Delivery of the Cas9/sgRNA Ribonucleoprotein Complex in Immortalized and Primary Cells via Virus-like Particles ("Nanoblades")

Philippe E. Mangeot; Laura Guiguettaz; Thibault J. M. Sohier; Emiliano P. Ricci

doi:10.3791/62245

Journal

/

Biologie

/

משלוח של Cas9/ sgRNA ריבונוקלאופרוטאין קומפלקס בתאים מונצחים וראשוניים באמצעות חלקיקים דמויי וירוס ("Nanoblades")

JoVE Journal
Biologie

This content is Free Access.

JoVE Journal Biologie

Delivery of the Cas9/sgRNA Ribonucleoprotein Complex in Immortalized and Primary Cells via Virus-like Particles (“Nanoblades”)

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

משלוח של Cas9/ sgRNA ריבונוקלאופרוטאין קומפלקס בתאים מונצחים וראשוניים באמצעות חלקיקים דמויי וירוס ("Nanoblades")

DOI:

10.3791/62245-v

•

09:23 min

•

March 31, 2021

•

Philippe E. Mangeot, Laura Guiguettaz, Thibault J. M. Sohier, Emiliano P. Ricci

¹LBMC, Laboratoire de Biologie et Modélisation de la Cellule Univ Lyon, ENS de Lyon, Université Claude Bernard Lyon 1, CNRS, UMR 5239, INSERM, U1210, Lyon, 69007, France, ²CIRI, Centre International de Recherche en Infectiologie Univ Lyon, Inserm, U1111, Université Claude Bernard Lyon 1, CNRS, UMR5308, ENS de Lyon, F-69007, Lyon, France

Kapitel

00:05Introduction
00:56Nanoblade Preparation
02:45Concentration of Nanoblades on a Sucrose-Cushion
04:16Monitoring Cas9 Loading Within Nanoblades and Transduction of Cells
06:24Results: Characterization of Nanoblades
08:29Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

פיתחנו פרוטוקול פשוט וזול לטעון Cas9 / מדריך יחיד RNA RNA (sgRNA) rbonucleoprotein מתחמים בתוך חלקיקים דמויי וירוס. חלקיקים אלה, הנקראים "Nanoblades", מאפשרים העברה יעילה של קומפלקס Cas9/sgRNA בתאים מונצחים וראשוניים, כמו גם ב- vivo.

Article

Embed

ZUR WIEDERGABELISTE HINZUFÜGEN

Usage Statistics

טיהור ויזואליזציה של שפעת מכלולים Ribonucleoprotein ויראלי

Dissection ברוטו של קיבה של לובסטר, Homarus Americanus</em

תרבות ראשיים electroporation פלסמיד של האיבר Murine של קורטי.

בידוד תרבות ראשונית של תאים בכבד עכברוש

בידוד והתרבות ראשית של לתאי אנדותל עכבר אב העורקים

ביטוי תשואה גבוהה של חלבונים אנושיים רקומביננטי עם transfection חולף של תאי HEK293 בהשעיה

ביטוי וטיהור של חלקיקים דמויי וירוס עבור חיסון

ממשק משתמש גרפי למעקב בסיוע תוכנה של ריכוז חלבון בהפרעות ניידות דינמיות

שיטת תיוג תעתיקים בתאים בודדים Escherichia coli לניסויים מולקולה בודדת פלורסצנטיות בחיי עיר הכלאה

בידוד תאי שסתום ראשוניים אנושיים למידול מחלות חוץ גופיות