膜片钳从花萼电容录音方法

Summary

Abstract

我们展示举行，哺乳动物的中枢神经系统的神经终端的花萼突触前膜片钳记录的基本技巧。从突触前终端电器录音允许的动作电位，钙通道电流，囊泡融合（胞吐）和随后的膜摄取（内吞作用）的测量。含有神经递质囊泡的融合导致囊膜被添加到细胞膜的花萼。在细胞膜量的增加是增加电容测量。随后的电容减少，表明细胞内吞，膜吸收或去除花萼膜的过程。内吞作用，是需要保持的花萼结构和形式将与未来的胞吐事件充满神经递质的囊泡，它也是必要的。萼举行的电容录音，可以直接和快速测量水泡在哺乳动物中枢神经系统的神经末端的释放和随后的内吞作用。此外，相应的突触后活动可同时测量通过使用配对录音。因此，一个完整的画面，在中枢神经系统的突触前和突触后的电活动是可以实现的，使用该制剂的。这里介绍的方法，片制备，鉴定举行，基本的膜片钳技术盏形态特征，和电容录音来衡量胞外分泌和内吞作用的例子。

Protocol

膜片钳安装： 光学：光学找到一个良好的细胞，并确立它的地位是非常重要的。 尝试获取细胞的清晰的图像：锋利的边缘，软前瞻性细胞。 扫描整个领域寻找良好MNTB附有萼主要细胞。旋转盘，从不同的角度去寻找盏。首先，它是确定实践气球形的终端。 接片表面的细胞，或在第二届细胞层?…