Summary

Disséquer le cerveau des primates non humains dans l'espace stéréotaxique

Published: July 16, 2009
doi:

Summary

Le primate non-humain est une espèce importante pour notre compréhension de translation du traitement normal du cerveau. L'organisation anatomique du cerveau des primates peuvent fournir des indications importantes sur les conditions normales et pathologiques chez l'homme.

Abstract

L'utilisation de primates non-humains fournit un excellent modèle de translation pour notre compréhension des processus de développement et le vieillissement chez les humains<sup> 1-6</sup>. En outre, l'utilisation de primates non humains a récemment eu l'occasion d'un modèle complexe naturellement troubles psychiatriques tels que l'abus d'alcool<sup> 7</sup>. Nous décrivons ici une technique pour bloquer le cerveau dans le plan frontal du singe vervet (<em> Chlorocebus aethiops sabeus</em>) Dans le crâne intact dans l'espace stéréotaxique. La méthode décrite ici fournit un avion standard de la section entre les blocs et les sujets et minimise coupes partielles entre les blocs. Sectionnement d'un bloc de tissu dans le plan frontal facilite également la délimitation d'une zone d'intérêt. Cette méthode fournit gérable blocs de taille car un seul hémisphère de l'singe vervet rendements de plus de 1200 sections quand le tranchage à 50 microns. Par ailleurs, en bloquant le cerveau en blocs de 1 cm, elle facilite la pénétration du saccharose pour cyroprotection et permet au bloc d'être tranché sur un cryostat standard.

Protocol

Partie 1: Pré-traitement des tissus Les tissus doivent être bien perfusés avec du paraformaldéhyde, glutaraldéhyde, ou du formol. Ceci peut être réalisé grâce à la perfusion transcardial norme généralement utilisée pour la récolte d'autres organes. Dans l'étude actuelle, l'objet a été profondément sédatés avec le chlorhydrate de kétamine (10 mg / kg, im), euthanasiés avec une overdose de pentobarbital sodique (25 mg / kg, iv) et perfusé transcardiaque avec PBS 0,1 M jusqu&#3…

Discussion

Le Saint-Kitts-vervet (aethiops Chlorocebus sabeus) est un primate de l'Ancien Monde avec des motifs similaires et les taux de développement du cerveau cortical et sous-corticales à celui des humains. Cette espèce a été utilisé pour modéliser les troubles du comportement humain complexe comme un comportement anxieux, hypertension artérielle 8, 9 hémisphérectomie, la maladie de Parkinson 10, la maladie Alzhemier de 11, et l'abus d'alcool 12. Plus …

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Les auteurs tiennent à remercier pour son Ikiel Ptito appui technique continu. Subvention du CRSNG au MP.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Scalpel   Fine Science Tools 10003-12  
Scalpel blades   Fine Science Tools 10011-00  
Scissors   Fine Science Tools 14090-11 Any surgical scissors are sufficient
Rongeurs   Fine Science Tools 16121-14  
Forceps   Fine Science Tools 11027-12  
Filter paper   Fisher 09-924-150  
Stereotaxic Frame   Kopf Instruments    
Tissue slicing blade   Thomas    

Referencias

  1. Gallagher, M., Rapp, P. R. The use of animal models to study the effects of aging on cognition. Annu Rev Psychol 48. , 339-370 (1997).
  2. Clancy, B., Darlington, R., Finlay, B. Translating developmental time across mammalian species. Neurociencias. 105, 7-17 (2001).
  3. Nowakowski, R. S., Rakic, P. The site of origin and route and rate of migration of neurons to the hippocampal region of the rhesus monkey. J Comp Neurol. 196, 129-154 (1981).
  4. Rakic, P., Bourgeois, J. P., Eckenhoff, M. F., Zecevic, N., Goldman-Rakic, P. S. Concurrent overproduction of synapses in diverse regions of the primate cerebral cortex. Science. 232, 232-235 (1986).
  5. Granger, B., Tekaia, F., Le Sourd, A. M., Rakic, P., Bourgeois, J. P. Tempo of neurogenesis and synaptogenesis in the primate cingulate mesocortex: comparison with the neocortex. J Comp Neurol. 360, 363-376 (1995).
  6. Zecevic, N., Rakic, P. Development of layer I neurons in the primate cerebral cortex. J Neurosci. 21, 5607-5619 (2001).
  7. Ervin, F. R., Palmour, R. M., Young, S. N., Guzman-Flores, C., Juarez, J. Voluntary consumption of beverage alcohol by vervet monkeys: population screening, descriptive behavior and biochemical measures. Pharmacol Biochem Behav. 36, 367-373 (1990).
  8. Palmour, R. M., Mulligan, J., Howbert, J. J., Ervin, F. Of monkeys and men: vervets and the genetics of human-like behaviors. Am J Hum Genet. 61, 481-488 (1997).
  9. Boire, D., Théoret, H., Ptito, M. Stereological evaluation of neurons and glia in the monkey dorsal lateral geniculate nucleus following an early cerebral hemispherectomy. Exp Brain Res. 142, 208-220 (2002).
  10. Bjugstad, K. B., Teng, Y. D., Redmond, D. E. J. r., Elsworth, J. D., Roth, R. H., Cornelius, S. K., Snyder, E. Y., Sladek, J. R. Human neural stem cells migrate along the nigrostriatal pathway in a primate model of Parkinson’s disease. Exp Neurol. 211, 362-369 (2008).
  11. Lemere, C. A., Beierschmitt, A., Iglesias, M., Spooner, E. T., Bloom, J. K., Leverone, J. F., Zheng, J. B., Seabrook, T. J., Louard, D., Li, D., Selkoe, D. J., Palmour, R. M., Ervin, F. R. Alzheimer’s disease abeta vaccine reduces central nervous system abeta levels in a non-human primate, the Caribbean vervet. Am J Pathol. 165, 283-297 (2004).
  12. Mash, D. C., Staley, J. K., Doepel, F. M., Young, S. N., Ervin, F. R., Palmour, R. M. Altered dopamine transporter densities in alcohol-preferring vervet monkeys. Neuroreport. 7, 457-462 (1996).
  13. Burke, M. W., Palmour, R. M., Ervin, F. R., Ptito, M. Neuronal reduction in frontal cortex of primates after prenatal alcohol exposure. Neuroreport. 20, 13-17 (2009).
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Citar este artículo
Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space. J. Vis. Exp. (29), e1259, doi:10.3791/1259 (2009).

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