Examen de l'infection orale à Candida chez les patients atteints du syndrome de Sjögren primitif
Summary
Ici, nous présentons un protocole pour l’examen de l’infection orale à Candida chez les patients atteints du syndrome de Sjögren primitif, qui peut être utilisé pour un traitement rapide et, par la suite, pour éviter les complications associées.
Abstract
Le syndrome de Sjögren primaire (pSS) est une maladie auto-immune caractérisée par des symptômes tels que la bouche sèche, les yeux secs et d’autres symptômes systématiques. En raison de l’hyposalivation ressentie par les patients atteints de pSS, une dysbactériose buccale se produit souvent. Une complication fréquente du pSS est l’infection orale à Candida . Dans cet article, les auteurs décrivent des méthodes systématiques qui peuvent diagnostiquer efficacement l’infection orale à Candida et identifier les souches de Candida à l’aide de salive, d’écouvillons de la muqueuse buccale ou d’un rince-bouche de patients atteints de pSS. La gélose au dextrose de Sabouraud (SDA), le test de formation d’hyphes, le test de frottis à l’hydroxyde de potassium (KOH) et le test de coloration au blanc de calcofluor (CFW) sont utilisés pour le diagnostic de l’infection orale à Candida . Une gélose diagnostique de Candida est utilisée pour l’identification des souches de Candida . Enfin, les tests de sensibilité aux antifongiques sont utilisés pour déterminer le traitement médicamenteux antifongique approprié. Cette méthode standardisée peut améliorer le diagnostic, le traitement et la recherche future des infections orales à Candida liées au pSS. Un diagnostic précoce, à l’aide de cette méthode, peut également prévenir toute complication due à un retard dans l’obtention d’un traitement approprié.
Introduction
La candidose est causée par Candida spp., qui sont des agents pathogènes opportunistes. Les souches courantes comprennent Candida albicans, Candida krusei, Candida glabrata, Candida parapsilosis et Candida dubliniensis1. Les infections opportunistes causées par Candida spp. comprennent les infections superficielles à Candida et la candidose invasive. La candidose invasive survient principalement chez les personnes immunodéprimées ; par exemple, chez les patients atteints du syndrome d’immunodéficience acquise (SIDA), la candidose invasive peut menacer considérablement la qualité de vie ou même la durée de vie2. L’infection superficielle à Candida , telle que la candidose cutanéo-muqueuse, est plus fréquente chez les patients3.
La candidose buccale, une infection superficielle à Candida , est l’infection fongique humaine la plus courante. Candida albicans est un commensal normal de la bouche ; le taux de portage de Candida spp. varie de 20 % à 75 % dans la population générale sans aucun symptôme4. La prolifération de Candida peut entraîner une gêne locale chez les patients, comme une altération du goût de la sensation, une sensation de brûlure dans la bouche, une dysphagie due à une mauvaise alimentation, une récupération retardée et un séjour prolongé à l’hôpital. La candidose buccale à long terme peut entraîner une candidose invasive sévère, entraînant une morbidité et une mortalité importantes5. La candidose buccale peut également augmenter le risque de cancer de la bouche5. L’altération de la fonction des glandes salivaires fait partie des facteurs de risque de candidose buccale6. L’initiation de l’infection est l’adhésion de Candida aux parois cellulaires épithéliales. S’ensuit la prolifération et la filamentation de Candida et la formation et la maturation du biofilm7. Les biofilms sont extrêmement difficiles à éradiquer et résistent aux traitements antifongiques conventionnels, ce qui rend le traitement clinique difficile pour l’infection orale à Candida associée au biofilm7.
Le syndrome de Sjögren primaire (pSS) est une maladie auto-immune caractérisée par une sécheresse de la bouche, des yeux secs et d’autres symptômes systématiques8. La sécheresse buccale est le symptôme le plus fréquent du pSS. La salive a d’importantes fonctions antifongiques physiologiques. D’une part, il peut diluer et récurer la bouche et ensuite éliminer les organismes de la muqueuse. D’autre part, la salive contient des protéines antimicrobiennes, telles que la lactoferrine, la sialoperoxydase, le lysozyme, des polypeptides riches en histidine et des anticorps anti-candidiques spécifiques, qui peuvent interagir avec la muqueuse buccale et empêcher la prolifération de Candida6. La réduction du flux salivaire peut prédisposer les patients atteints de pSS à la candidose buccale. Une étude transversale observationnelle menée auprès de 61 patients atteints de pSS a révélé que 13,1 % des patients atteints de pSS présentaient des signes buccaux de candidose et que la corrélation significative et négative entre l’unité formant une colonie (UFC)/mL de Candida albicans était significativement et négativement corrélée avec les niveaux de salive entière non stimulée (UWS) et de salive entière stimulée (SWS)9.
