel

Herstellung von dezellularisierten Nierengerüsten bei Ratten

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DOI:

10.3791/61856

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18. März 2021

Eun Heui Kim¹ , Sang Soo Kim¹ , Ju In Kim² , Ji Min Cheon² , Joo Hyoung Kim³ , Jin Chun Lee⁴ , Soo Geun Wang⁵ , Kyung Un Choi⁶

¹Department of Internal Medicine and Biomedical Research Institute, Pusan National University Hospital, ²Biomedical Research Institute, Pusan National University Hospital, ³Department of Plastic Surgery, Pusan National University Hospital, ⁴Department of Otorhinolaryngology - Head and Neck Surgery, Yangsan Pusan National University Hospital, ⁵Department of Otorhinolaryngology - Head and Neck Surgery, Pusan National University Hospital, ⁶Department of Pathology, Pusan National University Hospital

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Dieses Protokoll führt eine Methode zur Entwicklung eines Gerüsts mit dezellularisierten Rattennieren ein. Das Protokoll umfasst Dezellularisierungs- und Rezellularisierungsprozesse, um die Bioverfügbarkeit zu bestätigen. Die Dezellularisierung wird mit Triton X-100 und Natriumdodecylsulfat durchgeführt.

Zusammenfassung

Tissue Engineering ist eine Spitzendisziplin in der Biomedizin. Zellkulturtechniken können zur Regeneration von funktionellen Geweben und Organen angewendet werden, um kranke oder beschädigte Organe zu ersetzen. Gerüste werden benötigt, um die Erzeugung dreidimensionaler Organe oder Gewebe mit differenzierten Stammzellen in vivo zu erleichtern. In diesem Bericht beschreiben wir eine neuartige Methode zur Entwicklung vaskularisierter Gerüste mit dezellularisierten Rattennieren. Acht Wochen alte Sprague-Dawley-Ratten wurden in dieser Studie verwendet, und Heparin wurde in das Herz injiziert, um den Fluss in die Nierengefäße zu erleichtern, so dass Heparin in die Nierengefäße eindringen konnte. Die Bauchhöhle wurde geöffnet und die linke Niere wurde gesammelt. Die gesammelten Nieren wurden 9 h lang mit Reinigungsmitteln wie Triton X-100 und Natriumdodecylsulfat perfundiert, um das Gewebe zu dezellulieren. Dezellularisierte Nierengerüste wurden dann sanft mit 1% Penicillin / Streptomycin und Heparin gewaschen, um Zelltrümmer und chemische Rückstände zu entfernen. Die Transplantation von Stammzellen mit den dezellularisierten Gefäßgerüsten soll die Erzeugung neuer Organe erleichtern. So könnten die vaskularisierten Gerüste in Zukunft eine Grundlage für das Tissue Engineering von Organtransplantaten bilden.

Einleitung

Zellkulturtechniken werden zur Regeneration von funktionellen Geweben und Organen eingesetzt, um kranke oder beschädigte Organe zu ersetzen. Allogene Organtransplantation ist derzeit die häufigste Behandlung für irreversible Organschäden; Dieser Ansatz erfordert jedoch die Verwendung von Immunsuppression, um eine Abstoßung des transplantierten Organs zu verhindern. Darüber hinaus können trotz Fortschritten in der Transplantimmunologie 20% der Transplantatempfänger innerhalb von 5 Jahren eine akute Abstoßung erfahren, und innerhalb von 10 Jahren nach der Transplantation können 40% der Empfänger ihr transplantiertes Transplantat verlieren oder sterben^1....