Elektrode Fabrication en Implantatie in Aplysia californica Voor Multi-channel Neurale en gespierd Recordings in Intact, Vrij Behaving Dieren
Summary
Een techniek is beschreven voor het implanteren van vier<em> In vivo</em> Elektroden aan de neuromusculaire controle van voedingsgedrag in monitor<em> Aplysia californica</em>.
Abstract
Het opnemen van belangrijke zenuwen en spieren van de<em> Aplysia</em> Tijdens het voeden gedrag stelt ons in staat om de patronen van neurale controle studie in een intact dier. Gelijktijdig opnemen van meerdere zenuwen en spieren geeft ons precieze informatie over de timing van neurale activiteit. Vorige opname methoden hebben gewerkt voor twee elektroden, maar de studie van extra zenuwen of spieren nodig zijn te combineren en het gemiddelde van de opnames van meerdere dieren, waardoor het moeilijk is om fijne details van de timing en fasering te bepalen, vanwege de variabiliteit van de respons op respons, en van dier naar dier. Implanteren van vier afzonderlijke elektroden heeft een zeer lage kans op succes te wijten aan de vorming van verklevingen die dieren te voorkomen van het uitvoeren van normale voeding bewegingen. We ontwikkelden een nieuwe methode van de elektrode fabricage, dat het grootste deel van de elektroden in het dier waardoor normale voeding bewegingen vermindert. Met behulp van een combinatie van lijm om de elektroden resultaten bevestigen in een meer betrouwbare isolatie van de elektrode, die langer duurt, waardoor het mogelijk om voor periodes zo lang als een week. De fabricage techniek die we beschrijven kan worden uitgebreid tot een aantal extra elektroden te nemen, en zou van toepassing zijn op gewervelde dieren.
Protocol
Discussion
Een belangrijke innovatie die heeft deze opnames succesvol is het combineren van de elektroden in een kabel. Twee elektrode opnames zijn gebruikt geweest, maar uitbreiding naar vier afzonderlijke elektroden resulteerde in de vorming van chirurgische adhesies die vaak het dier voorkomen van het maken van normale voeding bewegingen. Het combineren van de elektroden in een kabel vermindert het grootste deel van de elektroden in het dier, dat op zijn beurt vermindert de immuunrespons en laat het dier te bewegen vrijer.
…Acknowledgements
Wij dankbaar erkennen de steun van de NIH (NS047073 tot HJC). We zijn ook dankbaar dat Catherine Kehl voor haar vroege experimenten met Kwik-Sil, die moedigde ons aan om het te gebruiken voor onze applicatie.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Enamel coated stainless steel wire | California Fine Wire | 0.001D, coating h | ||
| Household Silicone II Glue | GE | |||
| Kwik-Sil Adhesive | WPI | |||
| Duro Qwik-Gel superglue | Henkel corp. | |||
| A-M Systems model 1700 amplifier | A-M Systems | Filter settings:100-1000Hz nerves,10-1000Hz I2 muscle | ||
| Axoscope 10.1 | Molecular Devices | |||
| Gold Connector Pins | Bulgin | SA3148/1 | ||
| Gold Connector Sockets | Bulgin | SA3149/1 |
Referencias
- Lu, H., Chestek, C. A., Shaw, K. M., Chiel, H. J. Selective extracellular stimulation of individual neurons in ganglia. J. Neural Eng. 5, 287-309 (2008).
- Morton, D. W., Chiel, H. J. In vivo buccal nerve activity that distinguishes ingestion from rejection can be used to predict behavioral transitions in Aplysia. J Comp. Physiol. A. 172, 17-32 (1993).
- Warman, E. N., Chiel, H. J. A new technique for chronic single extracellular recording in freely behaving animals using pipette electrodes. J. Neurosci. Methods. 57, 161-169 (1995).
- Ye, H., Morton, D. W., Chiel, H. J., J, H. nbsp;Neuromechanics of multifunctionality during rejection in Aplysia californica. J. Neurosci. 26, 10743-10755 (2006).
