القصبة الهوائية التقطير المباشر للمواد المذابة في الرئة ماوس
Summary
فالتجهيزات داخل الرغامى تسليم المواد المذابة مباشرة إلى الرئتين. هذا الإجراء يستهدف تسليم instillate في المناطق البعيدة من الرئة ، وبالتالي فإنه غالبا ما تدرج في الدراسات الرامية إلى دراسة الحويصلات الهوائية. ونحن نقدم بروتوكول بقاء مفصلة عن أداء فالتجهيزات داخل الرغامى في الفئران.
Abstract
فالتجهيزات داخل الرغامى تسليم المواد المذابة مباشرة إلى الرئتين. هذا الإجراء يستهدف تسليم instillate في المناطق البعيدة من الرئة ، وبالتالي فإنه غالبا ما تدرج في الدراسات الرامية إلى دراسة الحويصلات الهوائية. ونحن نقدم بروتوكول بقاء مفصلة عن أداء فالتجهيزات داخل الرغامى في الفئران. باستخدام هذا النهج ، يمكن للمرء أن الهدف إيصال المواد المذابة اختبار أو المواد الصلبة (مثل علاجات سرطان الرئة والسطحي ، والفيروسات ، و[أليغنوكليوتيد] صغيرة) في الرئة القاصي. فالتجهيزات القصبة الهوائية قد تكون المنهجية المفضلة ، عبر بروتوكولات استنشاق التي قد تستهدف في المقام الأول السبيل التنفسي العلوي ، وربما يعرض المحقق لمواد خطرة. بالإضافة إلى ذلك ، في استخدام بروتوكول تقطير القصبة الهوائية ، يمكن أن يتعافى تماما من الحيوانات الإجراء غير الغازية. وهذا يسمح لجعل القياسات الفسيولوجية لاحقة على حيوانات التجربة ، أو إعادة استخدام نفس الحيوان. يجب أن تكون كمية instillate الرئة التي أدخلت على تحديد دقيق ومتوازن لضمان استرداد osmotically الحيوانية. عادة ، يمكن عرض حجم 30-75 instillate ميكرولتر في الرئة الماوس.
Protocol
Discussion
وقد استخدمت فالتجهيزات داخل الرغامى في عدة دراسات مختلفة لتقييم سمية اختبار المركبات (6) ، وحمل السنخية إصابة الرئة (4 و 7) ، يستعاض عن السطحي (8) ، فضلا عن تغير التعبير الجيني عن طريق تسليم [أليغنوكليوتيد] صغيرة مباشرة في الرئة (5). نحن نبحث حاليا استخدام غرس 1) الفلورسنت ال…
Acknowledgements
وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة وK99 HL09222601 S & R مؤسسة جائزة منحت لUneo Ryaji MNH.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Isoflurane | Webster Veterinary Sterling , MA | 14043-220-05 | ||
| Xylazine | Lloyd Laboratories Shenandoah, IA | New Animal Drug Application #139-236 | ||
| Ketamine | Bioniche Pharma Lake Forest, IL | 67457-001-10 | ||
| Nair | Available at drug stores | |||
| 1mL SubQ Syringe | BD Syringe Franklin Lakes, NJ | 309597 | 26 5/8 G | |
| 4-0 Nylon Suture | Ethicon San Lorenzo, Puerto Rico | 1894G.S30 |
Referencias
- Driscoll, K. E., Costa, D. L., Hatch, G., Henderson, R., Oberdorster, G., Salem, H., Schlesinger, R. B. Intratracheal instillation as an exposure technique for the evaluation of respiratory tract toxicity: uses and limitations. Toxicol Sci. 55, 24-35 (2000).
- Helms, M. N., Jain, L., Self, J. L., Eaton, D. C. Redox regulation of epithelial sodium channels examined in alveolar type 1 and 2 cells patch-clamped in lung slice tissue. J Biol Chem. 283, 22875-22883 (2008).
- Helms, M. N., Self, J., Bao, H. F., Job, L. C., Jain, L., Eaton, D. C. Dopamine activates amiloride-sensitive sodium channels in alveolar type I cells in lung slice preparations. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 291, L610-L618 (2006).
- Iyer, S. S., Ramirez, A. M., Ritzenthaler, J. D., Torres-Gonzalez, E., Roser-Page, S., Mora, A. L., Brigham, K. L., Jones, D. P., Roman, J., Rojas, M. Oxidation of extracellular cysteine/cystine redox state in bleomycin-induced lung fibrosis. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 296, L37-L45 (2009).
- Li, T., Folkesson, H. G. RNA interference for alpha-ENaC inhibits rat lung fluid absorption in vivo. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 290, L649-L660 (2006).
- Sager, T., Porter, D., Robinson, V., Lindsley, W., Schwegler-Berry, D., Castranova, V. An improved method to disperse nanoparticles for in vitro and in vivo investigation of toxicity. Nanotoxicol. 1, 118-129 (2007).
- Xu, J., Gonzalez, E. T., Iyer, S. S., Mac, V., Mora, A. L., Sutliff, R. L., Reed, A., Brigham, K. L., Kelly, P., Rojas, M. Use of senescence-accelerated mouse model in bleomycin-induced lung injury suggests that bone marrow-derived cells can alter the outcome of lung injury in aged mice. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 64, 731-739 (2009).
- Yeh, T. F., Lin, H. C., Chang, C. H., Wu, T. S., Su, B. H., Li, T. C., Pyati, S., Tsai, C. H. Early intratracheal instillation of budesonide using surfactant as a vehicle to prevent chronic lung disease in preterm infants: a pilot study. Pediatrics. 121, e1310-e1318 (2008).
