パーキンソン病モデルマウス：6 - OHドーパミンの病変から行動試験に
Summary
パーキンソン病は、実験的に6 – OH -ドーパミンにより誘導することができます線条体へのドーパミン作動性神経支配の喪失によって引き起こされる。我々は、定位病変を実行するとマウスのアポモルヒネ誘発回転動作を監視する方法について説明します。このモデルでは、パーキンソン病に対する新しい治療法をテストするのに便利で信頼性の高いです。
Abstract
パーキンソン病（PD）は、性別に関係なく、世界中で少なくとも650万人、、、社会、民族、経済的、または地理的な境界に影響を与えます。このような振戦、剛性とbradikinesiaなどの主要な症状は、ドーパミン作動性細胞の3 / 4が黒質で失われているときに開発し、線条体のモーター回路の滑らかな、協調制御を提供するために失敗する。うつ病と幻覚が一般的であり、認知症は最終的に患者の20％で発生します。この時点で、PDの進行を遅らせたり、停止するための治療法はありません。これらの症状の緩和に向けたよりむしろ、薬現在利用可能な目的。新しい外科的戦略は可逆的脳深部構造の電気刺激によって機能的に損傷を受けた回線に切り替えることがありますが、脳深部刺激は大きな前進ですが、それはすべての患者には適していません。したがって、前臨床モデルで新たな細胞療法のアプローチをテストするために必要なままです。
ドーパミン作動性経路の選択的な神経破壊は、薬物や酸化、有害な化学物質を枯渇させるのに対し、6 – ヒドロキシドーパミンの注射（6 – OHDA）またはMPTP（1 – メチル-4 – フェニル-1,2,3,6 – tertahydropyridine）で再現できる可能性がありますまた、げっ歯類におけるPDの特定の機能を再現。 MPTPとは異なり、6 – OHDAの病変は、大規模な不可逆的な神経細胞の損失を引き起こす、および単方向または二国間することができます。 6 – OHDAの病変モデルの信頼性が高い、堅牢な運動障害につながる、とrats1の研究の40年後に最も広く使用されています。移植細胞と宿主間の相互作用は、現在マウスではなくラットでより徹底的に調査することができるように、モデルがそれは最近4を特徴としているマウスの2,3、に移調されています。
このビデオでは、我々はどのように徐々に定位的に挿入マイクロシリンジの針を介して6 – OHDAの2.0μLを提供することにより、病変麻酔したマウスの左nigro – 線条体経路をに示す。ドーパミン作動性入力の損失は、日以内に発生し、機能障害は、ドーパミン作動薬5によって誘導される評価の動物の回転により、術後数週間、数ヶ月にわたって監視することができます。ここでは、病変の後一ヶ月に測定、アポモルフィンの単回皮下投与後10分に発生した、フルボディ対回転を示しています。成果と欠点を以下に説明されています。
Protocol
Discussion
nigro – 線条体経路の豊富な一方的な病変は、線条体に6 – OHDAの単一定位注射によりマウスに確実に達成することができます。病変の程度は、ビデオに示す。、（DA、すなわちL -チロシンフェニルアラニンへの変換の合成の段階にレート制限を触媒する）チロシン水酸化酵素の免疫組織化学による事後検証することができます
生体内で、アポモルヒネにより誘発される対の?…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
FundaçãoパコデアンパロPesquisaでサポートされているエスタードは、リオデジャネイロ（FAPERJ）とConselhoナシオナルデDesenvolvimento Científico電子モンテ（CNPqを）行うのですか。我々は、そのコメントは私が原稿とビデオの両方を向上させる助け匿名のレフェリーに感謝しています。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Ketamine hydrochloride | König | 90-120 mg/Kg | ||
| Xylazine hydrochloride | König | 10 mg/Kg | ||
| Atropine Sulfate | Isofarma | Isofarma | ||
| 6 – Hydroxydopamine Hydrochloride | Sigma-Aldrich | 5 μg/μL | ||
| L – Ascorbic Acid | USB Corporation | 0.2% | ||
| Xylocaine (Lidocaine Chloridrate) |
ASTRA Chemistry | 5% 50 mg |
||
| Nebacetin (Neomycin Sulfate + Bacitracin) | Altana Pharma | 5 mg/g + 250 Ul/g | ||
| R-(-)-Apomorphine hydrochloride | Sigma-Aldrich | 0.5 mg/Kg | ||
| GenTeal lOphthalmic ointment Hypromellose |
NOVARTIS | 0.33% |
||
| Ibuprofen | Abbott | 4 mg/ 100 ml drinking water | ||
| Povidine | JohnsonDiversey | |||
| R-(-)-Apomorphine hydrochloride | Sigma-Aldrich | 0.5 mg/Kg |
Referencias
- Ungerstedt, U. 6-hydroxy-dopamine induced degeneration of central monoamine neurons. Eur. J. Pharmacol. 5, 107-110 (1968).
- Akerud, P., Canals, J. M., Snyder, E. Y., Arenas, E. Neuroprotection through delivery of glial cell line-derived neurotrophic factor by neural stem cells in a mouse model of Parkinson’s Disease. J. Neurosci. 21, 8108-8118 (2001).
- Ghosh, A., Roy, A., Liu, X., Kordower, J. H., Mufson, E. J., Hartley, D. M., Ghosh, S., Mosley, R. L., Gendelman, H. E., Pahan, K. Selective inhibition of NF-kappaB activation prevents dopaminergic neuronal loss in a mouse model of Parkinson’s Disease. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 104, 18754-18759 (2007).
- Alvarez-Fischer, D., Henze, C., Strenzke, C., Westrich, J., Ferger, B., Höglinger, G. U., Oertel, W. H., Hartmann, A. Characterization of the striatal 6-OHDA model of Parkinson’s disease in wild type and a-synuclein-deleted mice. Exp. Neurol. 210, 182-193 (2008).
- Ungerstedt, U. 6-Hydroxydopamine-induced degeneration of the nigrostriatal dopamine pathway: The turning syndrome. Pharmacology and Therapeutics Part B: General and Systematic Pharmacology. 2, 37-40 (1976).
- . . Guidelines for the Care and Use of Mammals in Neuroscience and Behaviour Research. , 209 (2003).
- Franklin, K. B. J., Paxinos, G. . The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. , (1997).
- Hudson, J. L., Horne, C. G. v. a. n., Strömberg, I., Brock, S., Clayton, J., Masserano, J., Hoffer, B. J., Gerhardt, G. A. Correlation of apomorphine- and amphetamine-induced turning with nigrostriatal dopamine content in unilateral 6-hydroxydopamine lesioned rats. Brain Res. , 626-6167 (1993).
- Truong, L., Allbutt, H., Kassiou, M., Henderson, J. M. Developing a preclinical model of Parkinson’s disease: A study of behaviour in rats with graded 6-OHDA lesions. Behav. Brain Res. 169, 1-9 (2006).
- Harvey, B. K., Wang, Y., Hoffer, B. J. Transgenic rodent models of Parkinson’s disease. Acta Neurochir. (Wien.). 101, 89-92 (2008).
- Isacson, O. Ole Isacson: Development of New Therapies for Parkinson’s Disease. JoVE. 3, (2007).
