Zum Anzeigen dieser Inhalte ist ein JoVE-Abonnement erforderlich. Melden Sie sich an oder starten Sie Ihre kostenlose Testversion.
Kapitel
- 00:04Titel
- 01:24Preparation of S or M Phase-arrested Cells
- 02:19Formaldehyde Cross-linking
- 04:49Immunoprecipitation
- 07:32Results: Capturing and Analyzing PKR-interacting RNAs During the Cell Cycle Using qRT-PCR
- 08:45Conclusion
Wir präsentieren experimentelle Ansätze für Studium RNA-Interaktoren des doppelsträngige RNA-bindende Proteinkinase RNA aktiviert (PKR) während des Säugetier-Zelle Zyklus mit HeLa-Zellen. Diese Methode nutzt Formaldehyd Crosslink RNA-PKR-komplexe und Immunopräzipitation PKR-gebundenen RNAs zu bereichern. Diese RNAs können weiter durch Hochdurchsatz-Sequenzierung oder qRT-PCR analysiert werden.
Tags
Keywords:
RNA InteractorsProtein Kinase RNA-ActivatedMammalian Cell CycleCrosslinkingFormaldehydeImmunoprecipitationNeurodegenerative DiseaseParkinson’s DiseaseAlzheimer’s DiseaseDouble-stranded RNARNA-binding ProteinsPost-transcriptional RegulationGene ExpressionCell Cycle ArrestHeLa CellsThymidineNocodazole
