Programlanabilir Çektirme Patch-pipetler ve Sharp Elektrotlar

Summary

Bu video elektrofizyoloji için yama pipetler ve keskin elektrotlar yapmak için programlanabilir çektirmenin nasıl kullanılacağını gösterir. Aynı prosedürü enjeksiyon iğneleri de dahil olmak üzere, çeşitli cam aletleri yapmak için kullanılan olabilir.

Abstract

Cam Mikroelektronlar (pipetler denir), on yıllar boyunca elektrofizyoloji, bir beygir olmuştur. Bugün, pipetler, cam kılcal damarların programlanabilir çektirmenin kullanarak yapılır. Bu tür araçların ısı, bir metal filament veya lazer ve yerçekimi, bir motor veya her ikisini birden kullanarak cam çizmek ya kullanarak kılcal. Intrasellüler kayıt için keskin elektrotlar, ısı, yerçekimi, ve bir motor bir kombinasyonunu kullanabilirsiniz patch-klemp kayıt için Pipetler, sadece ısı ve yerçekimi kullanılarak oluşturulur. , Hücre içi kayıt pipetler yapmak için kullanılan prosedür Crna Xenopus oosit içine enjeksiyon dahil olmak üzere çeşitli uygulamalar için enjeksiyon iğneleri, yapmak için kullanılan benzer. Ise dar cam hücre içi kayıt (dış çapı = 1.0 mm) için kullanılan genel, kılcal cam <1.2 mm çap, pipetler için yama kelepçe kayıt yapmak için kullanılır. Her araç için, çektirmenin biraz farklı programlanmıştır. Bu video kayıt pipetler, önceden belirlenmiş çektirmenin programları kullanarak her iki tür nasıl gösterir.

Protocol

Çekme pipetler Sutter P-97 Flaming / Kahverengi olarak çektirmesi gibi bir mikroelektrot kullanarak, yaklaşık 10-20 pipetler bir set çekin. Kılcal cam seçin. Biz borosilikat (Sutter BF150-110-10, 1,5 mm, dış çapı, iç çapı 1.1mm, uzun 10cm) kullanın. Temiz ve tozsuz kalır cam dikkatlice saklayın. Çekme programı tasarlayın. Biz her aşamasında, ısı ve hızı azalan ve son adım küçük bir çekme, 5 adım programı kullanabilirsiniz. Sutter pipetle y…

Discussion

Protokol resimli, elektrofizyoloji laboratuarlarında günlük kullanım hem de hücreler ve hayvanlar için enjeksiyon iğneleri yapmak için kullanılır. Programlanabilir çektirmesi ile, çeşitli kullanımlar için pipetler yapmak kolaydır. Çektirmesi üzerine, dikkat ve itina ile filament bir yıl veya daha uzun sürecek. Denemelerinizin iyi şanslar.

Materials

Material Name	Typ	Company	Catalogue Number	Comment
Micropipette Puller	Instrument	Sutter Instruments	P-97	Or similar instrument (e.g. Sutter P-87 or P-2000)
Glass Capillaries	Reagent	Sutter Instruments	BF150-86-10	Or, similar capillary glass. To make filling the pipette easier, use a capillary with a glass filament.