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A “Dual-Addition” Calcium Fluorescence Assay for the High-Throughput Screening of Recombinant G Protein-Coupled Receptors
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Un saggio di fluorescenza del calcio "a doppia aggiunta" per lo screening ad alta produttività dei recettori accoppiati a proteine G ricombinanti

DOI:
10.3791/64505-v

•

08:46 min

•

December 02, 2022

•

, ,
1Department of Entomology,Texas A&M University, 2Department of Biochemistry and Biophysics,Texas A&M University

Kapitel

  • 00:04Introduction
  • 01:04Calcium Fluorescence Assay and Data Analysis
  • 07:40Results: High-Throughput, Intracellular Calcium Fluorescence Assay Mediated Screening of Small Molecule Libraries on Recombinant G Protein-Coupled Receptors (GPCRs)
  • 08:08Conclusion

Summary

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In questo lavoro, viene descritto un saggio di fluorescenza di calcio intracellulare ad alto rendimento per piastre a 384 pozzetti per lo screening di piccole librerie di molecole su recettori accoppiati a proteine G ricombinanti (GPCR). Il bersaglio, il recettore della chinina dalla zecca della febbre bovina, Rhipicephalus microplus, è espresso nelle cellule CHO-K1. Questo test identifica agonisti e antagonisti che utilizzano le stesse cellule in un test di "doppia addizione".

Tags

Keywords: G Protein-coupled ReceptorGPCRCalcium Fluorescence AssayHigh-throughput ScreeningDual Addition AssayAgonistAntagonistCell DensityCell CulturePlate PreparationLiquid Handling

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