Ferumoxides implantasyonu Kıkırdak Kusur İnsan Mezenkimal Kök Hücreler Etiketli
Summary
Sunumun Amaç, kıkırdak defektleri, MR görüntüleme ile görüntülendi olabilir matris ilişkili kök hücre implantları üretmek için son derece tekrarlanabilir bir yöntem göstermektir. Kök hücreler, agaroz ile karışık FDA onaylı Ferumoxides, kıkırdak hasarlarının içine implante edilerek 7T MR tarayıcı ile görüntülü olarak etiketlenir.
Abstract
Doku mühendisliği alanında özel hücreler ve fonksiyonel doku rejenerasyonu doğru mühendislik, hücre biyolojisi ve tıp ilkelerini bütünleştiren. Matrix ilişkili kök hücre implantlar (Masi) artritik veya travmatik eklem yaralanmaları nedeniyle kıkırdak defektleri yeniden hedefliyoruz. Yetişkin mezenkimal kök hücreler (MKH) chondrogenic soy hücrelerin içine ayırt etme yeteneğine sahip ve hücre tabanlı eklem kıkırdağının onarım teknolojileri için umut verici sonuçlar göstermiştir. Otolog MKH, dokuların çeşitli izole edilebilir farklılaşma potansiyelini kaybetmeden hücre kültürlerinde genişletilebilir, ve in vitro ve in vivo 1, 2 chondrogenic farklılaşma göstermiştir.
Kıkırdak hasarlarının yerel tutma ve nakledilen MKH canlılığı sağlamak amacıyla, bir iskele de sonraki farklılaşması ve proliferasyonu destekler ihtiyaç vardır. Iskele kılavuzları doku oluşumu mimarisi ve kök hücreleri tarafından üretilen ekstraselüler matriks, genişletmek için izin verir. Önceki soruşturma% 2 agaroz iskele istikrarlı hyalin kıkırdak gelişimini desteklemek ve bağışıklık yanıtlarını 3 neden olmadığını göstermiştir.
Uzun vadeli tutma Masi nakledilen kök hücrelerin kıkırdak rejenerasyonu için kritik öneme sahiptir. Demir oksit nano ile MKH Etiketleme non-invaziv MR görüntüleme teknikleri 4 de vivo izleme uzun vadeli sağlar.
Bu sunum, demir oksit nano-etiketleme MKH, kıkırdak hasarlarının hücre agaroz yapıları ve bu yapıları implantasyonu nesil tekniklerini gösterecektir. Etiketli yapıları MR görüntüleme ile non-invaziv takip edilebilir.
Protocol
Discussion
Açıklanan protokol demir oksit nano ile MKH etiket ve kıkırdak hasarlarının içine bu etiketli MKH implant tekrarlanabilir bir şekilde sağlar. Bu teknik, MR, Masi yetmezliği erken teşhis sağlayan kıkırdak hasarlarının kök hücre nakli non-invaziv bir tasviri izin verir. Etiketli hücreleri efflux çıkığı ya da MR görüntüleri nakli sitesinden etiket yok dayalı teşhis edilebilir. Bu olayların bir erken tanı ve arzu edilen bir durumdur ve hastanın gereksiz alternatif invaziv tanısal işlemler ?…
Acknowledgements
Bu çalışma, Ulusal Artrit Enstitüsü ve Kas-iskelet Deri Hastalıkları, NIH RO1AR054458 bir hibe ile desteklenmiştir.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-MEM High Glucose | Reagent | Sigma | D5648 | |
| PBS (Ca++, Mg++ free) | GIBCO | 14190-144 | ||
| Trypsin-EDTA 0.05% | Invitrogen | 25399-120 | ||
| FBS | Hyclone | SH30071.03 | ||
| Penicillin/Streptomycin | GIBCO | 15140-122 | ||
| Ferumoxides (Endorem) | Guerbet | |||
| Agarose Typ VII | Sigma | A9045 | Dilute Agarose in PBS to final concentration of 4% |
Referencias
- Mauck, R. L., Yuan, X., Tuan, R. S. Chondrogenic differentiation and functional maturation of bovine mesenchymal stem cells in long-term agarose culture. Osteoarthritis Cartilage. 14, 179-189 (2006).
- Pittenger, M. F. Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells. Science. 284, 143-147 (1999).
- Rahfoth, B. Transplantation of allograft chondrocytes embedded in agarose gel into cartilage defects of rabbits. Osteoarthritis Cartilage. 6, 50-65 (1998).
- Henning, T. D., Boddington, S., Daldrup-Link, H. E. Labeling hESCs and hMSCs with iron oxide nanoparticles for non-invasive in vivo tracking with MR imaging. J Vis Exp. , (2008).