Les méthodes introduites dans ce manuscrit permettent d’identifier l’infection orale à Candida sur la base d’attributs morphologiques caractérisés (par exemple, les hyphes et les cellules de levure) lors d’un frottis direct ou après la culture10. L’identification de la souche de Candida à l’aide d’une gélose diagnostique Candida est basée sur la formation de colonies de différentes couleurs avec une morphologie variée, qui résultent du clivage des substrats chromogènes par des enzymes spécifiques à l’espèce11. Dans ce manuscrit, des méthodes systématiques de détection de l’infection orale à Candida sont présentées, y compris la culture orale traditionnelle de Candida et l’examen rapide par frottis à l’hydroxyde de potassium (KOH) et au test de coloration au blanc de calcofluor (CFW)10. De plus, le test de sensibilité aux antifongiques, qui peut guider le traitement clinique de l’infection orale à Candida , a été introduit. Dans des situations réelles, il n’est pas nécessaire d’effectuer toutes les méthodes introduites dans ce manuscrit ; la ou les méthodes de détection orale de Candida peuvent être sélectionnées en fonction de l’objectif. L’examen de l’infection orale à Candida et la détermination des souches de Candida chez les patients atteints de pSS sont non seulement bénéfiques pour le traitement de la maladie, mais aident également à évaluer la caractérisation de la candidose buccale et les profils d’espèces.
Protocol
Representative Results
Discussion
Dans le présent manuscrit, nous fournissons une série de méthodes systématiques, simples et réalisables pour détecter les infections orales à Candida , identifier les souches de Candida et tester la sensibilité antifongique des médicaments couramment utilisés chez les patients atteints de pSS.
Dans des contextes pratiques, toutes les méthodes introduites dans ce manuscrit ne sont pas nécessaires. La ou les méthodes de détection orale de Candida peuvent…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Cette recherche a été soutenue par la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (82201084), la Fondation chinoise des sciences postdoctorales (2022M722232), la Fondation pour la recherche postdoctorale de Pékin (2023-ZZ-020), le projet Miaopu de l’hôpital Tiantan de Pékin, l’Université médicale de la capitale (2023MP10) et le Fonds général de recherche, Conseil des subventions de recherche de Hong Kong (27111820 et 17116521).
Materials
| 0.22 µm Syringe Filter | MERCK | SLGV004SL | |
| 1.5 mL Centrifuge Tube | axygen | MCT-150-C-S | |
| 10 cm Microbiological Culture Dishes | Jet Bio-Filtration Co. Ltd | TCD000100 | |
| 15 mL Centrifuge Tube | Jet Bio-Filtration Co., Ltd | CFT011150 | |
| 50 mL Centrifuge Tube | Corning | 430290 | |
| 96-well Microplates | Corning | 3599 | |
| API 0.85% NaCl ampule | BIOMERIEUX | 20070 | |
| Calcofluor White Stain | Sigma-Aldrich | 18909-100ML-F | |
| CHROMagar Candida | CHROMagar | P002860 | Candida diagnostic agar |
| D(+)-Glucose Monohydrate | Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd | 10010518 | |
| Fetal Bovine Serum | Gibco | 26170035 | |
| McFarland Standards Kit | BIOMERIEUX | 70900 | |
| Nunc precision molded loops | ThermoFisher Scientific | 254399 | |
| Phosphate Buffered Saline | Gibco | C10010500BT | |
| Potassium Hydroxide | Aladdin | P112284-500g | |
| PowerSoil DNA Isolation Kit | MO BIO | 12888-50 | |
| RPMI 1640 Medium | Gibco | 11875119 | |
| Sabourand's Agar Medium | Solarbio | S9710 | |
| Yeast Nitrogen Base Without Amino acids | Solarbio | Y8040 | |
| Yeast-like Fungal Susceptibility Kit (Microdilution) | BIOMERIEUX | 14204 |
Referenzen
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