Summary

乳腺上皮移植の手順

Published: June 10, 2010
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Summary

この記事ではDeOme KBで開発した手順を示しています<em>ら。</em>(1959)とブリルBによって開発されたスペア手順<em>ら。</em>(2008)乳腺の断片、乳腺上皮細胞、または乳腺腫瘍細胞の移植の準備のために思春期のマウスの4番目の鼠径部乳腺脂肪体をクリアする。

Abstract

この記事ではDeOmeキロバイト 1ブリルB が開発温存手順によって開発された脂肪パッドのクリアランスの手順を説明し、比較する2、乳腺上皮移植の手続きが続く。それは乳腺上皮の著しい発展は、思春期後まで発生しないという事実が利用されるため乳腺移植の手順は、広く乳腺生物学者によって使用されます。生後3週で、乳腺上皮木の成長は、乳首の近傍に限定されていると脂肪パッドは、乳腺上皮の大部分を欠いているが、7週齢で上皮管ツリー全体脂肪体全体に拡張。したがって、上皮を含む脂肪パッドのこの小さな部分は、乳首やリンパ節の間の領域は、生後3週間で削除された場合、内因性上皮は乳腺脂肪体に移入することはありませんし、脂肪パッドは、"クリアとして記述されています"。この時点で、別のソースからの乳腺上皮は、それは脂肪体全体を通して乳管の木を拡張する可能性を秘めているクリア脂肪体に移植することができる。この手順は、決定、4,5限られた希釈で細胞を移植することにより、乳腺幹細胞の同定には、全体の動物の3遺伝子型の交絡影響することなくトランスジェニック乳腺上皮組織における腫瘍表現型の検査を含む多くの実験モデルで利用されている過形成結節は、乳腺腫瘍6に進みますし、乳腺上皮7,8の挙動に関する事前のホルモン暴露の影響を評価する場合。

三週齢の宿主マウスは、麻酔きれいにして外科的ステージに抑制。半ば矢状切開は恥骨から胸骨まで延びる、皮膚ではなく、腹膜を介して行われます。斜めカットは、それぞれの脚に向かって骨盤全体の半ばに矢状切開から皮膚を介して行われます。皮膚は4鼠径乳腺を公開するために離れて腹膜からプルされます。脂肪パッドは、リンパ節への脂肪パッドの組織の前方を削除することによってクリアされます。上皮のフラグメントまたは上皮細胞は、残りのクリア脂肪体に移植され、マウスが閉じられます。

Protocol

1。移植上皮の準備新鮮または凍結ドナー上皮組織はクリア脂肪パッドに移植したが、凍結ドナー上皮の事前準備は、移植効率の最小限の低下(> 85%の効率)とより便利ですできます。次のように凍結ドナー上皮の準備のためのプロトコルは、次のとおりです。 ドナーの移植の上皮を準備する前に、cryovialsに1ミリリットル約上皮、アリコートのた?…

Discussion

このレポートでは、我々は、乳腺上皮移植の準備のためにマウス乳腺脂肪パッドをクリアするための2つの代替方法を提示する。標準的な手順はDeOme による1959年に開発から使用されています。1は、より侵襲が、乳腺の構造と配向が容易に閲覧されているため、標準的な方法は、初心者を訓練するための好ましい方法です。しかし、温存手続きがあるため、いくつかの利点

Referencias

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Citar este artículo
Dunphy, K. A., Tao, L., Jerry, D. J. Mammary Epithelial Transplant Procedure. J. Vis. Exp. (40), e1849, doi:10.3791/1849 (2010).

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