인산칼슘 유도 마우스 복부 대동맥류 모델
Summary
이 프로토콜은 AAA의 병리학적 특징과 분자 메커니즘을 연구하기 위해 인산칼슘 유발 복부 대동맥류(AAA) 마우스 모델을 설명합니다.
Abstract
복부 대동맥류(AAA)는 전 세계적으로 발생하는 생명을 위협하는 심혈관 질환으로 복부 대동맥의 돌이킬 수 없는 확장이 특징입니다. 현재, 화학적으로 유도된 여러 뮤린 AAA 모델이 사용되며, 각각은 AAA의 발병기전의 상이한 양상을 시뮬레이션한다. 인산칼슘 유도 AAA 모델은 안지오텐신 II- 및 엘라스타제 유도 AAA 모델에 비해 빠르고 비용 효율적인 모델입니다. 마우스 대동맥에CaPO4 결정을 적용하면 탄성 섬유 분해, 평활근 세포의 손실, 염증 및 대동맥 확장과 관련된 칼슘 침착이 발생합니다. 이 기사에서는 CaPO4 유도 AAA 모델에 대한 표준 프로토콜을 소개합니다. 이 프로토콜에는 재료 준비, 하부 복부 대동맥의 외래에 대한 CaPO4의 외과 적 적용, 대동맥 동맥류를 시각화하기위한 대동맥 수확 및 마우스의 조직 학적 분석이 포함됩니다.
Introduction
복부 대동맥류(AAA)는 복부 대동맥의 영구적인 확장을 특징으로 하는 치명적인 심혈관 질환으로, 파열이 발생하면 사망률이 높습니다. AAA는 노화, 흡연, 남성 성별, 고혈압 및 고지혈증과 관련이있습니다1. 세포외 기질 섬유 단백질 분해, 면역 세포 침윤 및 혈관 평활근 세포의 손실을 포함한 여러 병리학적 과정이 AAA 형성에 기여하는 것으로 나타났습니다. 현재 AAA의 병리학 적 메커니즘은 여전히 파악하기 어렵고 AAA1의 치료를위한 입증 된 약물은 없습니다. 인간 AAA에 대한 연구는 인간 대동맥 샘플이 거의 없기 때문에 제한적입니다. 따라서, 피하 안지오텐신 II (AngII) 주입, 혈관 주위 또는 관내 엘라스타제 배양, 및 혈관 주위 인산칼슘 적용2를 포함하는 여러 화학적 변형 유도 동물 AAA 모델이 확립되고 널리 채택되었다. 일반적으로 사용되는 마우스 모델은 인산 칼슘 (CaPO4)을 하부 복부 대동맥의 외막에 적용하는 것인데, 이는 비용 효율적이며 유전자 변형이 필요하지 않습니다.
동맥류 변화를 유도하기 위해 토끼의 경동맥에CaCl2를 직접 대동맥 주위 적용하는 것은 Gertz et al.3에 의해 처음에보고되었고 나중에 마우스의 복부 대동맥에 적용되었다. 이 모델은 마우스 4에서 CaPO4 결정을 사용하여 대동맥 확장을 가속화하기 위해 Yamanouchi et al.에 의해 개발되었습니다. 마우스 대동맥으로의 CaPO4의 침윤은 심오한 대 식세포 침윤, 세포 외 기질 분해 및 칼슘 침착을 포함하여 인간 AAA에서 관찰 된 많은 병리학 적 특징을 되풀이합니다. 고지혈증과 같은 인간 AAA의 위험 인자는 또한 마우스5에서 CaPO4 유도 AAA를 증가시킨다. ApoE-/- 또는 LDLR-/– 마우스에서 AngII 관류 유도 AAA와 대조적으로, CaPO4–유도 AAA는 인간 AAA를 모방하는 하부 대동맥 영역에서 발생한다. 현재이 방법은 유전자 변형 마우스에서 AAA 발달에 대한 감수성을 평가하고 약물 6,7의 항 -AAA 효과를 평가하는 데 널리 적용되었습니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
CaPO4의 대동맥 주위 적용은 마우스에서 AAA를 유도하는 강력한 접근법이다. 여러 연구에서 CaPO4 모델을 사용했으며 이것이 마우스 7,9에서 AAA를 연구하는 빠르고 재현 가능한 방법이라고 일관되게 보고했습니다. 이 모델은 인간 대동맥류의 특징 중 일부를 요약하고 염증 및 세포외 기질 분해를 포함한 AAA 발병 기전에 대한 기계론적 통찰?…
Acknowledgements
이 연구는 중국 국립 자연 과학 재단 (NSFC, 81730010, 91839302, 81921001, 31930056 및 91529203)과 중국 국가 핵심 R & D 프로그램 (2019YFA 0801600)의 자금 지원으로 지원되었습니다.
Materials
| CaCl2 | MECKLIN | C805225 | |
| NaCl | Biomed | SH5001-01 | |
| PBS | HARVEYBIO | MB5051 | |
| Small animal ventilator | RWD | H1550501-012 |
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