此过程描述了小鼠Th17细胞的白细胞,积极分泌刺激后,IL – 17的检测和隔离。
互助委员会的细胞因子的分泌检测技术,允许在可行的细胞因子分泌细胞的单细胞水平和敏感隔离分泌的细胞因子的检测。为了标签IL – 17分泌细胞,小鼠脾单细胞悬液,准备和刺激,在37 ° C至PMA /离子霉素诱导细胞因子的分泌。要停止分泌细胞,然后放置在冰暴露的IL – 17的捕获试剂,结合细胞表面的白细胞和IL – 17的CD45的分泌和细胞表面附近捕获,因为它是一个双特异抗体。分泌,然后重新开始提高温度至37 ° C和IL – 17是由Catch试剂被困。分泌,然后又停了下来,放置在冰细胞。要检测出被困IL – 17,第二个IL – 17特异性抗体结合,以生物素和抗生物素- PE抗体细胞培养。细胞现在可以直接通过流式细胞仪分析或准备与反PE标记的微球随后标签隔离和浓缩。
Th17细胞在适应性免疫和炎症反应中发挥不可或缺的作用,并在推动自身免疫性炎症的重要组成部分。
此视频文件,如何使用美天旎的鼠标IL – 17的分泌含量 – 细胞富集和检测试剂盒(PE)。执行此过程时,重要的是要在您的起始细胞制备的IL – 17分泌细胞的频率估计。在适当的细胞浓度的标签和细胞因子的分泌期防止其他细胞的交叉污染,在您的暂停,并确保可靠的结果。
The authors have nothing to disclose.