Pseudofracture, un modèle reproductible murin de traumatismes musculo-squelettiques stérile, permet une évaluation de la fin du terme de post-traumatique des réponses immunitaires. Cet article décrit l'exécution de procédure de l'étape par étape le modèle, y compris le potentiel de combinaisons modèle expérimental pour permettre l'étude des traumatismes multiples.
Suite à un traumatisme il ya un début hyper-réactif réponse inflammatoire qui peut conduire à une défaillance multiviscérale et une mortalité élevée chez les patients traumatisés; cette réponse est souvent accompagné d'une immunosuppression retardée qui ajoute les complications cliniques de l'infection et peut aussi augmenter la mortalité 1-9. De nombreuses études ont commencé à évaluer ces changements dans la réactivité du système immunitaire suite à un traumatisme. 10-15
Des études immunologiques sont fortement soutenus par la grande variété des cultures transgéniques et des souris knockout disponibles pour la modélisation in vivo;. Ces aides souches dans les enquêtes détaillées pour évaluer les voies moléculaires impliquées dans les réponses immunologiques 16-21
Le défi de la modélisation expérimentale murin est un traumatisme enquête à long terme, comme les techniques de fixation des fractures chez la souris, peut être complexe et pas facilement reproductible. 22-30
Ce modèle pseudofracture, un modèle d'un traumatisme facilement reproduite, surmonte ces difficultés en immunologiquement imitant un environnement de fracture extrémité, tout en permettant la liberté de mouvement dans les animaux et la survie à long terme sans la constante, l'utilisation prolongée de l'anesthésie. Le but est de recréer les caractéristiques d'une fracture des os longs; muscle blessé et des tissus mous sont exposés à l'os endommagé et la moelle osseuse sans casser l'os natif.
Le modèle pseudofracture compose de deux parties: une blessure musculaire bilatérale écraser pour les membres postérieurs, suivie par l'injection d'une solution d'os dans ces muscles blessés. La solution d'os est préparé par la récolte des os longs des deux membres postérieurs de l'âge et le poids correspondant donateurs syngéniques. Ces os sont ensuite broyées et remises en suspension en tampon phosphate salin pour créer la solution os.
Fracture du fémur bilatérale est un modèle couramment utilisé et bien établie d'un traumatisme des extrémités, et a été le modèle comparatif au cours du développement du modèle pseudofracture. Parmi la variété des modèles disponibles de fracture, nous avons choisi d'utiliser une méthode fermée de fracture avec lésion des tissus mous comme notre rapport à la pseudofracture, car nous voulions une solution stérile encore proportionnellement graves modèle périphérique traumatisme tissulaire. 31
Le choc hémorragique est une conclusion commune dans le cadre d'un traumatisme sévère, et l'hypoperfusion globale ajoute un élément très pertinent pour un modèle de traumatisme. 32-36 Le modèle pseudofracture peuvent être facilement combinés avec un modèle de choc hémorragique d'un modèle de traumatismes multiples de gravité élevé 37.
Pseudofracture, un modèle reproductible murin de traumatismes musculo-squelettiques stérile, permet une évaluation de la post-traumatique des réponses immunitaires. Le modèle pseudofracture imite immunologiquement un environnement de fracture extrémité à travers les loisirs des caractéristiques d'une fracture des os longs: les muscles blessés et des tissus mous sont exposés à l'os endommagé et la moelle osseuse sans casser l'os natif 38,39 Une réponse biphasique immunitaire peut êtr…
The authors have nothing to disclose.
Source de financement / Nombre de biologie moléculaire de choc hémorragique GM053789
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
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Surgical blue pad | Fisher Scientific | 50-7105 | ||
Sterile Field dressings | Fisher Scientific | NC9517505 | ||
Circulating heating pad 18″x26″ | Harvard | py872-5272 | ||
Hot bead instrument sterilizer | VWR | 11156-002 | ||
Stainless steel tray 8″ x 11″ | VWR | 62687-049 | ||
Plexiglass boards (10x15x0.5cm) | University of Pittsburgh Machine shop | |||
Tape rolls 1″ | Corporate Express | MMM26001 | ||
50cc conical tube | can be purchased through any global vendor | |||
Straight side wide mouth jars (used as cap for nose cone) | VWR | 159000-058 | ||
Oster A5 clippers w. size 40 blade | VWR | 10749-020 | ||
Surgical scissors (straight – 12cm) | Fine Science Tools | 14068-12 | ||
Hemostats curved -18cm | Harvard | 81331718 | ||
Forceps (0.8mm-tip, curved-10cm) | Fine Science Tools | 11050-10 | ||
Gauze 4″x4″ | can be purchased through any global vendor | |||
1.5cc microfuge tube | can be purchased through any global vendor | |||
Ice bucket | can be purchased through any global vendor | |||
Mortar and Pestle | Fisher | 12-961AA | ||
1cc syringe w/ 25G needle | Fisher Scientific | 14-826-88 | ||
20G needle | can be purchased through any global vendor | |||
1mL pipetteman | can be purchased through any global vendor | |||
1mL pipette tips | can be purchased through any global vendor | |||
Falcon polystyrene 8ml tubes | VWR | 60819-331 | ||
Sterilization pouch 3″x8″ | VWR | 24008 | ||
Sterilization pouch 5″x10″ | VWR | 24010 | ||
MacConkey II Agar plate | BD Biosciences | 221172 | ||
Ethyl Alcohol – 200 proof | Pharmaco-AAPER | [70%] | ||
Pentobarbital Sodium (Nembutol Sodium Solution) | Ovation | 70mg/kg | ||
Aerrane (Isoflurane) | Baxter | 99.9% | ||
Triadine Povidone Iodine (Betadine) | Triad disposables | |||
Phosphate Buffered Saline (PBS) | ||||
Buprenorphine HCl | Bedford Laboratories | 0.1mg/kg |